不同提取方法對葛根中葛根素提取率的影響

摘 要：探討不同提取方法和提取條件對葛根中葛根素提取率的影響，找到葛根素的最佳提取方法和條件，為葛根素產品的生產提供理論基礎。研究表明：1.在4種提取方法中，醇加熱回流法是最佳的葛根素提取方法；2.比較不同的提取條件，葛根素提取的最佳實驗條件為：乙醇體積分數為60%，提取溫度為80℃，提取時間為60min，料液比為1：8，提取次數為3次。

關鍵詞：葛根；葛根素；提取率

中圖分類號：R965

文獻標識碼：A

文章編號：1007-2349（2013）05-0062-02

葛根（Pueraria DC）又名葛藤、野葛、粉葛等，是豆科多年生木質藤本植物，產我國南北各地，除新疆、青海及西藏外，分布全國。其中野葛（Pueraria lobata Willd.Ohwi）有很好的生津止渴、解表退熱、止瀉的功能。葛根中含有淀粉、人體必需的13種氨基酸（包括賴氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、等）、微量元素（鋅、鍺、鐵、硒、鈣等）和黃酮類物質（包括黃豆苷元、黃豆苷、葛根素、等）。其中葛根素具有降血壓、降血糖、促進心腦血管流動、抗氧化、解酒、解熱、增強機體免疫力和提高學習記憶力等功能，有極高的研究開發價值。本文以葛根為原料，通過比較不同的提取方法和提取條件對葛根中葛根素提取的影響，找到提取葛根素的最佳提取方法和提取條件，提高現有方法的提取效率，為葛根素產品的生產提供最佳方法，為更好的控制葛根藥材的質量提供理論依據。

1 儀器與材料

1.1 實驗儀器 戴安U3000高效液相色譜儀，Welch materials C18色譜柱（5 μm，4.6×250 mm），電子天平（Startorius），去離子水制備系統（ELGA 公司），電子分析天平（METTLERTOLEDO），超聲波清洗儀（上海聲源超聲波儀器設備），旋轉蒸發儀R-215（B CHI），水浴鍋（余姚市亞星儀器儀表有限公司），Research純水儀（上海和泰儀器有限公司）。

1.2 實驗材料 葛根樣品，采購于云南省菊花村藥材市場。葛根素標準品（中國藥品生物制品檢定所提供，批號：110752-200912），甲醇為色譜純，乙醇為分析純，水為超純水。

2 實驗方法

2.1 葛根素的檢測條件 色譜條件：色譜柱：Kromasil ODS（4.6 mm×250 mm，5μm（Wasters））；流動相：甲醇-水（體積比：38∶72）；流速：1.0 mL·min-1；檢測波長：250 nm；進樣量：20 μL

對照品溶液的制備：精密稱取葛根素對照品10 mg，用30%乙醇溶液溶解，定容到10 mL的容量瓶中，得1 mg/mL的葛根素標準溶液。

標準曲線的繪制：精密吸取葛根素對照品標準溶液1，2.5，5，10，20 μL，在上述色譜條件下依次進樣，以峰面積積分值（Y）為縱坐標，葛根素含量（X）為橫坐標繪制標準曲線，得回歸方程Y=64.604X-0.2211（R2=0.9998，n=5），葛根素檢測含量在1～20 μg范圍內與峰面積積分值線性關系良好。

2.2 提取方法

2.2.1 水加熱回流提取 稱取葛根藥材10 g，置于圓底燒瓶中，水加熱回流提取3 次，溶劑用量為40 mL，提取時間為1 h，抽濾，合并3次濾液。

2.2.2 乙醇加熱回流提取 稱取葛根藥材10 g，置于圓底燒瓶中，60%乙醇為溶劑加熱回流提取3 次，溶液用量分別為40 mL，提取時間分別為1 h。抽濾，合并3 次濾液。

2.2.3 滲漉法提取 稱取葛根藥材（粉碎后過20目篩）10 g，60%乙醇作為滲漉溶劑（用量為藥材干質量的20倍），以2.0 mL/min 的體積流量滲漉24 h，收集滲漉液。

2.2.4 超臨界CO2流體萃取法提取 稱取葛根藥材（粉碎后過40 目篩）150 g投入萃取釜中，95%乙醇作為夾帶劑，分別對萃取釜、分離釜進行加熱，使萃取溫度為40 ℃，分離釜溫度為45℃，壓力為25MPa。當溫度達到要求時開啟CO2鋼瓶，通過加壓泵對系統加壓，靜態提取1 h，CO2循環提取1 h，收集并合并萃取液。

2.3 提取條件

2.3.1 不同提取溶劑 稱取葛根藥材10 g，置于圓底燒瓶中，10、20、30、40、50、60%乙醇為溶劑，溶劑用量為40 mL，加熱回流提取3 次，提取時間分別為1 h。抽濾，合并3次濾液。

2.3.2 提取溫度 稱取葛根藥材10 g，置于圓底燒瓶中，60%乙醇為溶劑，溶劑用量為40 mL，水浴加熱，溫度分別為40、50、60、70、80℃，提取時間為2 h，提取3次，抽濾，合并3 次濾液。

2.3.3 提取時間 稱取葛根藥材10 g，置于圓底燒瓶中，60%乙醇為溶劑，溶劑用量為40 mL，水浴加熱，溫度分別為80℃，提取時間為15、30、60、120 min，提取3次，抽濾，合并3次濾液。

2.3.4 提取溶劑 稱取葛根藥材10 g，置于圓底燒瓶中，60%乙醇為溶劑，溶劑用量為20、30、40、50 mL，水浴加熱，溫度分別為80℃，提取時間為1 h，提取3次，抽濾，合并3 次濾液。

3 結果與討論

3.1 不同提取方法對葛根素純度、提取率、出膏率的影響

本實驗通過高效液相色色譜法研究不同提取方法對葛根中葛根素的純度、提取率、出膏率的影響，結果發現用超臨界CO2流體萃取法提取的葛根素總量和純度高于其他提取方法，但轉移率和出膏率很低，可見在提取過程中，造成了大量損失。而醇加熱回流提取法的葛根素總量、純度僅次于超臨界CO2流體萃取法，提取效果第二，且轉移率和出膏率為4種方法中最高的，綜合考慮，醇加熱回流法是以上四種葛根素的提取方法中最佳的一種，值得推廣應用，見表1。

3.2 不同提取條件對葛根素的含量、純度和提取率的影響

根據不同提取方法的結果，本實驗利用醇加熱法，研究不同提取條件對葛根中葛根素的含量、純度和提取率的影響。從結果可知，乙醇體積分數、提取溫度、提取時間、料液比及提取次數對葛根中葛根素的含量、純度及提取率均有影響，根據實驗結果可以確定葛根中葛根素提取的最佳實驗條件為：乙醇體積分數為60%，提取溫度為80℃，提取時間為60 min，料液比為1∶8，提取次數為3次。見圖1～5。

（收稿日期：2013-03-12）