陸 屸,陳 顥,符 煒,張 林,陸 曉,邵利堅
(1 常熟市第一人民醫院腫瘤科,江蘇 215500;2 復旦大學附屬腫瘤醫院中西醫結合科,上海 200032)
結直腸癌是一種高發病率、高病死率的疾病。因其具有轉移性,故在結直腸癌的診治中早期確診起至關重要的作用。我院2009 年8 月—2011 年12 月采用巢式逆轉錄實時PCR 技術(nested RT-PCR 法)檢測癌胚抗原信使核糖核酸(CEAmRNA),采用酶聯免疫測試法(ELISA 法)檢測人中性粒細胞多肽(human neutrophil peptides, HNP1-3),觀察結直腸癌患者術前與術后的表達,探討2 種技術及應用二者相結合的平行與系列相關檢測在結直腸癌的定性、分期,乃至在預測預后等方面評估的價值。
1.1 一般資料 結直腸癌患者70 例為觀察組,其中男44 例,女26 例,年齡28~70 歲,平均47.5±16.8歲。術前未放化療,術后經病理切片證實。同時選擇經內鏡取活組織檢查確診無癌癥的同期就診者70例為對照組,其中男39 例,女31 例為對照組,年齡30~68 歲,平均45.8±19.2 歲。兩組在性別、年齡等一般資料的差異無統計學意義(P>0.05)。結直腸癌70例患者的腫瘤部位:結腸37 例、直腸33 例;病理分化程度:低18 例、中37 例、高15 例;Dukes 分期:A期14 例、B 期24 例、C 期22 例、D 期10 例;淋巴結轉移情況:是32 例、否38 例;肝轉移8 例。
1.2 方法 (1)主要試劑及設備:100bp DNA Ladder (Bomeike ltd 公司, 天津);Taq PCR MasterMix(Bioteke Corporation ltd 公司, 北京);cDNA Synthesis Kit(Biocoen Corporation ltd 公司, 北京);XL01395 HNP1-3 Kit(Xinle Corporation ltd 公司, 上海)。儀器ChemWell2910(Awareness 公司, 美國),MultiGene Optimax PCR(Labnet 公司,美國)。(2)標本采取:空腹狀態下,結直腸癌患者在術前1 天抽取外周靜脈血6mL,EDTA 抗凝及3mL 外周靜脈血置于無菌試管分離血漿。對照組標本采取方法相同。(3)實驗測量:本實驗分別采用Nested RT-PCR 法檢測CEAmRNA 的表達,采用ELISA 法檢測HNP1-3 的表達。

2.1 臨床及病理特點 結直腸癌患者外周血清CEAmRNA 陽性表達與性別、年齡、腫瘤部位、分化程度無關,差異無統計學意義(均P>0.05),與淋巴結轉移及Dukes 分期有關(均P<0.05)。……