兩種方法檢測幽門螺旋桿菌抗體及其分型的比較

楊燕　單萬水　韓紅星　李小勇　羅莎莎

[摘要] 目的 為考核南京大淵生物技術工程有限責任公司生產的蛋白芯片法檢測幽門螺桿菌（Hp）抗體及其分型試劑的敏感性和特異性，從而判斷其在臨床診斷中的應用價值。方法 臨床上采用經SFDA注冊的深圳市伯勞特生物制品有限公司的幽門螺桿菌抗體分型檢測試劑盒（免疫印跡法）檢測幽門螺桿菌抗體及其分型（分為CagA、VacA和Urease），共檢測血清476份，檢測結果與對比試劑不同的標本用第三方經SFDA認證的試劑進行復核，對于Urease不符合的病例，采用北京康美天鴻生物科技有限公司的幽門螺桿菌尿素酶抗體檢測試劑盒（膠體金法）進行檢測，對于CagA和VacA不一致的標本，則采用上海研域生物科技有限公司提供的ELISA試劑盒進行檢測。結果 南京大淵生物技術工程有限責任公司生產的蛋白芯片法檢測幽門螺桿菌抗體及其分型試劑CagA陽性符合率94.5%，陰性符合率96.5%，總符合率95.8%（P>0.05）；Urease陽性符合率95.1%，陰性符合率92.7%，總符合率95.4%（P>0.05）；VacA陽性符合率91.6%，陰性符合率97.1%，總符合率95.2%（P>0.05）；兩種方法結果經統計學檢驗差異無統計學意義。結論 經以上結果的分析，本次臨床試驗的有效病例476例，大淵Hp分型檢測試劑盒（蛋白芯片法）與伯勞特幽門螺桿菌抗體分型檢測試劑盒（免疫印跡法）的一致率均在90%以上，產品質量達到臨床使用要求。

[關鍵詞]幽門螺桿菌抗體；分型；蛋白芯片法；免疫印跡法

[中圖分類號] R446 [文獻標識碼] B [文章編號] 2095-0616（2013）09-122-03

幽門螺旋桿菌（helicobacter pylori，Hp）是一種革蘭氏陰性桿菌，是能夠在人的胃中生存的唯一微生物種類。幽門螺旋桿菌外形為S形或弧形彎曲，細菌可以穿過胃黏膜而定居至胃上皮細胞，又能產生大量尿素酶，分解尿素在菌體周圍形成一股堿性的“氨云”，可以抵抗胃中的酸性環境，免受胃酸殺死。

1 材料與方法

1.1 研究對象

隨機選取2013年1月～2013年2月本院門診及住院患者476例。男256例，女220例；年齡1～79歲。平均年齡33.8歲。包括慢性乙型肝炎患者136例，健康體檢者108例，其他疾病患者146例（包括妊娠，結核，傷寒，甲狀腺功能低下，脂肪肝，高血壓等）以及胃炎胃潰瘍患者86例.

1.2 方法

分別用大淵生產的幽門螺旋桿菌分型檢測試劑盒（蛋白芯片法）與經SFDA注冊的深圳市伯勞特生物制品有限公司的幽門螺桿菌抗體分型檢測試劑盒（免疫印跡法）對以上476例血清進行檢測，并嚴格按照各自操作說明書的要求進行操作。對于Urease不符合的病例，采用北京康美天鴻生物科技有限公司的幽門螺桿菌尿素酶抗體檢測試劑盒（膠體金法）進行檢測，對于CagA和VacA不一致的標本，則采用上海研域生物科技有限公司提供的ELISA試劑盒進行檢測。

2 結果

2.1 兩種試劑盒檢測結果比較

南京大淵生物技術工程有限責任公司生產的幽門螺旋桿菌（Hp）分型檢測試劑盒（蛋白芯片法）與深圳市伯勞特生物制品有限公司的幽門螺桿菌抗體分型檢測試劑盒（免疫印跡法）相比較，所做臨床試驗有效病例共476例，兩者結果對比如下。

2.2 不符樣本的復檢

經以上結果的分析，本次臨床試驗的有效病例476例，大淵Hp分型檢測試劑盒（蛋白芯片法）與伯勞特幽門螺桿菌抗體分型檢測試劑盒（免疫印跡法）的一致率在90%以上。CagA指標出現的不符合病例、Urease指標出現的不符合病例、VacA指標出現的不符合病例分析見表2。

由表2可見，南京大淵生物技術工程有限責任公司所生產的幽門螺旋桿菌（Hp）分型檢測試劑盒（蛋白芯片法）與深圳市伯勞特生物制品有限公司的幽門螺桿菌抗體分型檢測試劑盒（免疫印跡法）進行比較，總體來看二者檢驗結果的一致率已達到要求，產品質量達到臨床使用要求。

3 討論

近20多年的研究發現，幽門螺旋桿菌感染是慢性活動性胃炎、消化性潰瘍、胃黏膜相關淋巴組織（MALT）淋巴瘤和胃癌的主要致病因素。1994年世界衛生組織/國際癌癥研究機構（WHO/IARC）將幽門螺旋桿菌定為Ⅰ類致癌原[1]。據文獻[2-3]報道，CagA蛋白是Ⅰ型HP致病性的標志物，CagA蛋白能夠破壞頂端連接，降解基膜，干擾上皮細胞分化，使上皮細胞失去極性及細胞黏附性，伸出遷移偽足具有侵襲性，從而導致廣泛的組織炎癥，促使潰瘍病的發生發展[4-5]。HP穿透黏液層在胃上皮細胞表面定居，對胃上皮細胞和胃粘膜屏障等造成破壞作用，刺激上皮細胞增殖，改變增殖與凋亡的關系[6-7]。VacA可使上皮細胞空泡樣變性、損傷、壞死及潰瘍，CagA本身無細胞毒性，但與VacA的轉錄等功能有關。另外，我國Hp成人感染率已達60%～80%，血清學檢查絕大部分均為陽性，因此，Hp進行分型檢測特別重要，能及時指導臨床治療。

免疫滲濾定性檢測作為檢測技術的發展趨勢及前沿技術，具有特異性好及靈敏度高的特點，因此亦越來越被臨床檢驗所重視。大淵生產的該試劑盒具有快速、簡便的特點，適于各級醫療保健機構，特別是社區基層醫院用作十二指腸潰瘍、胃潰瘍、淋巴增生性胃淋巴瘤、慢性萎縮性胃炎感染的輔助診斷。

[參考文獻]

[1] Bjorkholm B，Befrits R Jaup B，et al.Rapid PCR detection of HP associated virulence and resistance genes directly.from gastric biopsy material[J].Clin Microbiol，1998，36：3689-3690.

[2] 王思平.幽門螺桿菌VacA基因致病機理及胃十二指腸疾病的關系[J].國外醫學（消化系統疾病分冊），1997，17（3）：141.

[3] 張尤力.幽門螺桿菌VacA基因型和CagA基因及其表達產物[J].國外醫學（消化系統疾病分冊），1997，17（3）：141.

[4] Lemke LB，Ge Z，Whary MT，et al.Concurrent Helicobacter bilisinfection in C57BL/6 mice attenuates proinflammatory H. pyloriinduced gastric pathology[J].Infect Immun，2009，77（5）：2147-2158.

[5] Manente L，Perna A，Buommino E，et al.The Helicobacter pyloris protein VacA has direct effects on the regulation of cell cycle and apoptosis in gastric epithelial cells[J].J Cell Physiol，2008，214（3）：582-587.

[6] Manente L，Perna A，Buommino E，et al.The Helicobacter pyloris protein VacA has direct effects on the regulation of cell cycle and apoptosis in gastric epithelial cells[J].J Cell Physiol，2008，214（3）：582-587.

[7] 鄭海玲，莫成錦.免疫印跡法檢測幽門螺桿菌抗體結果分析[J].中國熱帶醫學，2008，8（7）：1148，1202.

（收稿日期：2013-04-16）