p16、p21和K i-67在CINⅡ～Ⅲ年輕患者宮頸組織中的表達

蘇智峰，徐新偉

（浙江省杭州市余杭區第一人民醫院病理科，浙江杭州311100）

·論 著·

p16、p21和K i-67在CINⅡ～Ⅲ年輕患者宮頸組織中的表達

蘇智峰，徐新偉

（浙江省杭州市余杭區第一人民醫院病理科，浙江杭州311100）

目的探討宮頸上皮內瘤變（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）Ⅱ～Ⅲ年輕患者宮頸組織p16、p21和Ki-67表達及相關性。方法148例CINⅡ～Ⅲ及高危型人乳頭狀瘤病毒（human papilloma virus，HPV）陽性的患者，按年齡分為A組（≤35歲）78例和B組（＞35歲）70例，分析宮頸組織中p16、p21和Ki-67的表達率及相關性。結果p16在A、B組宮頸組織中表達率均較高，差異無統計學意義（P＞0.05），p21和Ki-67在A組宮頸組織中的表達率顯著高于B組（P＜0.05），2組高危型HPV患者p16、p21和Ki-67的表達率均高于低危型HPV患者（P＜0.05），A組高危型和低危型HPV患者宮頸組織中p21和Ki-67表達率均分別高于B組高危型和低危型HPV患者（P＜0.05），p16表達率與年齡無相關性（P＞0.05），p21與Ki-67的表達率與年齡呈負相關（P＜0.05），p16的表達率與p21與Ki-67表達率無相關性（P＞0.05），p21與Ki-67的表達率之間呈正相關（P＜0.05）。結論高危型HPV陽性年齡≤35歲的年輕CINⅡ～Ⅲ患者p21和Ki-67的表達率較年長者高，并與年齡存在相關性。

宮頸上皮內瘤樣病變；乳頭狀瘤病毒；感染；年輕因素

宮頸上皮內瘤變（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）與宮頸浸潤癌密切相關，是癌前病變，可發展為子宮頸癌。高危型人乳頭狀瘤病毒（human papilloma virus，HPV）感染是宮頸癌及CIN的危險因素［1］，發病率逐漸增長，而目前對高級別CIN年輕患者的特點研究較少，本研究對比≤35歲和＞35歲CINⅡ～Ⅲ及HPV陽性的患者宮頸組織中p16、p21和Ki-67的表達及與HPV類型的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料：研究對象來源于2009年1月—2011年12月我院婦科門診篩查CIN患者148例，年齡24～73歲，平均（36.83±9.29）歲，均經宮頸液基細胞學檢測、陰道鏡活檢證實為CINⅡ～Ⅲ級，經HPV DNA檢測均為陽性，其中高危型HPV陽性102例，低危型HPV陽性46例。排除嚴重心、腦、肝、腎、內分泌及血液系統等疾病史；近期妊娠史及盆腔化療史；無宮頸疾病治療史。年齡≤35歲78例設為A組，年齡＞35歲70例設為B組。均按美國陰道鏡和宮頸病理學會指南進行臨床診療處理［2］。

1.2 研究方法：p16鼠抗人單克隆抗體、p21鼠抗人單克隆抗體、Ki-67鼠抗人單克隆抗體、即用型快捷免疫組織化學MaxVisionTM檢測試劑盒、DAB顯色試劑盒均購自福州邁新生物技術開發有限公司。宮頸病灶組織標本均由4%中性甲醛液固定，石蠟

包埋，切片1.5～2.0μm，二甲苯脫蠟，梯度酒精水化，H2O2處理，高溫修復抗原，磷酸鹽緩沖液（phosphate buffered saline，PBS）沖洗。采用免疫組織化學染色法，操作均按試劑盒說明進行。DAB顯色，沖洗，蘇木素復染，以PBS代替一抗作陰性對照。

1.3 評價標準：高倍光學鏡檢，每視野計200個細胞，隨機觀察5個視野，p16、Ki-67定位于細胞漿，p21定位于細胞核。細胞漿或細胞核無染色為陰性；染色呈淡黃色至棕色為陽性，根據染色強度及陽性細胞的比例分為，弱陽性（+）為陽性細胞數≤25%或淡黃色；中度陽性（++）為陽性細胞數26%～50%或黃色；強陽性（+++）為陽性細胞數＞50%或棕色。

1.4 統計學方法：應用SPSS17.0統計學軟件進行分析。計數資料以百分率表示，組間比較采用χ2檢驗；兩變量間相關性采用Pearson直線相關分析。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 p16、p21和Ki-67的表達：p16在A、B組宮頸組織中表達率均較高，但差異無統計學意義（P＞0.05）；p21和Ki-67在A組宮頸組織中的表達率顯著高于B組（P＜0.05）。2組高危型和低危型HPV陽性率之間差異無統計學意義（P＞0.05）。2組高危型HPV患者p16、p21和Ki-67的表達率均高于低危型HPV患者；A組高危型和低危型HPV患者宮頸組織中p21和Ki-67表達率均分別高于B組患者（P＜0.05），見表1，2。

表1 2組宮頸組織中p16、p21和Ki-67表達比較（例數，%）

表2 2組高危型與低危型HPV患者宮頸組織中p16、p21和Ki-67表達比較（例數，%）

2.2 p16、p21和Ki-67表達率的相關性：p16表達率與年齡無相關性（r=0.21，P＞0.05），p21和Ki-67的表達率與年齡呈負相關（r=0.47，P＜0.05）。p16的表達率與p21和Ki-67表達率無相關性（r=0.18，P＞0.05），p21與Ki-67的表達率呈正相關（r=0.38，P＜0.05）。

3 討 論

CIN是一組宮頸癌的癌前病變，與HPV感染密切相關，其中高危型HPV感染對CIN組織惡性進展有促進作用，其致癌作用表現為對細胞周期監控機制通路的破壞［3］。p16和p21是2條主要通路“p53途徑”和“pRb通道”的下游調控因子，通過抑制細胞周期素依賴蛋白激酶2下調細胞周期蛋白D1的表達，控制細胞有絲分裂停滯于細胞周期的G1/S期。當高危型HPV感染并與宿主細胞基因整合后，E6、E7基因得到持續過量的表達，對p53及pRb產生抑制，阻斷了p53、pRb對下游p16、p21的負向調控作用［4-6］。使細胞分裂異常跨越G1/S期，導致細胞增殖失控，而成為癌變的基礎過程［7］。Ki-67也是與細胞增殖相關的一種核抗原，其表達反應了細胞周期的變化過程，其過度表達表明細胞增殖的活躍程度增加，細胞增殖失控［8］。

本研究中以年齡劃分研究對象，對比≤35歲和＞35歲患者宮頸組織中p16、p21和Ki-67的表達率，結果顯示，p16在不同年齡段的患者中的表達均較高，差異無統計學意義，p21和Ki-67在≤35歲患者中的表達則顯著高于＞35歲患者（P＜0.05）。提示HPV陽性高級別CIN患者宮頸組織細胞增殖活躍程度高，而≤35歲患者的細胞增殖活躍程度可能高于＞35歲患者，并可能與CIN病變進展密切相關。

HPV感染是CIN癌變的重要因素，而高危型和低危型HPV的致癌作用存在顯著差異［9］，本研究中A組和B組高危型和低危型HPV感染率之間差異無統計學意義，說明HPV感染率與年齡無相關性。

高危型HPV感染者宮頸組織中p21和Ki-67的表達率均顯著高于低危型HPV感染患者（P＜0.05）。而≤35歲高危型和低危型HPV患者宮頸組織中p21和Ki-67表達率均分別高于同型HPV的＞35歲患者。說明高危型HPV的感染與宮頸組織中p16、p21和Ki-67的高表達密切相關，而對≤35歲患者較＞35歲患者調高作用更為明顯。

p16的表達與年齡無相關性，而p21和Ki-67的表達與年齡呈弱負相關性，隨年齡的增長其表達呈現下降的趨勢。而p16與p21和Ki-67的表達無相關性，p21與Ki-67表達呈正相關性。提示在HPV陽性高級別CIN患者宮頸組織中p16持續高表達，組織細胞處于增殖活躍狀態［10］，而p21和Ki-67對細胞周期的調控可能受到年齡的影響，隨年齡增長調控作用減弱。

綜上所述，CINⅡ～Ⅲ合并高危型HPV感染≤35歲患者宮頸組織中p21和Ki-67表達顯著增高，細胞病態增殖狀態加速，對≤35歲患者的早期檢測和監控有利于了解患者宮頸組織的病變進展程度，并給予及時的干預處理，預防宮頸癌的發生。

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（本文編輯：趙麗潔）

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1007-3205（2013）03-0339-03

2012-03-22；

2012-04-10

蘇智峰（1975-），男，浙江余杭人，浙江省杭州市余杭區第一人民醫院主治醫師，醫學學士，從事臨床病理診斷研究。

10.3969/j.issn.1007-3205.2013.03.036