HPLC法測定復方氯霉素滴耳液中氯霉素及地塞米松磷酸鈉的含量

潘文嘉 林 曉 蔡海珠 林堅濤*

（廣東醫學院，廣東 東莞 523808）

HPLC法測定復方氯霉素滴耳液中氯霉素及地塞米松磷酸鈉的含量

潘文嘉 林 曉 蔡海珠 林堅濤*

（廣東醫學院，廣東 東莞 523808）

目的 建立復方氯霉素滴耳液的質量標準。方法 采用高效液相色譜法對復方氯霉素滴耳液中的氯霉素和地塞米松磷酸鈉進行定性鑒別及含量測定。結果 在高效液相色譜法中，氯霉素在 0.02652 ～ 0.2122mg/mL 范圍內線性關系良好（r2=0.9999），平均回收率為99.2%，RSD ＝ 0.19%；地塞米松磷酸鈉在 0.01068 ～ 0.08262mg/mL 范圍內線性關系良好（r2=0.9999），平均回收率為 101.5%，RSD ＝ 0.47%。結論 所建立的方法能可靠準確地進行定性定量測定，可用于復方氯霉素滴耳液的質量控制。

復方氯霉素滴耳液；氯霉素；地塞米松磷酸鈉；高效液相色譜法

復方氯霉素滴耳液是東莞市人民醫院生產的一種醫院制劑，由氯霉素和地塞米松磷酸鈉為主藥制成，含氯霉素0.025%、地塞米松磷酸鈉0.005%，具有抗炎、抗過敏作用，臨床上主要用于治療急性或慢性化膿性外耳道炎和中耳炎的治療[1]。為有效控制制劑的質量，本實驗用HPLC法同時測定氯霉素及地塞米松磷酸鈉的含量，獲得了較理想的結果[2]。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Agilent LC-10AD 高效液相色譜儀，Mettler AB265-S 精密分析電子天平。

1.2 試劑

氯霉素對照品（中國藥品生物制品鑒定所，批號：130555-200501），地塞米松磷酸鈉對照品（中國藥品生物制品鑒定所，批號：100016-200011B），復方氯霉素滴耳液（由東莞市人民醫院制劑室提供），乙腈為色譜純（天津四友）；水為超純水。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱為SynergiC18（4.6mm×250mm）；流動相為0.1%庚烷磺酸鈉溶液（取0.1%庚烷磺酸鈉溶液500mL與二甲基甲酰胺5mL、冰醋酸0.5mL，混勻）-乙腈（75∶25）[3]；檢測波長：272nm；流速：1mL/min。

2.2 氯霉素和地塞米松磷酸鈉線性試驗

精密稱取氯霉素和地塞米松磷酸鈉適量，用流動相進行溶解，制成濃度范圍分別在0.02652～0.2122mg/mL和0.01068～0.08232mg/mL內的5種不同濃度的溶液。上述5種濃度的溶液各取20μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖。以濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，求出得氯霉素回歸方程為：y=2024666.87x+206.39（n=5，r=0.9999）；地塞米松的回歸方程為y=6733296.5x-61.2（n=5，r=0.9999）結果表明，氯霉素在0.02652～0.2122mg/mL，地塞米松磷酸鈉在0.01068～0.08232mg/mL范圍內濃度與峰面積線性關系良好。

2.3 樣品測定

精取本品適量，用流動相定量稀釋制成每1mL中含氯霉素0.1mg的溶液，取續濾液20μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另精稱氯霉素對照品和地塞米松磷酸鈉對照品適量，加流動相定量稀釋制成每1mL中各含0.1mg和0.02mg的溶液，搖勻，取20μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標法以峰面積計算，即得[4]。

氯霉素和地塞米松磷酸鈉的液相測定圖譜如圖1、表1所示。

圖1 氯霉素和地塞米松磷酸鈉液相圖譜

2.4 回收試驗

精密稱取氯霉素和地塞米松磷酸鈉適量，制成濃度為0.1030mg/m和0.2033mg/mL的溶液。分別精取3，5，7mL上述兩種溶液置100mL容量瓶中，加2mL供試品，用流動相定容。同法制備3種不同濃度的樣品。測得氯霉素和地塞米松磷酸鈉的平均回收率分別為99.2%和101.5%，RSD分別為0.19和0.47%，說明本方法回收率良好。

2.5 精密度試驗

同一份樣品連續進樣6次，地塞米松磷酸鈉和氯霉素峰面積的RSD%分別為0.96、1.23，結果表明，本方法的精密度良好。

2.6 溶液穩定性試驗

取本品樣品一份，按含量測定方法測定其峰面積，再分別于2，4，6，8h后測定，對地塞米松磷酸鈉和氯霉素峰面積進行比較，結果表明，地塞米松磷酸鈉和氯霉素峰面積的RSD%分別為0.65、1.32說明，本品溶液穩定性良好。

表1 三批樣品的含量測定數據

3 討 論

按文獻資料[6,7]，實驗中曾采用甲醇-水（65∶35）和phenomenex luna柱進行實驗，但由于未能使兩組分的峰形或分離度達到要求，故最終實驗后選用色譜柱SynergiC18（4.6mm×250mm）和流動相0.1%庚烷磺酸鈉溶液（取0.1%庚烷磺酸鈉溶液500mL與二甲基甲酰胺5mL、冰醋酸0.5mL，混勻）-乙腈（75∶25）作為色譜條件，結果主峰峰形好且分離度符合要求。

[1]中華人民共和國衛生部藥政局.中國醫院制劑規范[M].2版.北京:中國醫藥科技出版社,1995:103.

[2]國家藥典委員會編.中國藥典(第2部)[S].北京:化學工業出版社, 2005.

[3]王增壽.高效液相色譜法測定復方氯霉素洗劑中氯霉素與水楊酸的含量[J].溫州醫學院學報,2001,43(3):194-195.

[4]費壽耆.紫外分光光度法測定痤瘡搽劑中甲硝唑和氯霉素的含量[J].中國醫院藥學雜志,1994,14(2):75-78.

[5]吳美芳.高效液相色譜法測定氯霉素注射液中氯霉素的含量[J].海峽藥學,2007,19(1):39-40.

[6]Gwendolyn S Campbell GS,,Richard P,et al. Detection and Quantitation of chloramphenicol by Com-petitive Enzyme-Linked Immunoassay[J].Antimicrobial Agents Chemotherapy,1984,25 (2):205-211.

[7]金克寧.高效液相色譜法測定氯麻滴鼻液中氯霉素和鹽酸麻黃堿的含量[J].中國醫院藥學雜志,2002,22(3):145-146.

Determination of Chloramphenicol and Dexamethasone Sodium Phosphate in Compound Chloramphenicol of Ear Drops by HPLC

PAN Wen-jia, LIN Xiao, CAI Hai-zhu, LIN Jian-tao
(Guangdong Medical College, Dongguan 523808, China)

ObjectiveTo establish a method for the quality control of compound chloramphenicol auristillae.MethodsThe discrimination and determination of compound chloramphenicol auristillae were performed by the high performance liquid chromatography (HPLC).ResultsThe linear range for chloramphenicol was 0.02652～0.2122mg/mL ,the average recovery rate was 99.2%,RSD was 0.19%; The linear range for Dexamethasone Sodium Phosphate was 0.01068～0.08262mg/mL ,the average recovery rate was 101.5%,RSD was 0.47%.ConclusionThe method is reliable and accurate, and can be applied to the quality control of compound chloramphenicol auristillae.

Compound chloramphenicol ear drops; Chloramphenicol; Dexamethasone sodium phosphate; Performance liquid chromatography

R927.2

：B

：1671-8194（2013）08-0046-02

*通訊作者