血培養標本采集質量控制后培養結果的觀察分析

滕廷波，周宜蘭（三峽大學附屬第一臨床醫學院檢驗科/宜昌市中心人民醫院檢驗科，湖北宜昌 443003）

資料顯示，血流感染是臨床上嚴重危及患者生命的感染性疾病，病情進展迅速，病死率高［1］。血培養是采集患者血液標本并接種到培養瓶中，用以發現、識別引起菌血癥或真菌血癥的病原微生物，是診斷菌血癥和真菌血癥基本而重要的方法。血培養結果對感染性疾病的診斷、治療和預后都有極為重要的臨床意義。血培養標本的采集對血培養的結果有至關重要的作用，因此對血培養標本的采集進行質量控制迫在眉睫。

1 材料與方法

1.1 標本來源 2010～2011年本院住院部采集的所有血培養標本。

1.2 采集要求 本院2010年臨床血培養標本的采集由臨床護士和醫生自行控制。2010年12月開始對全院參與采集血培養標本的護士進行培訓，并制作采集指南，保證熟練掌握血培養標本采集的正確方法。培訓內容包含以下幾點：（1）采集時機的掌握。只要懷疑患者有血流感染的可能，在考慮使用抗菌藥物之前，都應立即采集血培養標本。若患者已行抗菌藥物治療，則應選擇含有抗菌藥物吸附物的培養瓶，并在下一次抗菌藥物應用前采血培養。細菌通常在寒戰和發熱前1h入血，此時為采集血培養標本進行病原菌培養的最佳時機。（2）標本采集部位。成人從兩側上肢靜脈采血，至少做到一套“雙側雙瓶”。雙瓶為一瓶需氧瓶和一瓶厭氧瓶。必要時從下肢靜脈采血做第二、三套血培養。小兒從股靜脈采血5mL注入小兒瓶即可。（3）皮膚消毒與防止血培養污染要求。使用碘酊、次氯酸或洗必泰作為血培養的皮膚消毒劑，效果要優于聚維酮碘。碘酊的作用時間不能少于30s，聚維酮碘的作用時間則需要1.5～2min，嚴格按照皮膚消毒方法操作，并等待足夠消毒時間。采血之前，血培養瓶的橡皮塞需使用70%乙醇消毒并干燥，然后再進行穿刺部位的皮膚消毒。嚴格無菌操作，不允許在皮膚消毒后用手接觸待穿刺部位，除非帶有無菌手套。不推薦采血后更換注射器針頭接種血培養瓶，采用真空采血裝置能降低污染率。采血后應該立即送檢，如不能立即送檢，需室溫保存，切勿冷藏。標本接種到培養瓶后，需輕輕顛倒混勻以防血液凝固。（4）血培養的采血量要求。成年患者推薦的采血量為20～30mL，每套不少于10mL，每瓶不少于5mL。嬰幼兒患者推薦的采血量應少于患兒總血容量的1%，每瓶不少于2mL。

1.3 儀器與試劑 Bacte120全自動血培養儀，Bacte專用的成人需氧瓶、兒童瓶、厭氧瓶。培養箱為德國Heraers公司生產的專用二氧化碳孵箱。

1.4 方法 血培養標本送來后，立即放入全自動血培養儀內進行培養。病原菌的轉種及鑒定，凡血培養儀自動報告陽性后，及時轉種血平板、巧克力平板和沙保弱平板，然后置35℃二氧化碳培養箱18～24h。并在轉種同時做涂片革蘭染色。如培養5d未報警則認為該標本無細菌和真菌生長。培養出的細菌鑒定采用法國梅里埃API板條及其配套試劑和其他手工方法進行細菌鑒定。質控菌株為大腸埃希菌（ATCC25922）、銅綠假單胞菌（ATCC27853）、金黃色葡萄球菌（ATCC25923）。

1.5 統計學處理 病原菌菌譜的分析應用WHONET5.4軟件，同一患者的相同菌株作1次分析。

2 結 果

2.1 血培養陽性瓶的檢出率 2010年送檢血培養標本2 086份，189份分離到病原菌，陽性率為9.06%。其中成人瓶共計1 104份，85瓶分離出病原菌，陽性率為7.7%；小兒瓶982份，104瓶分離出病原菌，陽性率為10.6%。2011年送檢血培養標本3 184份，352份標本分離到病原菌，陽性率為11.1%。其中成人標本共計1 887份，211份標本分離出病菌（如果患者的單瓶或多瓶都是陽性，均只統計為1份），陽性率為11.2%；小兒瓶共計1 297份，141份分離出病原菌，陽性率為10.9%。2011年血培養的陽性率有明顯提高（P＜0.05），其中成人血培養陽性率較2010年有顯著提高，增加了3.5%（P＜0.01）；小兒血培養陽性率變化不大（P＞0.05）。

2.2 成人血培養瓶主要病原菌的分布情況 見表1。

表1 成人血培養瓶主要病原菌的分布［n（%）］

續表1 成人血培養瓶主要病原菌的分布［n（%）］

2.3 小兒血培養瓶的主要病原菌分布情況 見表2。

表2 小兒血培養瓶的主要病原菌分布［n（%）］

3 討 論

本資料顯示，本院血培養的菌群分布上以革蘭陽性菌為主，革蘭陽性菌中又以凝固酶陰性葡萄球菌為主，這與廈門等地區以革蘭陰性菌為主（51.3%～62.3%）有所差別［2］。凝固酶陰性葡萄球菌是人體皮膚最常見的寄居菌，有作者認為大于48h培養陽性的凝固酶陰性葡萄球菌100%為污染菌［3］。從表1和表2的數據中可以發現，血標本采集方法改進后，凝固酶陰性葡萄球菌的比率有較大幅度下降，成人由27.59%下降至16.11%，小兒由56.73%下降至30.33%。下降后的陽性率比國內其他醫院報道的陽性率（55.8%～66.1%）要低得多［4－5］。其他常見病原菌的檢出率有相應的提高，同時血培養的陽性率有一定提高。成人2010年成人血培養的陽性率為7.7%，2011年的陽性率為11.1%。小兒2010年的陽性率為10.6%，2011年的陽性率則為10.9%，這與國內文獻［6］報道基本一致。小兒血培養陽性率增高不明顯可能與凝固酶陰性的葡萄球菌陽性率降低有關。快速、準確的血培養能為臨床感染性疾病病原診斷和抗感染治療提供有力的實驗室依據。如何在提高血培養的陽性率時同時減少假陽性的產生，血培養標本采集的質量控制至關重要。

［1］ 羅小銘，歐萍，陳菊香.961份血培養的細菌及其藥敏分析［J］.中國微生態學雜志，1997，9（2）：35－36.

［2］ 房麗麗，宋秀宇，吳維生，等.廈門地區血培養病原菌分布及耐藥性分析［J］.檢驗醫學與臨床，2008，5（17）：1025－1027.

［3］ 徐雅萍，羅燕萍，周光.凝固酶陰性的葡萄球菌所致血行感染的相關研究［J］.中華醫院感染學雜志，2006，16（2）：224－226.

［4］ 許宏，董方，徐樨巍，等.患兒血培養檢出病原菌的分布及耐藥性分析［J］.中國實驗診斷學，2009，13（6）：809－811.

［5］ 陳群英，黃明海.新生兒血培養的菌譜調查有耐藥性分析［J］.中國衛生檢驗雜志，2009，19（5）：1091－1092.

［6］ 楊敬芳，李繼紅，王鑫，等.6 445份血培養分離菌的分布特征及耐藥譜型研究［J］.中華醫院感染學雜志，2003，13（6）：575－577.