呼吸系統(tǒng)疾病中抗ENA抗體分析研究

馬玉騰，邢志偉，翟 倩，孫紅梅，李玉靜，呂翠環(huán)*

（1.河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院急診科，河北石家莊050000；2.河北省胸科醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北石家莊050041）

呼吸系統(tǒng)疾病中抗ENA抗體分析研究

馬玉騰1，邢志偉2，翟 倩2，孫紅梅2，李玉靜2，呂翠環(huán)2*

（1.河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院急診科，河北石家莊050000；2.河北省胸科醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北石家莊050041）

目的通過對(duì)204例呼吸系統(tǒng)疾病患者自身免疫抗體（autoantibody）陽性結(jié)果進(jìn)行分析，了解自身免疫性疾病在呼吸系統(tǒng)疾病中的分布特點(diǎn)，探討抗可提取性核抗原（extractable nuclear antigens，ENA）抗體譜的檢測對(duì)呼吸系統(tǒng)疾病的診斷意義。方法應(yīng)用歐蒙免疫印跡法對(duì)204例自身免疫性疾病合并呼吸系統(tǒng)疾病患者血清進(jìn)行抗ENA抗體譜的檢測，觀察自身免疫性疾病在呼吸系統(tǒng)疾病中的分布情況。結(jié)果204例抗ENA抗體譜陽性患者中肺結(jié)核68例（33.3％），胸膜炎56例（27.5％），肺間質(zhì)纖維化44例（21.6％），肺炎20例（9.8％），肺癌16例（7.8％）。結(jié)論自身抗體檢查對(duì)疾病的診斷有重要意義，如能早期發(fā)現(xiàn)、診斷并給予及時(shí)有效的治療對(duì)于控制病情的發(fā)展、改善患者生活質(zhì)量有極大的幫助，抗ENA抗體檢測在各系統(tǒng)自身免疫性疾病的診斷及鑒別診斷中占有不可忽視的地位。

自身免疫疾病；抗原，核；呼吸系統(tǒng)

自身抗體是由于正常免疫耐受功能受損或隱蔽自身抗原釋放，導(dǎo)致免疫細(xì)胞及其成分對(duì)自身組織或細(xì)胞成分發(fā)生免疫應(yīng)答的產(chǎn)物，血清中檢出自身抗體是自身免疫病的診斷基礎(chǔ)。目前，自身抗體的檢測方法有很多種，抗核抗體和抗可提取性核抗原（extractable nuclear antigens，ENA）抗體的檢測是較重要而常用的方法。自身抗體可導(dǎo)致系統(tǒng)損傷及功能障礙，可見于各個(gè)系統(tǒng)疾病。為了解自身抗體陽性患者在呼吸系統(tǒng)疾病的分布情況，本文對(duì)204例抗ENA抗體譜陽性的結(jié)果進(jìn)行回顧性分析，現(xiàn)分析報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：在2008年1月—2010年1月河北省胸科醫(yī)院住院的呼吸系統(tǒng)疾病患者中，統(tǒng)計(jì)出自身抗體陽性204例，無其他自身免疫性疾病存在，將其結(jié)果資料進(jìn)行收集整理。其中男性56例，女性148例，年齡12～82歲，平均46.04歲。所有患者靜脈采血2～3mL，以3000r/min離心5min，分離血清。

1.2 試劑：試劑盒購自北京歐盟生物技術(shù)有限公司。

1.3 方法：采用免疫印跡法檢測ENA自身抗體譜，操作方法嚴(yán)格按試劑盒說明書進(jìn)行操作。標(biāo)本用緩沖液1∶101倍稀釋，待測血清中存在的抗ENA抗體分別與硝酸纖維素膜上的相應(yīng)抗原區(qū)帶結(jié)合，再加入酶標(biāo)記的抗體及相應(yīng)底物，出現(xiàn)顯色反應(yīng)。

1.4 結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)：觀察陽性顯色區(qū)帶與對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)帶位置即可判斷顯色帶是何種自身抗體。根據(jù)薄膜上各抗原帶著色的深淺來判斷結(jié)果。根據(jù)抗原帶著色的深淺，可將結(jié)果分為陰性、臨界陽性和陽性。抗原著色帶無色為陰性，著色非常弱為臨界陽性，著色中到強(qiáng)為陽性。

2 結(jié) 果

2.1 ENA多肽抗體檢測：204例自身抗體陽性患者的ENA多肽抗體（nRNP、SM、SS-A/Ro-52、SS-B、Scl-70、Jo-1）項(xiàng)中，分別視疾病不同而有1～6項(xiàng)陽性；204例抗ENA抗體譜陽性患者中肺結(jié)核68例（33.3％），肺炎20例（9.8％），肺間質(zhì)纖維化44例（21.6％），胸膜炎56例（27.5％），肺癌16例（7.8％），見表1。

表1 抗ENA抗體在呼吸系統(tǒng)疾病中的結(jié)果分析Table 1 The analysis of anti-ENA antibodies in respiratory diseases

2.2 204例患者的各年齡階段例數(shù)的比較：通過統(tǒng)計(jì)204例自身抗體陽性的呼吸系統(tǒng)疾病患者的年齡，比較各年齡階段的例數(shù)分布情況，見表2。

表2 204例自身免疫性疾病患者各年齡階段例數(shù)比較Table 2 The age distribution of 204 cases of autoimmune diseases

3 討 論

自身免疫性疾病是由于正常免疫耐受功能受損導(dǎo)致免疫細(xì)胞及其成分對(duì)自身組織結(jié)構(gòu)和功能的破壞，并出現(xiàn)一定臨床表現(xiàn)的一類疾病，任何年齡、性別均可發(fā)病，以女性為多見。本文發(fā)現(xiàn)以＞20～50歲之間的患者為主，占72.0％（147/204），與文獻(xiàn)報(bào)道相符［1］。

自身免疫性疾病患者體內(nèi)可產(chǎn)生多種針對(duì)細(xì)胞核成分的抗體，ENA多肽抗體譜即是其中一類，ENA是可提取性核抗原的總稱，屬非組蛋白的核蛋白，為酸性蛋白抗原，是由許多小分子RNA（100～215個(gè)核苷酸）與各自對(duì)應(yīng)的特定蛋白質(zhì)組成的核糖核蛋白顆粒，分子中不含DNA。最常用的ENA包括nRNP、Sm、SSA、SSB、Scl-70、Jo-1等6種［2］，本研究主要進(jìn)行呼吸系統(tǒng)中ENA中6項(xiàng)陽性結(jié)果分析。

本文統(tǒng)計(jì)204例抗ENA抗體譜陽性患者中肺結(jié)核68例（33.3％），所占比例最高。據(jù)報(bào)道［3］，肺結(jié)核患者中由結(jié)核桿菌引起的變態(tài)反應(yīng)性疾病占有一定比例，以發(fā)熱、關(guān)節(jié)疼痛及皮膚損害為臨床表現(xiàn)特征。其發(fā)病機(jī)制多有報(bào)道，有學(xué)者［4］認(rèn)為與結(jié)核菌直接感染有關(guān)，但亦有文獻(xiàn)［5］報(bào)道結(jié)核風(fēng)濕癥無關(guān)節(jié)骨質(zhì)破壞、疏松、增生及關(guān)節(jié)強(qiáng)直變形等改變，而為細(xì)胞介導(dǎo)的Ⅳ型變態(tài)反應(yīng)性疾病。有文獻(xiàn)［6］表明常見于呼吸系統(tǒng)的自身免疫性疾病還有韋格納肉芽腫病，它是一種少見血管炎，常累及上氣道、肺、腎臟等。

本文統(tǒng)計(jì)肺癌在自身免疫抗體陽性的呼吸系統(tǒng)疾病中占16例（7.8％）。自身免疫性疾病和惡性腫瘤兩者之間的聯(lián)系可能有以下幾種機(jī)制：相同的病原因素、自身免疫過程激發(fā)惡性轉(zhuǎn)化、治療，而且基因傾向性在2種疾病都有很重要的作用；另一可能機(jī)制是自身免疫性疾病（如干燥綜合征）中淋巴細(xì)胞的慢性抗原刺激，可能產(chǎn)生出一種易惡性轉(zhuǎn)化的淋巴細(xì)胞［7］。國外報(bào)道了腫瘤患者體內(nèi)存在抗細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核成分的自身抗體［8］，這些自身抗體有希望成為鑒別診斷正常人與腫瘤患者的標(biāo)志物［9］。但目前肺癌患者體內(nèi)自身抗體譜的系統(tǒng)研究的文獻(xiàn)還很少，對(duì)抗體譜及其靶抗原本質(zhì)的研究將有助于深入認(rèn)識(shí)肺癌患者的自身免疫現(xiàn)象，為自身抗體應(yīng)用于腫瘤診斷、治療的潛在可能性提供更多信息。

本文統(tǒng)計(jì)在204例自身免疫抗體陽性的呼吸系統(tǒng)疾病患者中，肺炎20例（9.8％），肺間質(zhì)纖維化44例（21.6％），胸膜炎56例（27.5％）。當(dāng)機(jī)體發(fā)生自身免疫性疾病時(shí)，由于自身對(duì)自身抗原發(fā)生免疫反應(yīng)，而導(dǎo)致自身組織損害，可以出現(xiàn)肺臟的累及，發(fā)展為肺炎、胸膜炎、肺間質(zhì)病變，甚至晚期出現(xiàn)肺間質(zhì)纖維化［10］。不論何種免疫機(jī)制，針對(duì)自身抗原的抗體產(chǎn)生在自身免疫疾病的發(fā)病中起重要作用［11］。有文獻(xiàn)［12］表明抗SSA和抗Jo-1同時(shí)存在可能是提示肺間質(zhì)病變加重，應(yīng)積極選擇更有效的治療措施。所以，自身抗體的檢測在判斷疾病的活動(dòng)過程、觀察治療效果、指導(dǎo)臨床用藥等方面均具有重要的臨床意義。

總之，抗ENA抗體的檢測對(duì)于多種自身免疫病有較高的陽性率，在自身免疫病的診斷、治療效果及預(yù)后判斷等方面有較高的臨床應(yīng)用價(jià)值，而且自身抗體的檢測有助于呼吸系統(tǒng)疾病的早期診斷及治療。

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（本文編輯：趙麗潔）

ANALYSIS AND RESEARCH OF ANTI-ENA ANTIBODY IN RESPIRATORY DISEASE

MA Yuteng1，XING Zhiwei2，ZHAIQian2，SUN Hongmei2，LIYujing2，LV Cuihuan2*
（1.Department of Emergency Medicine，the Second Hospital of HebeiMedical University，Shijiazhuang 050000，China；2.Clinical Laboratory，Heibei Provincial Chest Hospital，Shijiazhuang 050041，China）

autoimmune diseases；antigens，nuclear；respiratory system

R56

A

1007-3205（2013）04-0413-03

2012－08－21；

2012－10－10

馬玉騰（1966－），男，河北衡水人，河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院副主任醫(yī)師，醫(yī)學(xué)碩士，從事急診科疾病診治研究。

*通訊作者

10.3969/j.issn.1007-3205.2013.04.013

【關(guān)鍵詞】ABSTRACT：ObjectiveFrom the restrospective analysis of positive autoantibody of 204 patients with disease of respiratory system，to understand autoimmune diseases in respiratory disease and its distribution characteristics，and to explore the diagnosis significance for respiratory diseases by the detections of anti-ENA（extractable nuclear antigens）antibody repertoire.M ethodsThe anti-ENA antibody of 204 cases of patientswith autoimmue diseases and respiratory system diseaseswas detected by Euroimmun immunoblotting.The distribution characteristics of autoimmune diseases in respiratory diseases were reviewed.ResultsIn 204 patients with positive anti-ENA antibody，there were 68 cases of pulmonary tuberculosis（33.3％），56 cases of pleurisy（27.5％），44 cases of pulmonary interstitial fibrosis（21.6％），20 cases of pneumonia（9.8％），16 cases of lung cancer（7.8％）.Conclusion The detections of autoantibodies are important for the diagnosis of these diseases.Itwould be very helpful for controlling the development of the diseases，and for improving the patient′s living standard，if the patients receive early detection，diagnosis and effective treatment.The anti-ENA antibody detections are important and cannot be neglected for diagnosis and differential diagnosis of autoimmune disease of all systems.