化學發光法檢測甲狀腺激素的臨床應用

李晶 高峰 劉婷

甲狀腺病是較為常見的內分泌科疾病之一，本病主要是由于體內甲狀腺激素分泌過多或過少，以致血清中甲狀腺激素的水平異常，進而影響機體的基礎代謝功能與狀態［1］。血清中游離三點原氨酸(FT3)、游離甲狀腺素(FT4)及促甲狀腺素(TSH)的檢測對甲狀腺病的診斷有重要價值。臨床上由于各種原因，甲狀腺疾病患者被漏診的狀況時有發生，以致于延誤了患者的最佳治療時間［2］。為了及時、盡早地發現并確診，也為甲狀腺疾病患者贏得治療機會，增加治療的成功幾率，改善預后，并徹底治療，我院2009年1月至2012年12月應用化學發光法檢測患者血清甲狀腺激素，本文探討部分結果，以期為臨床診斷甲狀腺相關疾病提供快速又準確的依據和方法，結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2009年1月至2012年12月河北省優撫醫院門診及住院收治、有典型甲狀腺機能亢進(甲亢)癥狀及體征的患者130例，將其作為甲亢組，其中男60例，女70例;年齡17～66歲，平均年齡(36±12)歲。另選擇同期甲狀腺功能減退(甲減)患者78例作為甲減組，其中男35例，女43例;年齡15～70歲，平均年齡(37±11)歲。此外，選擇同期在我院進行健康檢查且沒有甲狀腺疾病以及其他內分泌相關疾病的健康者140例作為對照組，其中男70例，女70例;年齡16～67歲，平均年齡(38±13)歲。所選3組在最初選擇時均除外嚴重的肝腎疾病和全身免疫系統疾病患者。3組在平均年齡和性別構成比例方面比較差異無統計學意義(P＞0.05)。本研究的試驗內容經我院倫理委員會批準，所有入選患者均無相關禁忌癥，且知情同意并自愿參加。

1.2 研究方法 3組受檢者均在空腹狀態下采集外周靜脈血3.0～4.0 ml，要求血液標本無脂血和溶血，并置于無抗凝劑的真空采血管中，等室溫下凝固后，以1 500～2 000 r/min的速度離心，分離出血清，并將分離所得血清置于－20℃冰箱中保存待測。所有血液標本最終統一取出溶化后進行檢測，每份標本只凍融一次。本研究采用羅氏Cobas e411全自動電化學發光免疫分析儀(羅氏診斷產品上海有限公司)及其配套試劑盒檢測 FT3、FT4、TSH、TT3、TT4 項目，全部操作嚴格按照試劑盒說明書進行，記錄全部檢測結果。

1.3 觀察指標 觀察比較3組患者 TT3、TT4、TSH、FT3、FT4的血清中含量以及3組疾病診斷符合率。

1.4 統計學分析應用SPSS 12.0統計軟件，計量資料以表示，采用t檢驗，計數資料采用χ2檢驗，P﹤0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 3組患者TT3、TT4、TSH、FT3、FT4檢測結果比較 與對照組比較，甲亢組TT3和TT4以及FT3和FT4的檢測含量均升高顯著(P＜0.05);而甲減組TT3和TT4以及FT3和FT4的檢測含量均降低明顯(P＜0.05)。同時，與對照組比較，甲亢組TSH檢測含量降低顯著(P＜0.05)，而甲減組患者的TSH檢測含量則升高顯著(P＜0.05)。見表1。

表1 3組患者TT3、TT4、TSH、FT3、FT4的檢測結果比較±s

表1 3組患者TT3、TT4、TSH、FT3、FT4的檢測結果比較±s

注:與對照組比較，*P＜0.05

?

2.2 3 組患者 TT3、TT4、TSH、FT3、FT4 的診斷符合率比較

FT3和FT4在甲亢組及甲減組患者中的診斷符合率均優于TT3和TT4(P＜0.05)，甲亢組患者中FT3的診斷符合率優于FT4(P＜0.05)，甲減組患者中FT4的診斷符合率優于FT3(P＜0.05)。還有，TSH對甲亢和甲減組患者的診斷符合率均較高，分別為97.7%和94.9%。見表2。

表2 3組TT3、TT4、TSH、FT3、FT4診斷符合率比較 例(%)

3 討論

甲狀腺是人體內非常重要的內分泌腺體器官之一，它的主要功能是攝取及聚集碘，并且還能以碘為主要原材料，進一步地合成、貯存及分泌甲狀腺激素［3］。TSH是在垂體前葉 S細胞中合成并分泌的，且可由下丘腦-垂體-甲狀腺軸進行調控，此軸若出現失衡，可導致TSH與各甲狀腺激素水平的變化，同時機體會出現相應的癥狀和體征。TSH可用于典型的甲減診斷，同時促甲狀腺激素也是甲減患者藥物治療的良好跟蹤指標［4］。甲狀腺激素的準確測定，不僅能客觀地反映人體甲狀腺功能，早期診斷甲狀腺疾病，正確評估下丘腦-垂體-甲狀腺軸的功能和狀態，而且能比較準確地評估人群的碘營養狀態，對臨床工作有著重要的參考價值［5］。然而，在臨床的實際檢驗工作過程中，甲狀腺激素各指標的所測結果經常會由于各種因素的影響以致于該數據與真實情況有偏差，這不但會影響到臨床醫師對患者病情的正確判斷，而且會拖延甚至耽誤本類疾病患者的最佳治療時機。所以，臨床實際工作中采用恰當又準確的檢驗方法，對甲狀腺疾病患者的早期診斷具有非常重要的意義。

血清中的總甲狀腺激素(T4、T3)絕大部分會與其運載蛋白結合。但結合狀態下的T4、T3并沒有生理活性，所以，檢測血清中的FT4、FT3才是較準確地反映出機體的甲狀腺狀態及功能。血中TSH水平的測定目前主要用于評估下丘腦-垂體-甲狀腺軸之間的關系，并用以評價垂體-甲狀腺的功能和狀態。甲亢患者血中TSH含量呈偏低狀態，而甲低患者血中TSH含量偏高。若出現甲狀腺素升高同時TSH含量也升高，多數情況下是下丘腦-垂體功能受損而導致的繼發性甲低。在反映甲狀腺的功能狀態方面，因TSH并不與血漿蛋白結合，其干擾因素也就較FT3和FT4要少，所得檢測結果也就更加可靠，所以，血清TSH水平是比甲狀腺激素更加敏感的指標。因此，機體內TSH的含量用于鑒別原發性甲低及繼發性甲低對臨床診斷有特別重要的意義。美國國家臨床生物化學協會施行以TSH檢測為中心的策略以評價機體的甲狀腺功能，將TSH作為一線的檢測項目，根據其檢測結果情況，再檢測FF4，用以對甲狀腺疾病進行鑒別診斷。

本試驗結果表明，與對照組相比較，甲亢組患者的TT3、TT4、FT3和FT4的檢測結果均顯著升高，差異均有顯著性(P＜0.05);而甲減組患者的 TT3、TT4、FT3和FT4的檢測結果均顯著降低(P＜0.05)。此外，與對照組比較，甲亢組患者的TSH顯著降低，而甲減組患者的TSH含量則顯著升高，差異均有顯著性(P＜0.05)。表明甲亢患者血清FT3與FT4水平顯著升高，同時FT3與FT4的持續增高會反饋抑制TSH的分泌，使血清中TSH的水平降低;此外，甲低患者血清FI3與FT4的水平呈顯著降低，而TSH水平則呈顯著增高狀態。診斷符合率方面，FT3與FT4對甲亢組與甲減組患者的診斷符合率均優于TT3與TT4;其中，FT3對甲亢組的診斷符合率優于FT4，而FT4對甲減組的診斷符合率優于FT3。TSH對甲亢組和甲減組患者的診斷符合率分別為97.7%和94.9%，均為較高的數值。本結果表明，FT3是診斷甲亢時較為靈敏的指標，而FT4是診斷甲減的較靈敏指標，但它們的靈敏度都不及TSH，特別是在甲減患者的診斷符合率方面，TSH才是最為靈敏的考察指標。因此可以得出，化學發光法檢測甲狀腺激素的水平具有很高的診斷符合率及診斷敏感性，這為甲狀腺疾病患者的臨床早期診斷和治療提供非常重要的參考依據。

化學發光法是根據化學反應過程中其物質吸收化學能后產生輻射光，再根據輻射光的強度來確定該物質含量的一種化學分析方法，其優點主要有儀器設備較為簡單、靈敏度較高、線性范圍較寬等，以致醫學和生命科學工作者均對本方法廣泛關注，所以其應用前景相當廣闊［6］。電化學發光法能最大限度地消除樣本底物對檢測結果的干擾以及對位量的散射，所以實際應用靈敏度很高。另外，本方法運行過程能達到全白化，可以在最大程度上減少系統及隨機的誤差，所以它的特異性也很高。同時，電化學發光免疫檢測法所用試劑的保存有效期較長，檢測過程能達到快速完成而且結果準確，又安全無毒，不會有同位素輻射污染的狀況發生［7］。近年來，也被國內的一部分臨床實驗室相繼采用。電化學發光免疫檢測法應用于臨床醫療中，不僅能檢測激素類和腫瘤標志物類物質的水平，還可用于監測傳染病情況和患者體內的血藥濃度，并且未來本方法在臨床實踐中的應用范圍將會更加廣泛。電化學發光免疫檢測方法應用時自動化很強，且儀器可24 h開機，可以滿足現代醫院的快速診療節奏以及患者對醫療技術水平的較高層次要求，例如一些急診常用項目:肌紅蛋白、絨毛膜促性腺激素、肌鈣蛋白等，能達到隨來隨測，臨床應用價值重大。此外，本法操作簡單，試劑、樣品、標準品均為二維條形識別系統來識別，相比較人手輸入大量數據，速度能增加很多倍。臨床實驗室采用此種電化學發光技術時，9或18 min內即能給出可靠的測試數據結果，試劑穩定性高、對操作者無人體傷害并且不會造成環境污染，可作為一種很理想的非放射性標記分析方法。

總之，電化學發光法是由電化學發光與免疫測定相結合而產生的一種標記免疫技術，用其檢測血清中FT3、FT4、TSH含量時，被檢測抗原和抗體全部參與進反應過程，但被測物和標準物均不會全部參與反應，最大結合狀態下一般僅能達50%左右，即抗體結合位點和標記抗原結合一半的量［8］。因此，電化學發光法檢測甲狀腺激素，是一種安全有效且臨床應用前景廣闊的技術，值得推廣。

1 劉小熙.化學發光法檢測甲狀腺激素在診斷甲狀腺功能性疾病中的應用.福建醫科大學學報，2001，35:86-87.

2 李楊亮，陳烽，程家坤，等.淮南市6246例甲狀腺功能三項指標化學發光法檢測分析.中國煤炭工業醫學雜志，2011，10:1315.

3 喬海英.化學發光法與放射免疫法分析甲狀腺激素結果對比.中國地方病防治雜志，2005，20:148-150.

4 薛文麗，田英，張梅，等.CDFI、TCD與BAEP轉頸試驗對甲減合并后循環缺血的診斷價值.河北醫藥，2013，35:733-734.

5 郭艷立，張會斌.化學發光法與放免法檢測甲狀腺功能結果比較.華北煤炭醫學院學報，2009，7:725-726.

6 歐陽彬.電化學發光免疫分析檢測血清促甲狀腺激素在甲狀腺功能減退中的應用.中國民康醫學，2010，22:1116，1118.

7 馬紅霞，周運恒，楊藺，等.ELISA法和電化學發光免疫法檢測血清HBsAg結果比較分析.醫學檢驗 ，2010，25:473-474.

8 吳嬰.放射免疫分析與電化學發光法測定血清 FT3、FT4結果分析.放射免疫學雜志，2010，23:29-30.