HSP60在胃腺癌中的表達及意義

聞淑娟　劉煒　楊順娥

【摘要】 目的 研究HSP60在胃癌中的表達及臨床意義。方法 應用免疫組化S-P法檢測60例胃腺癌手術切除標本，其中維吾爾族30例，漢族30例，所有患者術前未行放療和化療。另選切端正常粘膜組織15例作對照。以上病例均經病理檢查，診斷明確無誤。觀察HSP60在胃腺癌中的表達及其與臨床的關系。結果 1）60例胃腺癌組織中HSP60的表達陽性檢出率為：35.0%（21/60），其在胃粘膜正常組織中基本未見表達，HSP60的表達與分化程度呈負相關，在淋巴結有無轉移組的表達無統計學差異。結論 提示HSP60與胃腺癌的惡性程度有相關性，可能參與了胃癌的發展與轉移，可以作預后參考指數。

【關鍵詞】 胃腺癌；HSP60；轉移；HSPs

doi：10.3969/j.issn.1004-7484（s）.2013.08.065 文章編號：1004-7484（2013）-08-4172-01

胃癌發病率居消化道惡性腫瘤之首，浸潤和轉移是導致胃癌患者死亡的最主要原因，也是判定預后的重要指標。熱休克蛋白（heat shock protein，HSP）：熱休克蛋白（heat shock proteins，HSPs）是生物細胞在受到各種細胞損傷因素刺激時產生的一類高度保守的蛋白質，HSP60家族是細胞內含量最多的HSPs，它在多肽的解離、轉運和在蛋白復合物的裝配和分解過程中起著重要作用[1]。我們應用免疫組化方法檢測HSP60在胃腺癌中的表達，旨在探討其與胃癌的分級、轉移、浸潤的關系及其意義。

1 方 法

1.1 標本 收集選用2011年新疆腫瘤醫院病理科胃癌手術切除標本60例，所有患者術前未行放療和化療。另選切端正常黏膜組織15例作對照。高、中、低分化腺癌例數分別為11、28、21例。其中淋巴結有轉移19例，未見淋巴結轉移41例。所有標本均經病理檢查，診斷明確無誤。

1.2 切片處理 研究用蠟塊以4-5μm厚度連續切片5張，貼片后置55℃烤箱中3小時后取出備用。

1.3 試劑 本研究所用抗體HSP60均為兔抗人單克隆抗體，產品編號分別為RAB-00976，與實驗中所用其它試劑一起購自福州邁新生物技術公司。

1.4 實驗方法 采取SP法，DAB顯色。石蠟標本，4μm連續3張切片，蘇木精-伊紅染色，核實診斷。陽性對照玻片由福州邁新生物技術公司提供，陰性對照根據本實驗的情況采用空白對照，PBS代替一抗進行免疫染色并完成全過程。

1.5 結果判定 光鏡下觀察HSP60陽性反應物為細胞漿內的棕黃色顆粒。免疫組織化學染色評分標準：將著色強度評分（0分：無；1分：弱；2分：中；3分：強）和陽性細胞率評分（0分：<5%；1分：5%-10%；2分：10%-20%；3分：20%-50%；4分≥50%）之和為該病例評分值。其中0-2分定為陰性病例，>2分定為陽性病例。

1.6 結果統計 用PEMS軟件包進行X2檢驗及校正X2檢驗。檢驗水準α=0.05。

2 結 果

HSP60在正常組織中未表達，在60例腺癌組織中陽性表達例數為21例，陽性表達率為35%，明顯高于對照組（P<0.05），差異有統計學意義。我們將胃腺癌根據分化程度不同分為高中低分化3組，HSP60在胃高、中、低分化腺癌陽性表達率分別為18.23%、25.0%、57.1%，χ2值是11.66，P<0.05。統計學均有顯著性差異。而HSP60的表達與早晚期及民族無關，見表1。

3 討 論

HSP60作為分子伴侶參與腫瘤細胞周期調控和表型改變，阻止細胞終末分化后凋亡，甚至可以保護腫瘤細胞免受抗癌藥物、射線照射等因素誘發的凋亡，HSP60還可通過與原癌基因和抑癌基因及其蛋白產物的相互作用調節腫瘤細胞的增殖。目前已有報道證實許多惡性腫瘤細胞內常常高表達HSP60，而且在體內外許多不利于腫瘤生長的環境中具有腫瘤細胞保護作用[2]，導致腫瘤細胞耐藥，化療失敗。

陳志芬[3]等研究結腸癌組織中HSP60表達明顯高于正常組織，分化程度越差，表達越高，提示HSP60增高與結腸癌細胞增殖、侵襲和轉移有關。在本實驗研究中，我們發現，與正常胃組織對照，HSP60在胃癌組織中呈高表達，且不同分化程度胃癌組織中HSP60陽性表達率分別為18.23%、25.0%、57.1%，χ2值是5.66，P<0.05。表明不同分化程度的胃腺癌HSP60表達有差異，低分化腺癌高表達，證實了HSP60與胃腺癌的惡性程度有相關性，可以作為分化程度的一個指標。這與目前有報道證實許多惡性腫瘤細胞內常常高表達HSP60的結果相一致[4]。由此，可推測HSP60作為一種重要的基因參與了惡性腫瘤細胞增殖的轉錄調控過程。而本研究發現HSP60在胃癌中較正常胃黏膜存在過表達。這初步說明其過表達與胃癌的發生發展有關。因此，胃癌HSP60的過度表達，也許正是通過參與腫瘤細胞增殖的轉錄調控過程而產生的后果。在本研究中，胃腺癌淋巴結有癌轉移及無癌轉移的HSP60陽性表達率分別為47.4%、29.3%，χ2值是1.87，P>0.05。統計學無顯著性差異。說明HSP60表達與胃腺癌淋巴結轉移無密切相關。在本研究中，胃腺癌臨床分期為T0-2及T3-4HSP60的表達陽性率分別為18.9%、60.9%，χ2值是10.97，P<0.05。早期與進展期的胃腺癌HSP60的表達有顯著性差異，晚期高表達提示是在胃腺癌的進展期發揮作用。結果與楊曉春在膀胱癌中研究結論一致。因此，提示檢測HSP60可作為判斷胃癌惡性程度的一個指標。其原因還需進一步探索，也可能是由于本實驗例數較少所致。

綜上所述，HSP60與胃癌的發生發展、病期有關。HSP60可以作為評估胃癌分化程度、預后不良的指標。我們希望今后對其更深入的研究來揭開其中的秘密。

參考文獻

[1] 周林靜，劉炳亞，朱正綱，等.表達與胃癌浸潤·轉移的關系[J].上海醫學，2000，23（4）：213.

[2] Cappello F，David S，Rappa F，et al.The expression of HSP60and HSP10 in large bowel carcinomas with lymph node metastase[J].BMC Cancer，2005.

[3] 陳志芬，鄧長生，夏冰，等.HSP60和CD44V6在胃腺癌中的表達及其意義[J].世界華人消化雜志，2001，9（9）：988-991.

[4] Santarosa M，Favaro D，Quala M.Expression and release of HSP60 in renel-cancer patients[J].Int J Cancer，1995，62：271.