不同方法對慢性肝炎的檢驗結果分析

尚曉素 楊望孫

研究顯示[1]，運用酶聯免疫吸附試驗與聚合酶鏈式反應法對慢性肝炎進行檢驗均可以取得一定的效果。為比較酶聯免疫吸附試驗與聚合酶鏈式反應法對慢性肝炎的檢驗結果，本研究選取西安市未央區第一人民醫院2009年3月～2012年4月間住院治療的84例慢性肝炎患者，對其相關比例資料進行比較分析，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取西安市未央區第一人民醫院2009年3月～2012年4月間住院治療的84例慢性肝炎患者為研究對象。其中男49例（58.33%），女35例(41.67%)；乙型肝炎患者48例，占57.14%，丙型肝炎患者36例，占為42.86%；患者年齡最大75歲，最小22歲，平均年齡（53±7）歲。病程最長的13年，病程最短的3年，平均病程（7±2）年。

1.2 檢測方法

1.2.1 酶聯免疫吸附試驗 先把特異性抗體附著在固體相上,然后洗滌，加入含有抗原的試驗溶液,或者與酶標記的抗原混合或者在一定時間后,再加入酶標記的抗原,使標記抗原和抗原與限量抗體發生競爭性結合，反應平衡后，加入分離劑，使游離抗原與抗原抗體復合物分離，測定沉淀中放射性強度；加入標本后，再用酶標記的抗原或抗體測定抗體或抗原，使底物顯色[2]，操作時室溫宜在15℃～30℃，使用前先預熱儀器15～30 min，測讀結果更穩定。

1.2.2 聚合酶鏈式反應法 用裂解液提取DNA模板總反應體系為20 ta，擴增片段為314 bp。各反應管置入5700自動熒光檢測儀中，按 93℃ 2 min預變性，93℃30 s、55℃30 s、72℃ 1 min進行40個循環，結果熒光定量由電腦自動計算DNA含量[3]。

1.3 統計指標 總符合率=（真陰性數+真陽性數）/（真陰性數+假陰性數+真陽性數+假陽性數）×100%。

1.4 統計學方法 采用SPSS 11.5軟件包進行處理，計量資料以（±s）表示，計數資料組間比較進行χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 總符合率比較 酶聯免疫吸附試驗的總符合率為72.62%（61/84），聚合酶鏈式反應法的總符合率為96.43%（81/84），組間比較差異具有統計學意義（P<0.05）。

2.2 檢測后的一致性結果比較 兩種檢測方法檢測后，結果均為陰性3例、陽性61例，兩種檢測方法檢測后的一致性比率均為76.19%[（3+61）/84]。

3 討論

所謂慢性肝炎實際上是指由不同病因而引起的患者肝臟壞死和炎癥的現象，但是對于慢性肝炎有一個時間上的相對界限，那就是患者的病程基本上都相對較長，一般情況下超過半年以上病程患者才被定義為慢性肝炎[4]。它包含了我們臨床上常見的肝炎病毒感染（其中包含乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒等），還有長期飲酒所導致的慢性肝炎，以及由于某種慢性疾病而長期服用肝毒性藥物所導致的慢性肝炎等。慢性肝炎在臨床上可以呈現出一些相應的癥狀、體征和肝生化檢查異常，同時對于部分患者還可能不出現明顯的臨床癥狀，而僅僅在臨床上表現出肝組織的壞死和炎癥。如果對慢性肝炎患者不采用及早、有效的的治療，很多患者會發展為肝硬化[5]。

目前在臨床上對于乙型肝炎病毒的檢測主要采用血清學的相關方法[6]。這些方法主要包括酶聯免疫吸附試驗、聚合酶鏈式反應法、免疫擴散、對流免疫電泳和膠體金層析法等[6]。各種方法在臨床實踐的過程中都取得了一定的效果。酶聯免疫吸附試驗方法反應時間較為迅速、檢驗過程中所應用的儀器設備也十分簡單，對于相關人員的技術要求水平也不高。聚合酶鏈式反應法是一種新型技術，檢測快速、準確，同時具有適用于大量樣本的特點，但是成本較高。本研究結果表明，酶聯免疫吸附試驗的總符合率為72.62%（61/84），聚合酶鏈式反應法的總符合率為96.43%（81/84），組間比較差異具有統計學意義（P<0.05）。

因此，針對慢性肝炎進行臨床實踐檢驗的過程中，酶聯免疫吸附試驗與聚合酶鏈式反應法在總符合率上存在著一定的差異，要通過綜合評價來進行實際選擇。

[1]Paudel MK, Takei A, Sakoda J, et al. Preparation of a singlechain variable fragment and a recombinant antigen-binding fragment against the anti-malarial drugs, artemisinin and artesunate, and their application in an ELISA[J].Anal Chem, 2012,84(4):2002-2008.

[2]楊少華，胡北俠，許傳田，等.禽流感病毒RT-PCR ELISA診斷方法的建立[J].中國農學通報，2012，28(2):48-52.

[3]張艷敏，杜曉峰，張麗梅，等.實時定量PCR和ELISA法快速檢測角膜組織HBV和HCV的效果[J].鄭州大學學報：醫學版，2012，47(3):411-413.

[4]Jakubowski JA, Bourguet N, Boulay-Moine D, et al. Comparison of a new ELISA assay with the flow cytometric assay for platelet vasodilatorassociated stimulated phosphoprotein (VASP) phosphorylation in whole blood to assess P 2 Y(12) inhibition[J].Thromb Haemost, 2012,107(2):388-395.

[5]張滿娥，張洪彬，明燕.實時熒光PCR和ELISA在乙型肝炎病毒檢測中的應用[J].檢驗醫學與臨床，2012，9(2):190-191.

[6]郭彩琴，陳道楨，項靜英，等.兩種免疫學方法檢測弓形蟲感染的比較研究[J].檢驗醫學與臨床，2010，7(3):195-196.