GP73在原發性肝癌診斷中的應用及臨床意義

趙京忠，李 嘉，樊春紅，張恒輝

（北京大學人民醫院1.檢驗科；2.肝病科，北京100044）

原發性肝癌（HCC）是世界上第五種最常見癌癥，HCC標化發病率為21／10萬，死亡率為20.2／10萬［1］。HCC死亡率高。如能及早診斷，可以采取手術切除或射頻消融等有效手段進行干預，可改善預后。

高爾基體蛋白73（GP73）又稱高爾基體Ⅱ型跨膜蛋白，存在于高爾基體上。2000年由Kladney首先描述［2］。2005年Blockz應用352例患者的研究顯示，對于早期HCC的診斷，GP73要早于AFP［3］。至今，全世界多個研究組對GP73進行研究，但缺乏適于臨床大規模應用的辦法。本研究旨在探討GP73用于HCC的診斷意義及在術后監測方面的應用。

1 資料與方法

1.1 研究對象 納入研究的為我院2010年3月至2011年3月收治的HCC患者126例，腸癌患者10例，肺癌患者20例，卵巢癌患者14例，胃癌患者20例，乳腺癌患者6例及同期健康查體人員107例。HCC患者診斷標準按照2010年NCCN指南操作。

1.2 實驗方法

1.2.1 標本采集 患者及查體者均清晨空腹采集靜脈血3ml，采血管為一次性真空促凝管，標本采集后室溫自然凝集30分鐘，以3 000r／min離心10分鐘，取上層血清放入EP管并盡快存放于－70℃冰箱待檢。

1.2.2 血清GP73測定GP73 采用酶聯免疫吸附原理檢測，試劑盒由北京熱景生物技術有限公司提供，實驗操作完全按產品說明書要求進行。測定時將血漿快速復融至室溫，并盡快檢測。

1.2.3 AFP測定 采用電化學發光法檢測，試劑由Roche公司提供，規格為100T／盒。儀器使用Elecsys170全自動電化學發光分析儀檢測，Roche公司生產。

1.3 統計學處理 采用SPSS13.0軟件進行數據分析。統計結果描述以±s表示，GP73使用單因素方差分析，以P＜0.05差異有統計學意義。

2 結果

2.1 GP73在HCC組中的濃度顯著高于其他腫瘤疾病組及健康對照組的濃度（表1）。

表1 GP73在多種腫瘤患者中血清濃度結果

HCC組GP73濃度與其他各腫瘤組（腸癌，肺癌，卵巢癌，胃癌，乳腺癌）及健康對照組相比均有統計學意義，P＜0.001。

2.2 相關分析：AFP與GP73檢測結果r＝0.434，沒有顯著相關性。也就是說，GP73為HCC獨立判斷因素。

2.3 取100例HCC患者測定GP73與AFP檢測靈敏度結果，見表2。

可見，單獨使用AFP陽性率為52%，單獨使用GP73陽性率為64%，如將兩指標聯合檢測將可使HCC檢出率達到88%，顯著提高陽性率。

2.4 隨訪HCC肝手術后41例生存，20例死亡患者GP73濃度變化情況，結果如表3。

表2 HCC患者GP73與AFP檢測靈敏度分析

可見，術后GP73濃度逐漸下降，且1年后觀測值生存組下降顯著快于死亡組患者。GP73用于臨床術后監測有一定參考指導意義。

表3 HCC隨訪1年GP73濃度（ng／ml）變化情況

3 討論

目前AFP用于HCC主要是篩查，有一定的漏檢率，而HCC早期的發現至關重要，故尋找優于AFP的常規檢查指標意義重大。研究發現GP73近些年用于HCC的診斷有一定的價值。

GP73即Ⅱ型高爾基體膜蛋白，是一個跨膜糖蛋白，正常情況下通過一個膜生成結構域錨定在順面高爾體膜上［2］。在弗林蛋白酶的作用下發生水解反應，裂解其胞外結構域，并釋放到細胞外液中。在正常肝臟，GP73主要在膽管上皮細胞中表達，而在肝細胞則很少表達甚至不表達［4］。

本文結果顯示GP73在HCC中有較高的表達，顯著高于其他腫瘤。可以作為HCC的一種血清標志物。實驗結果顯示，在其他腫瘤患者中，GP73也有一定程度的升高，可見HCC可能是一種有重要臨床價值的輔助診斷的血清腫瘤標志物。但本實驗中選取的腸癌，乳腺癌患者較少，可能對分析結果有一定影響。

研究顯示，HCC患者GP73陽性率64%，AFP陽性率52%，對于HCC的篩查顯然陽性率偏低，不能滿足臨床的強烈需求，而如果將GP73與AFP聯合檢測將可使陽性率升至88%，對于篩查效果有較大的提高。資料表明，AFP在HCC的顯著升高發生于HCC發生侵襲時，而GP73不受癌腫大小，數量侵襲等因素影響［5］。但GP73與AFP并無相關性，GP73為HCC一個獨立的判斷因素。

我們對有1年隨訪記錄的61例HCC接受手術治療的患者進行分析顯示，隨訪患者術后GP73濃度均呈現下降趨勢，且生存組比死亡組下降趨勢更明顯。故我們認為GP73對HCC患者手術預后的判斷有一定價值，可作為有效的參考指標。

目前，AFP仍然是臨床用于HCC診斷的最重要篩查指標，GP73的相關分子機制尚未明了，而其臨床應用價值已經得到一定驗證。故GP73的應用以及GP73與AFP的聯合檢測可能將為臨床提供更好的診斷參考，指導HCC的早期診斷，治療與預后觀察，降低HCC復發率及死亡率。

［1］徐海峰，楊華渝，張宏冰，等.改變肝癌早期診斷和治療現狀的新肝癌血清標志物［J］.基礎醫學與臨床，2008，28：104.

［2］Kladney RD，Bulla GA，Guo L，et al.GP73，a novel Golgi－localized protein upregulated by viral infection［J］.Gene，2000，249（1－2）：53.

［3］Block TM，Comunale MA，Lowman M，et al.Use of targeted glycoproteomics toidentify serum glycoproteins that correlate with liver cancer in woodchucks and humans［J］.Proc Natl Acad Sci USA，2005，102（3）：779.

［4］Kladney RD，Cui X，Bulla GA，et al.Expression of GP73，a resident Golgi membrane protein，in viral and nonviral liver disease［J］.Hepatology，2002，35（6）：1431.

［5］Benzoni E，Lorenzin D，Favero A，et al.Liver resection for hepatocellular carcinoma：a multivariate analysis of factors associated with improved prognosis.The role of clinical，pathological and surgical related factor［J］.Tumori，2007，93（3）：264.