新生兒ABO血型系統IgM血型抗體調查分析

陳 萍，林 真，葉玉瓊，童美和，李 蕙（福建省廈門市中醫院：.檢驗科；.產科；.兒科 6009）

一般認為新生兒ABO血型系統IgM血型抗體在出生3～6個月后才合成［1－2］，但有研究發現新生兒ABO血型系統IgM血型抗體有提早合成的趨勢［3－5］。為明確新生兒IgM血型抗體產生情況，本實驗收集181例出生1周內新生兒靜脈血標本，檢測ABO血型系統IgM血型抗體，結合新生兒出生后相關指標及孕婦圍生期相關指標，探討分析新生兒ABO血型系統IgM血型抗體產生的時間及形成的相關因素，現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2010年11月至2012年8月出生的新生兒181例，收集出生1周內新生兒靜脈血標本，標本均以乙二胺四乙酸三鉀（EDTA－K3）抗凝。選取的新生兒要求健康素質評分達標，血常規、C反應蛋白、球蛋白正常，胎齡大于或等于37周、體質量大于2 000g（出生后堅持母乳喂養，體質量增加）；排除免疫球蛋白異常和存在冷（溫）自射抗體的新生兒，并排除白血病、使用免疫抑制劑或血漿擴容劑的患兒。嚴格剔除宮內感染患兒。選取條件還要求：總膽紅素正常或低危值；圍生期產婦無發熱，產前各項指標正常；無羊水胎糞污染；無胎膜早破；無新生兒窒息；出生后嚴密觀察1周無異常病理表現。

1.2 試劑與儀器 血型鑒定微柱凝膠卡、ABO細胞、0.2 mol/L 2－巰基乙醇液（2－Me）為長春博訊生物制品有限公司生產。血常規、總膽紅素、球蛋白試劑由貝克曼公司生產。C反應蛋白試劑由QuikRead公司生產。日本KUBOTA（KA－2200）血型專用離心機。

1.3 方法

1.3.1 實驗分組 將181例標本進行以下3組實驗，1組采用微柱凝膠法檢測新生兒血型反定型，2組采用鹽水試管法檢測新生兒血型反定型，3組對兩種方法均檢出血型抗體的標本再進行兩組實驗。每份標本用2－Me滅活抗體并均與生理鹽水1：1稀釋后試管法的凝集強度比較，觀察2－Me滅活前后血型抗體的凝集強度是否改變及變化程度。

1.3.2 微柱凝膠法操作 嚴格按照說明書進行，試管法操作嚴格按照全國臨床檢驗操作規程進行。

1.3.3 IgM血型抗體滅活 反定型檢出抗體者，取0.2mL血漿與0.2mL 2－Me液混合，加蓋；于37℃孵育1h以破壞IgM抗體，孵育后振蕩搖勻，分裝4支試管，每管0.1mL，各加入A、B、O細胞及自身細胞進行試管法血型反定型檢測。對照組為0.2mL血漿與0.2mL生理鹽水混合后進行試管法血型反定型檢測。顯微鏡下觀察凝集強度變化。

2 結 果

與試管法相比，采用微柱凝膠法檢測新生兒血型抗體其凝集強度、抗體檢出率明顯高于試管法，見表1。將兩種方法反定型均檢出的標本采用2－Me滅活，并同時與生理鹽水1∶1稀釋后作對照。標本經生理鹽水1：1稀釋后抗體檢出率降低，總檢出例數為65例。用試管法檢測凝集強度觀察其滅活前后凝集強度變化，凝集完全消失8例，明顯減弱55例，無改變2例。

表1 2種方法鑒定181例新生兒血型反定型檢出情況

3 討 論

ABO血型鑒定對臨床輸血和疾病的診斷十分重要，目前文獻報道均認為嬰幼兒甚至新生兒已經可以產生IgM血型抗體，且多數采用微柱凝膠法和鹽水試管法鑒定新生兒反定型血型，但并未對抗體類型IgM、IgG、IgA等進行分析［3－6］。

通過實驗發現，采用微柱凝膠法鑒定新生兒的血型抗體，其凝集強度明顯高于鹽水試管法，對凝集強度在（＋）以上的標本檢測敏感性高，對凝集強度在（±）以下的標本檢測敏感性不如鹽水試管法［6］。而新生兒血型抗體本身產生晚且抗體效價低，因此本次實驗采用2種方法對出生1周內新生兒血型反定型進行分析。

本研究結果顯示，新生兒血型抗體經2－Me滅活后，試管法凝集強度多數減弱，其中8例（8/118，6.8%）標本凝集完全消失，提示標本所含的是IgM 血型抗體，55例（55/118，46.6%）標本凝集強度明顯減弱，提示標本所含的抗體類型除IgM外，還存在IgG、IgA等抗體。實驗結果發現，出生1周內新生兒確實可以產生IgM血型抗體，但凝集強度較弱，且產生的比例較低。本實驗由于2－Me滅活時對標本進行了1∶1稀釋，使血型抗體的檢出率降低。

ABO血型抗體的產生有兩種學說，一種為遺傳學說，即抗體的產生由免疫球蛋白基因所控制，基因的轉錄、修飾、翻譯決定抗體的水平；一種為免疫學說，即抗體的產生由所接觸的抗原所控制，免疫原的強弱、劑量、免疫方式與次數決定抗體的水平［7］。根據免疫學說，新生兒產生ABO血型系統IgM血型抗體應該是接觸多糖抗原物質即類A、類B物質刺激產生，其抗體水平也是由機體持續接觸這些物質而維持。本文嚴格篩選研究對象，結合新生兒相關檢驗指標及孕婦圍生期相關指標，剔除宮內感染的新生兒。結果發現健康的新生兒IgM血型抗體均有較高的檢出率，因此推斷新生兒產生ABO血型系統IgM血型抗體與宮內感染并無直接關系。

分析宮腔內多糖抗原物質的來源有外源性和內源性。從ABO血型抗原的形成分析，ABO血型抗原是基因的間接產物，相關的基因編碼合成各種糖基轉移酶，而后這些酶催化合成抗原多糖鏈和抗原表位糖分子到H抗原，形成A抗原、B抗原。雖然共享同一種受體底物，但是A和B等位基因編碼的糖基轉移酶催化特異性不同的供體底物。A和B糖基轉移酶在選擇催化供體底物時并不十分精確，A和B的基因產物可能存在部分的重疊。在適當的條件下，來源于B型血清的酶能催化N－乙酰氨基半乳糖從UDP－N－乙酰氨基半乳糖到2′－巖藻糖（一種H類似物），形成一種具有A活性的結構［7］。可以推理該活性物質為一種內源性的多糖免疫物質，促使在胎兒或新生兒合成相應的IgM血型抗體。此外，A和B等位基因編碼的糖基轉移酶的活性也是重要的相關因素。外源性的多糖抗原物質來源除宮內感染外，是否有某些具有類A類B結構的小分子多糖物質通過胎盤輸送入胎兒體內，目前國內外尚少見相關研究資料。

綜上所述，出生1周內新生兒已產生ABO血型系統IgM血型抗體，與宮內感染無明顯關系，對于抗體產生的原因鮮有研究報道。孕產婦體內微環境、胎兒免疫系統的成熟與營養水平，環境污染，乃至孕期服用保健品及藥物，孕期飲食結構改變等都可能影響IgM血型抗體的產生。本實驗采用2－Me滅活IgM血型抗體，觀察其凝集強度的改變來初步驗證IgM血型抗體的存在，須進一步完善實驗設計，明確新生兒ABO血型系統IgM血型抗體產生的時間及量的變化。

［1］ 徐秀玉，楊壽旺，陳忠.臍血血清中IgG、IgM抗A（B）凝集素的初步觀察［J］.中國輸血雜志，1990，3（4）：178－180.

［2］ 沈健，陳秉宇.嬰糼兒ABO血型IgM抗體分析［J］.臨床血液學雜志，2010，23（1）：65－66.

［3］ 馬曙軒，徐樨巍，宋文琪，等.276例6月以下嬰兒ABO血型IgM抗體分析［J］.中國實驗血液學雜志，2008，16（4）：919－921.

［4］ 趙媛，李代紅，劉偉，等.出生1周內新生兒ABO血型IgM抗體分析［J］.廣東醫學，2011，32（15）：2012－2013.

［5］ 符小玲.198例嬰幼兒ABO血型IgM抗體分析［J］.海南醫學，2010，21（21）：113－115.

［6］ 李萌，馮麗，王曉衛，等.新生兒血型抗體產生情況分析及微柱凝膠法與鹽水試管法的結合應用［J］.南京醫科大學學報：自然科學版，2012，32（8）：1174－1176.

［7］ Daniels G.Human blood groups［M］.Oxford，England：blackwell scientific publications，1995.