有凝固物漿膜腔積液的細胞塊制作方法

張世瓊，傅春玲，劉定榮

(重慶市涪陵中心醫院病理科，重慶408000)

有凝固物漿膜腔積液的細胞塊制作方法

張世瓊，傅春玲，劉定榮

(重慶市涪陵中心醫院病理科，重慶408000)

目的探討有凝固物的漿膜腔積液的細胞塊制作方法。方法將帶有凝固物的胸、腹水離心，取離心沉淀物制成細胞塊，按常規組織標本處理程序，石蠟包埋、切片、HE染色。結果此方法制成的切片細胞形態結構保持完好，核漿染色對比良好，圖像清楚，免疫組化染色效果好，原位雜交定位清楚、準確。結論有凝固物的漿膜腔積液制作細胞塊操作簡便，實用性強，細胞塊可用作HE染色及免疫組化染色和原位雜交檢查，對漿膜腔積液的正確診斷有較大的幫助。

細胞塊；凝固；漿膜腔積液；病理技術

漿膜腔積液脫落細胞學檢查是一種簡單、特異性較高的檢查方法，對疾病的診斷起到了較大作用。實際工作中，常常遇見送檢的胸、腹水中有凝固物，此時若行常規離心涂片染色，其陽性率必然降低，影響疾病的正確診斷。此前，對有凝固物的胸腹水，多數情況將之丟棄，致使再次穿剌檢查，增加患者痛苦。基于此種情況，筆者收集了2011年5月至2012年4月有凝固物的胸、腹水30例，嘗試將送檢的胸腹水連同凝固物離心后制成細胞塊，行HE染色及免疫組化檢查，取得滿意的效果，現介紹如下：

1 材料與方法

1.1 材料10%中性福爾馬林；乙醇；二甲苯；石蠟；Leica ASP300S脫水機；TD4-Ⅱ臺式自動平衡離心機；一次性10 ml塑料離心管；Shandon Finesse 325切片機。

1.2 方法將胸、腹水內的凝固物用鑷子輕輕夾出放入一次性塑料離心管中，取剩下的胸腹水底部部分10 ml混入盛有凝固物的塑料離心管內，平衡后放入離心機離心10 min，棄上清液，用鑷子輕輕夾出凝固物，將底部沉淀物常規涂片兩張行HE染色，再將凝固物放回一次性塑料離心管中，加入10%中性福爾馬林液固定至少30 min，用濾紙包裹凝固物放入脫水盒，與組織標本一起入Leica ASP300S脫水機，常規石蠟包埋、切片、HE染色，根據需要做免疫組化染色。

2 結果

對比細胞塊切片及常規涂片，細胞塊切片HE染色細胞量大，細胞結構清晰，核漿對比良好，染色鮮艷（圖1）；常規涂片細胞量較少，結構不清，細胞空泡變性、胞膜破裂、核染色模糊現象較為常見。免疫組化染色，細胞塊切片著色清楚，背景干凈（圖2），且實驗過程中試劑耗用量少；常規涂片厚薄不均，染色模糊，背景著色，試劑用量大。

圖1 胸水細胞塊HE切片可見散在的癌細胞，背景中可見中性粒細胞、淋巴細胞(HE×400)；圖2胸水細胞塊切片免疫組化染色，TTF1癌細胞核陽性(SP×400)

3 討論

漿膜腔積液脫落細胞學檢查對疾病的正確診斷意義重大，體液細胞塊制作技術是對脫落細胞學檢查技術的一項重要發展。有凝固物的胸、腹水制作的細胞塊，由于體液本身的纖維蛋白支架取代了外源性的細胞支架（如蛋清、脫脂棉等），使其更接近組織塊。該細胞塊具有以下優點：細胞塊切片HE染色接近組織切片HE染色，利于觀察；可根據需要再行多次切片及長期保存細胞塊；免疫組化染色效果與組織塊差異不明顯[1]，實驗結果可信度高，并且可有針對性地滴加試劑，節約試劑用量；細胞塊原位雜交檢查定位準確[2]；所需設備簡單，操作容易。基于此，我們認為此方法值得推廣。如果加大離心管容量，取液量增加至50～100 ml，效果將會更佳。

[1]陳歷國,丁顯平.粘附分子相關蛋白在漿膜腔積液脫落細胞學中的表達意義[J].海南醫學院學報,2010,16(11):1405-1408.

[2]蔣文化,吳毅林,文一智,等.細胞塊上檢測p16、HPV16用于篩查ASCUS中高度宮頸上皮內瘤變的臨床探討[J].海南醫學,2008, 19(9):15-17.

R329.2

B

1003—6350（2013）05—0737—01

10.3969/j.issn.1003-6350.2013.05.0317

2012-09-21)

張世瓊。E-mail：cqflzsq@sina.com