光譜法檢測大腦神經(jīng)遞質(zhì)多巴胺

張慶云 蔡美娜 程銘 張麗 趙朋 董浩垚

摘要：多巴胺是人腦中一種重要的神經(jīng)遞質(zhì)，帕金森病等神經(jīng)系統(tǒng)病變與其含量異常有密切的關系。目前常用的多巴胺檢測方法有光譜法、高效液相色譜法、化學修飾電極法、傳感器法、毛細管電泳法，本文就光譜法做一綜述。

關鍵詞：熒光法；化學發(fā)光法；檢測

中圖分類號：O65 文獻標識碼：A 文章編號：1006-3315（2015）07-158-001

多巴胺（dopamine， DA）是一類兒茶酚胺類物質(zhì)（CAs），它存在于神經(jīng)組織及體液中，是下丘腦和腦垂體腺中的一種重要的神經(jīng)遞質(zhì)，腦垂體內(nèi)分泌功能的協(xié)調(diào)與多巴胺在腦內(nèi)特定區(qū)域的分布及含量有密切關系，導致神經(jīng)功能紊亂，是帕金森病（Parkinsons disease）發(fā)病的一個重要影響因素。另外，多巴胺還能夠引起心臟興奮，使血流量增加，以用于感染性休克和心源性休克。所以，進行多巴胺檢測的研究具有重要的現(xiàn)實意義[1]。本文就多巴胺的光譜法檢測作一綜述。

利用光譜法測定多巴胺是通過測定DA在被測定波長處的光吸收度來定量測定DA，包括熒光法和化學發(fā)光法等，這些方法簡便、快速、有效，是DA檢測中最常用的方法。

1.熒光法

湯濤等[2]報道利用鐵氰化鉀氧化DA生成多巴胺三羥吲哚，再利用鋅離子提高其熒光強度定量測定熒光，從而來測定DA。這種方法不需要對DA進行分離純化即可達到目的，操作簡便易行，分析速度快，但靈敏度仍難以滿足臨床檢驗的需要。研究發(fā)現(xiàn)，在堿性條件下，鄰苯二甲醛和B-巰基乙醇（OPAME）可與DA發(fā)生化學反應生成一種異吲哚類熒光物質(zhì)，經(jīng)400nm光波激發(fā)，產(chǎn)生462nm熒光，熒光強度與DA的濃度在一定范圍內(nèi)呈良好的線性關系。此種方法被稱為熒光分光光度法，優(yōu)點是線性范圍寬，靈敏度較高，分析速度快，操作簡便，無需昂貴的試劑和儀器。目前，已成功應用于鹽酸多巴胺在藥物制劑中含量的測定。

2.流動化學注射發(fā)光法

Nozaki等[3]報道先將硫酸根衍生物固定在微珠上，然后整體加到1ml的DA溶液中，室溫下振蕩10min，取出微珠用蒸餾水沖洗后，將其放入1ml咪唑溶液（0.1mol/L，PH=9）中，使DA的兩個酚羥基在堿性環(huán)境中與咪唑反應生成過氧化氫，最后取出50μL反應液用辣根過氧化物酶催化魯米諾流動注射化學發(fā)光法（FI-CL）分析，獲得了較好的檢測結(jié)果。該方法靈敏度較高，并且部分克服了目前用化學發(fā)光法檢測DA之前先分離的不足，可以簡化操作，減少資金設備的投資，但檢測靈敏度不能滿足臨床檢驗的需要。

參考文獻：

[1]張慶云，李佳林，鄭培，李艷霞，車雨軒，董曉東.大腦神經(jīng)遞質(zhì)多巴胺的檢測方法 [J]醫(yī)學研究與教育，2014，31（1）：87-90.

[2]湯濤等. 安徽醫(yī)學[J]1990 ，11 （5） ：9 - 11.

[3]Nozaki O ，et al .Luminescence ，1999 ，14 （6） ：369 - 374.