美創AMAX－200血凝分析儀性能的初步評價

張鴻偉，劉 斌（.昆明市第一人民醫院檢驗科 6500；.楚雄醫藥高等專科學校檢驗系醫學檢驗專業007級5班，云南楚雄 675005）

本院檢驗科急診化驗室引進AMAX－200凝血分析儀使用已兩年，并且為24h運轉，為了更好地了解該儀器的性能，根據《醫學實驗室質量與能力認可準則》的要求，設備在常規使用中應顯示出能夠達到規定的性能標準，亦需進行性能評估［1］。根據國際血液學標準委員會（ICSH）和美國國家臨床實驗室標準委員會（CLSI）的有關文件要求［2－3］，并參考了部分文獻資料［4－6］，作者用新鮮血漿和質控血漿從精密度、準確度、攜帶污染率、抗干擾能力（以影響度作為評價指標）等方面對美創AMAX－200凝血分析儀磁珠凝固法檢測的常規凝血項目進行性能初步評估，現將結果報道如下。

1 材料與方法

1.1 儀器 德國美創AMAX－200血凝分析儀，儀器操作和維護保養遵循儀器使用說明書。

1.2 試劑 （1）凝血酶原時間（PT）：天津美創太平洋科技有限公司生產，批號T－812，ISI值為1.04。（2）凝血酶時間（TT）：上海太陽生物技術有限公司生產，批號：122041。（3）活化部分凝血活酶時間（APTT）：德國美創（北京美創公司）生產，批號：TE09835。（4）纖維蛋白原 （Fib）：德國美創（北京美創公司）生產，批號：TOC031。

1.3 混合血漿的準備

1.3.1 樣本采集方法 抗凝全血標本用真空負壓采血管采集2.7mL靜脈血，枸櫞酸鈉（109mmol/L）抗凝劑0.3mL抗凝，抗凝比例為1∶9，充分混勻。

1.3.2 正常混合血漿的制備 收集健康體檢人員血漿20份，男女各半，采血后半小時內3 000r/min離心10min后每管收集1.5mL至干凈容器內，總共約30mL充分混勻，分裝后密封放置于－80℃冰箱保存待用。

1.3.3 異常混合血漿的制備 收集肝移植患者及肝病患者異常血漿20份，男女各半，采血后半小時內3 000r/min離心10 min后每管收集1.5mL至干凈容器內，總共約30mL充分混勻，分裝后密封放置于－80℃冰箱保存待用。

1.4 干擾物的準備

1.4.1 溶血物的準備 用血常規管采集靜脈血3mL，1 500 r/min離心5min，棄去上層血漿，留下紅細胞層，加入蒸餾水后充分混勻，待紅細胞完全破壞后上機測血紅蛋白濃度，待用。

1.4.2 高脂血的準備 收集臨床上乳靡血清3mL，上機測量三酰甘油（TG，5.64mmol/L），放干凈容器內，充分混勻密封后放置于－80℃冰箱保存待用。

1.4.3 高膽紅素血準備 收集臨床上黃疸血清3mL，上機測量總膽紅素（TBil，3 198μmol/L），放在干凈容器內，充分混勻密封后放置于－80℃冰箱保存待用。

1.5 方法

1.5.1 精密度試驗 根據CLSI的EP5－A2文件相關要求［3］，在美創AMAX－200血凝儀上分別測定正常和異常水平混合血漿的PT、APTT、TT和FIB，以了解儀器的重復性。（1）批內精密度：收集的冷凍正常混合血漿和異常血漿，用同一批號的試劑3h內連續重復測定正常和異常混合血漿各20次。（2）日間精密度：用購買的質控血漿每日檢測一次，連續進行30d檢測。

1.5.2 準確度試驗 AMAX－200儀器經正常維護保養后，使用廠家配套的定值標準血漿檢測3次，將所得數據取均值與定值標準血漿靶值計算偏倚。

1.5.3 攜帶污染率試驗 取高值和低值兩個不同濃度的混合血漿，先對高值標本重復測定3次（H1、H2、H3）后，緊接著對低值標本重復測定3次（L1、L2、L3），計算攜帶污染率。計算公式：污染率（%）＝｜L1－L3｜/｜H3－L3｜×100%。

1.5.4 抗干擾能力試驗 即血凝儀在有異常樣品或干擾物存在情況下的抗干擾能力。干擾因素包括溶血（Hb 6g/L）、高脂血（TG 5.64mmol/L）、高膽紅素血（TBil 3 198μmol/L）等干擾性試驗，按一定比例加入正常混合血漿，分別在AMAX－200血凝儀上測定PT、FIB、TT、APTT各2次，取平均值。以未加干擾物的混合血漿測定值為標準，計算出影響度，以影響度作為評價指標。影響度（%）＝（加干擾物混合血漿測定值－未加干擾物混合血漿測定值）/未加干擾物混合血漿測定值×100%。

1.5.5 精密度及準確度的判定 依據按NCCLS提出的PT、APTT、FIB總允許誤差（TEa）的要求。

2 結 果

2.1 精密度試驗 PT、APTT、TT和Fib各項目批內及批間變異系數均在規定的允許范圍之內，由此可見儀器重復性較好，見表1。

表1 AMAX－200凝血分析儀日內（n＝20）及日間精密度（n＝30）測定結果

2.2 準確度試驗 PT、APTT、TT、Fib各項目測定結果的偏倚%小于4%，見表2。

2.3 攜帶污染率試驗 PT、APTT、TT的攜帶污染率均不超過5%，見表3。

表2 德國美創AMAX－200密封血凝儀準確度測定結果

表3 PT、APTT、TT攜帶污染率測定結果

2.4 抗干擾能力試驗 加入干擾物的混合血漿測定值結果、各濃度干擾物對血凝影響度，見表4。

表4 各濃度干擾物對血凝影響度

3 討 論

本試驗研究表明，在AMAX－200血凝分析儀上測定PT、APTT、TT和Fib的正常水平批內及批間變異系數均小于5.00%，異常水平僅有Fib大于5.00%，原因為數值太小，在檢測下限附近。滿足實驗室檢測要求，可見該全自動凝血分析儀具有良好的重復性和穩定性。本臺儀器的精密度（CV）與文獻資料報道的機械凝固法其他儀器的CV基本一致 ，但部分項目的CV偏高值得注意；與有關文獻資料報道的光學凝固法其他儀器的CV未見明顯差異［5－6］。準確性試驗結果表明，PT、APTT、TT和Fib測定結果的偏倚率均在4%以內，與有關文獻資料報告的偏倚相符［8－9］，符合美國CLIA′88相關文件的要求，從而保證了測定值的準確性。攜帶污染率試驗結果可見，PT、TT、APTT三項的攜帶污染率在0.4%～1.1%，均不超過5.0%，表明儀器測定標本后自潔系統良好。干擾性試驗表明，該儀器抗黃疸能力強，在加入總膽紅素濃度0～3 198μmol/L時PT、Fib、TT、APTT影響度均在美國CLIA′88規定的允許偏差范圍（PT、APTT允許偏差范圍為±15%，FIB允許偏差范圍為±20%）內，但PT影響度增大（大于7%）；加入TG含量0～5.642mmol/L時，PT相比較其他項目影響度偏大（影響度為9.93%）。而溶血標本PT、Fib、APTT在血紅蛋白含量達4.8g/L時受干擾較小（影響度小于5%），但在血紅蛋白含量大于4.8g/L時 ，FIB干擾較大（影響度為－10.69%～－11.64%）。故在實際工作中應盡量避免溶血，如發生溶血應重新采集再行測定。

綜上所述，AMAX－200血凝分析儀在本院檢驗科使用兩年后仍然保持結果準確可靠和性能穩定的特點，可繼續適用于檢驗科的正常使用。

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