正心泰膠囊中毛蕊異黃酮葡萄糖苷的高效液相測定含量

任利斌

（貴州同濟堂制藥有限公司，貴州 貴陽 550000）

正心泰膠囊中毛蕊異黃酮葡萄糖苷的高效液相測定含量

任利斌

（貴州同濟堂制藥有限公司，貴州 貴陽 550000）

目的 建立測定正心泰膠囊中毛蕊異黃酮葡萄糖苷的含量的高效液相色譜法。方法 反相液相色譜法，色譜柱為Waters XBridge-C185μm 250mm×4.6mm，流動相：乙腈-0.2%磷酸（30∶70），波長260nm，流速1mL/min。結果 線性范圍：0.12442～1.2442μg，回歸方程：Y=907200.29X-6781.48，相關系數0.9999，平均回收率 96.74%，RSD=1.8%（n=6）。結論 此方法專屬性強、精密度高、重現性好，可作為正心泰膠囊的質量控制。

正心泰膠囊；毛蕊異黃酮葡萄糖苷；HPLC

正心泰膠囊由黃芪、葛根、丹參、槲寄生、山楂和川芎六味中藥組成，是中國藥典收載品種。本制劑具補氣活血，通脈益腎。用于冠心病、心絞痛表現為氣虛血瘀兼腎虛癥候者。證見胸痛、胸悶、心悸、乏力、眩暈、腰膝酸軟等。根據有關文獻[1]也對葛根中所含葛根素進行了含量測定，但對處方中君藥的黃芪無含量測定，黃芪具有益氣固表，利尿托毒，斂瘡生肌的功效，為了更好的控制產品的質量，選擇黃芪中所含毛蕊異黃酮葡萄糖苷的作為含量指標，本實驗通過對其中毛蕊異黃酮葡萄糖苷為指標，采用高效液相色譜法測定其含量，方法簡單，操作方便，結果可靠，可以作為控制正心泰膠囊的質量提供指導。

1 儀器與試藥

LC-20A高效液相色譜儀及配套設備（島津）。毛蕊異黃酮葡萄糖苷對照品（批號：111920-201106），由中國藥品生物制品檢定所提供，乙腈為色譜純，其他試劑為分析純。正心泰膠囊樣品，陰性對照樣品由貴州百祥制藥有限責任公司提供。

2 方法與結果[2]

2.1 色譜條件

色譜柱：Waters XBridge- C18柱（250mm×4.6mm，5μm）；流動相：乙腈-0.2%磷酸（30：70），柱溫：30℃；檢測波長為260nm；流速：1mL/min。

2.2 對照品及供試品溶液的制備

2.2.1 對照品溶液的制備：精密稱取毛蕊異黃酮葡萄糖苷對照品6.221mg于100mL的容量瓶中，加甲醇至刻度，即得每1mL含毛蕊異黃酮葡萄糖苷0.06221mg的對照品溶液。

2.2.2 供試品溶液的制備：取本品內容物研細，取約1.5g，精密稱定，精密加入甲醇50mL，稱定重量，置超聲提取60min，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，棄去初濾液，精密吸取續濾液20mL，蒸干，殘渣加水5mL使溶解，加入處理好的D-101大孔樹脂（柱長12cm，內徑1.5cm），先用30mL水洗脫，棄去，再用70%乙醇80mL洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇使溶解，置10mL的量瓶中，加甲醇至刻度，即得。

2.2.3 陰性樣品溶液的制備：取分別不含黃芪的陰性樣品，照制備供試品溶液的方法制備。

2.3 系統適用性試驗

在上述色譜條件下，分別取對照品溶液、供試品溶液、和陰性樣品溶液，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。正心泰膠囊中各成分分離完全（分離度＞1.5），陰性樣品無干擾。見色譜圖1。

2.4 線性試驗

圖1 正心泰膠囊中毛蕊異黃酮葡萄糖苷的HPLC圖（A：毛蕊異黃酮葡萄糖苷對照品；B：供試品；C：缺黃芪的陰性樣品）

精密吸取對照品溶液（0.06221mg/L）2、6、10、14、20μL注入液相色譜儀，測定其峰面積，并以峰面積值為縱坐標（Y），進樣量（X）的為橫坐標，得到回歸方程A=907346.15X-6781.48，r=0.9999；由表可知毛蕊異黃酮葡萄糖苷在0.1244～0.1244μg有良好的線性關系。

2.5 精密度試驗

精密吸取同一供試品溶液10μL，重復進樣6次，測得毛蕊異黃酮葡萄糖苷峰面積積分值為656437.4，RSD=0.63%。

2.6 重復性試驗

取為同一批號（20120121）樣品6份，照“2.2.2”項下方法操作，進樣，測出峰面積并計算含量，毛蕊異黃酮葡萄糖苷的平均含量為：1.2092mg/g。RSD為：1.57%。

2.7 穩定性試驗

取同一供試品溶液，分別于0、2、4、6、8、12、18、24h依法測定，記錄峰面積積分值。RSD為0.85%，結果表明樣品溶液在24h內穩定。

2.8 回收率試驗

精密稱取已知含量的同一批正心泰膠囊6份，每份0.75g，精密稱定，置錐形瓶中，分別精密加入一定量的毛蕊異黃酮葡萄糖苷對照品溶液，揮干溶劑，照“2.2.2”項下方法操作，按上述色譜條件測定含量，計算回收率，毛蕊異黃酮葡萄糖苷加樣回收試驗結果96.74%，RSD為1.8%。

2.9 樣品測定及結果分析

對3批樣品按上述含量測定方法進行含量測定，測定結果見表1。

表1 樣品測定結果（n=3）

3 討 論

3.1 本品為《中國藥典》2010年版一部品種，方中黃芪為君藥，沒有對其進行含量測定控制，不能很好的反應制劑的質量，通過對處方中黃芪中毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量的控制，使制劑的質量得到更大的提高。

3.2 試驗中通過使用大孔樹脂D-101，去除了對測定的成分毛蕊異黃酮葡萄糖苷的干擾，使所得的樣品色譜圖中毛蕊異黃酮葡萄糖苷峰形較好，與其他峰分離度＞1.5，同時陰性對照樣品無干擾。

[1] 國家藥典委員會.中國藥典[S].北京:中國醫藥科技出版社,2010: 283-619.

[2] 石子儀,鮑忠,姜勇,等.不同來源黃芪藥材中毛蕊異黃酮葡萄糖苷和芒柄花素的定量分析[J].中國中藥雜志.2007,32(9):779-783.

Determination of Calycosin 7-O-β-D-Glucopyranoside in Zhengxintai Capsules by HPLC

REN Li-bin
(Guizhou Tongjitang Pharmaceutical Co., Ltd., Guiyang 550000, China)

Objective To establish a method for determining the content of Calycosin 7-O-β-D-Glucopyranoside in Fufang Banmao Capsule. Methods The product was analyzed by HPLC,using Waters XBridge-C18column(250mm×4.6mm, 5μm),with acetonitrile-0.2% phosphate (30∶70) as the mobile phase,the flow rate was 1.0mL/min and the detection wavelength of 260nm.Results Linearity in the sample size range of 0.12442～1.2442μg for Calycosin 7-O-β-DGlucopyranoside. The average recoveries for Calycosin 7-O-β-D-Glucopyranoside was 96.74%(RSD of 1.8%).Conclusion The method is convenient and accurate. It can be applied to the quantitative determination of the preparation.

Zhengxintai Capsules; Calycosin 7-O-β-D-Glucopyranoside; HPLC

R282

B

1671-8194（2013）28-0036-02