Auto Vue Innova全自動血型儀在ABO及Rh(D)血型鑒定中的應用價值

莫 筠，陳儉榮，譚洪揚，黃碧紅，李新亮

(臺山市人民醫院，廣東臺山529200)

ABO及Rh(D)血型鑒定是臨床常規檢測項目之一，正確的血型鑒定是臨床輸血安全的前提和基礎。目前，血型檢測的方法有多種，如玻片法、試管法、微柱凝膠法，其中微柱凝膠法因其靈敏度高［1，2］在各級醫院應用廣泛。2012年5～8月，我院采用Auto Vue Innova全自動血型分析儀、微柱凝膠法對4 655份血標本進行ABO正反定型及Rh(D)血型鑒定，同時與手工試管法進行對照。現報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料 同期我院住院部送檢血型的EDTA-K2抗凝血標本4 655份，受檢者年齡1 d～103歲。單克隆抗A、抗B血清，上海血液生物醫藥有限責任公司;單克隆抗D(IgM+IgG)血清，Millipore(UK)Ltd;Coombs試劑，上海血液生物醫藥有限責任公司。Auto Vue Innova全自動血型分析儀及其配套試劑卡，美國強生公司。

1.2 方法

1.2.1 自配A、B、O 型紅細胞 取 A、B、O 型 EDTA-K2抗凝血標本各3～5份。要求:供者年齡15～50歲，血常規結果:白細胞(WBC)、紅細胞(RBC)、血紅蛋白(Hb)、紅細胞比積(HCT)、平均紅細胞體積(MCV)均在正常范圍內，且標本無黃疸、溶血、脂濁。將同血型標本混合，用無菌生理鹽水洗滌3次，每次棄上清液時，將上層灰白色的WBC、血小板層棄去;最后在20 mL生理鹽水中加入1 mL濃縮RBC，配制成4%的RBC懸液，置于4～8℃冰箱中保存。使用前輕輕顛倒混勻，取4 mL放入儀器專用試瓶及試劑盤中。

1.2.2 檢測方法 ①手工試管法:按《全國臨床檢驗操作規程》第3版［3］進行操作。②微柱凝膠法:采用Auto Vue Innova全自動血型分析儀及其配套試劑卡，一卡六孔，分別為抗 A、抗 B、Rh(D)、陰性對照孔、A RBC、B RBC。將血標本按1 000 g離心5 min，分離出血漿和RBC。Auto Vue Innova全自動血型分析儀能自動對標本進行條形碼掃描，在對試劑卡進行讀卡與開孔后，儀器自動對標本進行吸樣、稀釋RBC、加樣、離心，反應級別評判、結果判讀、圖像保存及結果傳輸等。如出現正反定型不合、凝集反應＜++以及儀器其他讀卡錯誤等，儀器會報警提示，實驗室根據不同情況進行處理。

1.2.3 一次性判讀成功標準 儀器法是指全自動儀器能自動判讀結果，并自動傳輸至LIS系統，不需人工復讀、重新檢測或手工復查。手工法指正反定型相符。

1.2.4 統計學方法 采用SPSS11.0統計軟件，計數資料比較采用χ2檢驗。P≤0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩種方法對ABO正反定型檢測結果比較Auto Vue Innova全自動血型分析儀一次性判讀成功率為 91.04%(4 238/4 655)，手工法為 94.95%(4 420/4 655)，手工法高于儀器法(χ2=54.63，P ＜0.05)。儀器法中因為儀器及試劑卡原因導致一次性判讀失敗140份，占33.57%(140/417)。在排除儀器及試劑卡原因引起的ABO正反定型判讀失敗后，對標本進行重新分析，ABO正反定型判讀成功率提升至94.05%，(4 378/4 655)，與手工試管法比較差異無統計學意義(χ2=1.92，P ＞0.05)。儀器法及手工法一次性判讀失敗原因見表1。

表1 儀器法及手工法ABO血型一次性判讀失敗原因(份)

2.2 兩種方法對Rh(D)血型檢測結果比較 儀器法對Rh(D)血型檢測一次性判讀成功率別為99.96%(4 653/4 655)，手工法一次性判讀成功率為100%，兩種方法比較差異無統計學意義(χ2=2.00，P＞0.05)。儀器法不能成功判讀的2份均是儀器未能準確加樣，使試劑卡無被檢標本RBC，反應孔為空。

2.3 兩種方法每小時完成工作量 儀器法每小時檢測標本56份，手工法為34～46份、平均42份，主要是不同操作者熟練程度不一所致。儀器法檢測速度較手工法快。

3 討論

手工試管法雖是血型鑒定的經典方法，但操作繁瑣，特別是大批量標本檢測中易出現差錯。微柱凝膠法因其靈敏度高，在各級醫院應用廣泛。Auto Vue Innova全自動血型分析儀使用微柱凝膠法檢測血型，并且能自動實現標本識別、檢測、結果判讀及保存。本研究結果顯示，儀器法一次性判讀成功率為91.04%，低于王敏等［4］報道的 99.71%，亦低于同組試驗的手工法。主要原因:①反應柱中檢測出氣泡:多是由于試劑卡在運輸途中碰撞、顛倒所致;②反應孔為空:主要是儀器在加樣中未能將標本準確加入反應孔或加樣針堵塞;③反應柱頂端線形或纖維蛋白:原因是標本中有微小凝集塊或纖維蛋白形成，在稀釋加樣中進入反應孔，經離心后，浮在玻璃珠上層，引起已凝聚的RBC不平整，或未凝聚的RBC在反應孔底，而含有少量RBC的纖維蛋白浮在玻璃珠上層，使儀器不能正常判讀;④RBC過多或過少:細胞過多，多見于反定型孔中，由于A、B RBC試劑放置試劑架上時間過長，或使用過久，致水份揮發，使A、B RBC濃度升高;或者部分標本血漿不足，在反定型中吸樣針在吸取血漿時，同時吸入標本RBC，此情況多見于新生兒;RBC過少，主要見于正定型孔中，因為標本RBC量少或有凝塊，試劑針吸取標本中RBC不足，也可見于試劑針不完全堵塞。儀器由于以上原因引起正反定型不符而報警，可通過調整儀器、挑去標本中小凝塊、復測等方法解決。

儀器法與手工法中引起一次性判讀失敗的主要原因是標本抗體減弱，分別占59.17%和91.06%，此類標本多見于新生兒和嬰兒，由于其生理原因［5，6］，雖然正反定型不符，但其血型報以正定型結果。在儀器法中，尚有部分標本抗原、抗體減弱，但在儀器的微柱凝膠法中凝集表現為“+”或“++”，此類標本占儀器法中不能一次性判讀成功的11.75%，儀器雖然能判讀結果，但仍需要操作者進一步肉眼讀卡確認;而在手工法中，此類凝集不良的結果均由操作者直接肉眼判讀，故表現為儀器法一次性判讀成功率低，由此也反映出Auto Vue Innova全自動血型分析儀在結果判讀上的嚴謹要求，不放過任何一個可疑結果，確保結果的準確性。

本文因特異或非特異性抗體原因引起正反定型不符，儀器法和手工法分別有12份和16份，占總標本數的0.26%和0.34%，經Coombs試驗確認，特異性抗體陽性有8份，其余為非特異性抗體，主要是冷凝集或白蛋白/球蛋白比例失調，相對而言，冷凝集或白蛋白/球蛋白比例失調對儀器法的干擾小于試管法，這與不同操作者在使用試管法在檢測過程中，主觀判斷及操作有關。在試管法中，由于人為操作錯誤，尚有6份標本出現正反定型不符現象，主要是在大批量標本操作中，漏加試劑或未認真核對標本而導致錯誤發生。

本文結果顯示，儀器法及手工法對Rh(D)血型檢測結果良好，與吳穗等［7］報道相一致。3份Rh(D)陰性標本中，儀器法的試劑卡結果清晰，手工法于顯微鏡低倍鏡下觀察亦無凝聚。儀器法結果出現2份失誤均為試劑針將標本加至試劑卡上的金屬膜，經工程師對儀器試劑針重新定位后再未出現此現象。

使用Auto Vue Innova全自動血型儀每小時檢測的標本量不但較手工試管法快，且儀器從標本掃描識別、血型的檢測、結果的判讀、反應圖像的保存全部實現自動化，操作簡便快捷、結果準確、靈敏度高、易于查詢，避免在血型檢測過程中人為錯誤的出現，實現血型檢測的標準化。但為了減少儀器及試劑卡對標本檢測帶來的干擾，在儀器的使用過程中，應嚴格按儀器要求進行日維護與周維護，提供充足的試劑及清潔液，試劑卡在運輸及存放中不能顛簸和顛倒，待檢血標本要足量且無凝塊及溶血，以提高其一次性判讀成功率，并逐步代替手工法在血型鑒定中展開應用。

［1］Shin SY，Kwon KC，Koo SH，et al.Evaluation of two automated instruments for pre-transfusion testing:Auto Vue innova and techno Twin station［J］.Korean J Lab Med，2008，28(3):214-220.

［2］申衛和.ABO、RhD血型3種鑒定方法的比較［J］.中國醫藥導報，2010，7(14):159-160.

［3］葉應嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規程［M］.3版.南京:東南大學出版社，2006:246.

［4］王敏，王保龍，姚萍，等.全自動血型儀在輸血前檢查中的應用［J］.臨床輸血與檢驗，2011，13(2):123-125.

［5］楊文勇，和潤濘，蔡德康，等.新生兒ABO血型抗體產生情況調查［J］.臨床輸血與檢驗，2012，14(3):235-236 .

［6］李蔭，馮麗，王曉衛，等.新生兒抗體產生情況分析及微柱凝膠法與鹽水試管法的結合應用［J］.南京醫科大學學報(自然科學版)，2012，32(8):1174-1176.

［7］吳穗，董偉群，佟力.全自動血型及配血系統在血型鑒定中的應用［J］.山東醫藥，2012，52(30):87-88.