59例小兒特發性血小板減少性紫癜檢驗結果分析

蔡旭清，黃道連

(1、中山市火炬開發區醫院檢驗科,廣東中山528437；2、南方醫科大學附屬博愛醫院檢驗科,廣東中山528400)

59例小兒特發性血小板減少性紫癜檢驗結果分析

蔡旭清1，黃道連2

(1、中山市火炬開發區醫院檢驗科,廣東中山528437；2、南方醫科大學附屬博愛醫院檢驗科,廣東中山528400)

目的分析特發性血小板減少性紫癜(ITP)小兒患者骨髓巨核細胞及血小板形態學改變和過敏指標的結果變化。方法對59例ITP小兒患者進行骨髓巨核細胞形態、血小板形態觀察及嗜酸性粒細胞計數和過敏原三項檢測，并對21例骨髓形態學檢驗大致正常的對照組，進行同樣實驗。結果91.5%ITP患兒骨髓巨核細胞漿上可見空泡、50.8%可見幼稚巨核細胞產板現象、88.1%出現血小板形態異常、83.1%骨髓嗜酸性粒細胞增多、72.9%血清lgE升高，與對照組比較差異有統計學意義(P＜0.05)。結論巨核細胞形態學改變對確診ITP有重要意義,骨髓嗜酸性粒細胞增多及血清IgE水平增高，有助于ITP鑒別診斷和治療。

特發性血小板減少性紫癜；巨核細胞；嗜酸性粒細胞；形態學過敏原IgE。

特發性血小板減少性紫癜(ITP)又稱免疫性血小板減少癥[1]，一般認為ITP發生是自身抗體致敏的血小板被單核-巨噬細胞系統過度破壞所致[2]。近年來,對ITP發病機制的研究取得了一系列重要進展，特別在體液免疫機制方面,對自身抗體產生的研究有了明顯進展,并提出了由自身抗體介導引起的巨核細胞數量和質量異常.我們觀察了59例ITP患兒的骨髓巨核細胞形態結構變化，并作了嗜酸性粒細胞計數及過敏原三項(血清總IgE、吸入性過敏原、食物過敏原)檢測，現將檢測結果報告如下。

1 材料與方法

1.1 研究對象來自2010年2月至2012年9月在中山市火炬開發區醫院和中山市博愛醫院住院治療的患兒，59例確診為ITP，符合《血液病診斷及療效標準》[3]，年齡5d～10歲，中位年齡3歲，其中男32例，女27例。患兒有不同程度的出血癥狀，主要以下肢皮膚出現淤點和淤斑為主。PLT為(10～70)×109/L，其中(10～20)×109/L者40例，(20～60)× 109/L者15例，PLT在(60～70)×109/L者4例。另外，選取骨髓形態學檢查符合大致正常骨髓象的21例小兒作為對照組，年齡3月～7歲，中位年齡4歲,血小板計數(135～320)×109/L。

1.2 儀器Olympus-CX21顯微鏡，過敏原檢測儀-Unicap 100。

1.2 方法

1.2.1 常規采集ITP患兒和對照組小兒的骨髓(胸骨或脛骨或髂骨)，進行涂片、瑞-姬氏染色后，油鏡下分類計數200個骨髓有核細胞及觀察巨核細胞形態和血小板形態[4]。

1.2.2 采集ITP患兒靜脈血，分離血清在過敏原檢測儀-Unicap 100機上檢測總IgE、吸入性過敏原和食物過敏原。使用原裝配套試劑和質控品，嚴格按儀器操作規程和試劑說明書操作。

1.2.3 在油鏡下常規有核細胞分類及觀察巨核細胞形態結構及產板情況。

1.3 統計學方法采用SPSS 13.0軟件對檢測數據進行配對資料的卡方檢驗，P＜0.01為有統計學意義。

2 結果

2.1 91.5%ITP患兒骨髓中可見到胞漿上有空泡的巨核細胞，該類巨核細胞邊緣包裹了一層淺藍色的物質，形成內漿有淺紅色顆粒，外漿無顆粒呈現“向日葵花樣”形態(圖1)。50.8%(30/59)患兒骨髓中可見到幼稚巨核細胞產小血小板現象(圖2)，88.1% (52/59)患兒骨髓或外周涂片中可見形態異常的血小板(體積巨大、條帶狀、毛毛蟲狀，葫蘆狀等形態)，見表1。

2.2 83.1%ITP患兒骨髓嗜酸性粒細胞比例增高(≥2.5%)，外周血嗜酸性粒細胞基本正常，見表2。

2.3 72.9%ITP患兒過敏原檢測中血清IgE增高，吸入性過敏原和食物性過敏原基本正常見表3。

表1 ITP患者與對照組骨髓巨核細胞系形態比較

表3 ITP患兒與對照組血清過敏原三項檢測結果比較

圖1 "葵花樣"巨核細胞

圖2 幼稚巨核細胞產板現象

3 討論

目前公認ITP是一種獲得性器官特異性自身免疫性疾病,是由于人體內產生抗血小板自身抗體導致單核-巨噬細胞系統破壞血小板過多而造成的血小板減少,人體外來抗原與宿主細胞或細胞外成份有相似的抗原表位,那么兩者即呈分子擬態。人體針對外來抗原產生的抗體既可作用于外來抗原,也可作用于與外來抗原表位分子結構相似的自身抗原,即交叉反應。人體感染的某些病毒抗原可能與血小板成份有相似的抗原表位,則人體針對該病毒產生的抗體,既可作用于該病毒,也可作用于與該病毒抗原表位分子結構相似的血小板抗原,從而破壞血小板,導致血小板減少。

本研究59例患者除了進行血小板計數、血小板功能試驗、凝血功能檢查、嗜酸性粒細胞計數和過敏原檢測等相關檢查外，均行骨髓細胞形態學檢查，并排除了某些以血小板減少為首發表現的血液系統疾病，并發現絕大多數患者巨核細胞數正常或增多并伴成熟障礙以及產板不良，血小板形態異常,可見巨大血小板，ITP組的成熟產板型巨核細胞數明顯低于對照組，與國外報道相近[5]。

本研究結果顯示有83.1%(49/59)ITP患者骨髓中嗜酸性粒細胞數明顯增高，相關機制尚不明確，也未見有關報道，可能某些病毒感染剌激機體產生相關抗體或患者體內某些過敏原升高，剌激機體加速產生嗜酸性粒細胞，產生速發型變態反應，從而使血小板急劇下降，我們認為骨髓嗜酸性粒細胞增高可作為ITP的診斷指標之一。

我們資料顯示72.9%(43/59)ITP患兒血清IgE增高，與黃凱等調查的南昌地區兒童變態反應性疾病患兒75.8%IgE水平增高的結果相似[6]，說明ITP發病與過敏反應有關，但過敏原分布情況及特點不同，ITP患兒的吸入性過敏原和食物過敏原陽性率與正常對照差異無統計學意義(P＞0.05)，說明ITP發生與吸入性過敏原和食物過敏原無關，ITP發病的過敏反應機制仍需進一步研究，而黃凱等報道的南昌地區兒童過敏性紫癜、哮喘、過敏性鼻

炎和鼻竇炎等四種過敏性疾病與食物過敏原和吸入過敏原有關。可能與本區環境因素有關(化工廠，建筑工地，粉塵，花粉)個人衛生和個體差異等有關。吸入性變態反應原引起的過敏反應又以屋塵螨，粉塵螨，屋塵為主，且好發于0~18歲[7]。

根據《診斷學》標準：巨核細胞數正常值為每4.5cm27~35個，以此判斷巨核細胞數正常、增加或減少。ITP患者典型骨髓象示：骨髓有核細胞增生活躍，巨核細胞增多伴成熟障礙。鑒于國內的骨髓增生異常綜合征、白血病等疾病發病年齡較年輕，約為40歲[8],該類疾病可以與ITP有相似的臨床表現且外周血涂片不易確診，故2009年威海會議專家們提出新的ITP診斷建議：(1)多次化驗血小板計數減少，血細胞形態無異常；(2)脾臟不增大；(3)骨髓檢查：巨核細胞數增多或正常、有成熟障礙；(4)須排除先天性血小板減少、假性血小板減少和其他繼發性血小板減少癥。

本研究發現91.5%(54/59)ITP患者骨髓各階段巨核細胞中部分巨核細胞胞漿出現空泡，細胞邊緣包裹一層淺藍色的物質，呈現葵花樣，可能是ITP患者體內產生的血小板抗體，與巨核細胞表面抗原結合形成抗原-抗體復合物，形成一層淺藍色的物質包裹在細胞的外層，影響了胞膜結構，從而影響了巨核細胞血小板的生成和釋放，50.8%(30/ 59)患兒骨髓中可見到幼稚巨核細胞產小血小板現象。我們認為血小板減少患者血清中IgE增高、骨髓嗜酸性粒細胞比例增高、骨髓中見幼稚巨核細胞產小血小板和葵花樣巨核細胞等現象，可作為ITP鑒別診斷重要依據。

[1]Ruggeri M,Fortuna S,Rodeghiero F.Heterogeneity of terminology and clinical definitions in adult idiopathic thrombocytopenic purpura:a critical appraisal from a systematic review of the literature [J].Haematologica,2008,93(1):98-103.

[2]張琳琳,賈永前,黃文芳,等.原發性血小板減少性紫癜兩種血小板相關抗體檢測方法的比較[J].國際檢驗醫學雜志,2006,27(7):592．

[3]張之南.血液病診斷及療效標準[M].第3版.北京:北京科技出版社,1998:281-282.

[4]葉應嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規程[M].第3版.南京:東南大學出版社,2006:145-154.

[5]Romero-Guzmán LT,López-Karpovitch X,Paredes R,et al.Detection of platelet-associated immunoglobulins by flow cytometry for the diagnosis of immune thrombocytopenia:a prospective study and critical review[J].Haematologica,2000,85(6):627-631.

[6]黃凱,柯江維,王曄.南昌地區兒童過敏原IgE抗體體外檢測結果與分析[J].實驗與檢驗醫學,2012,30(3):291-293.

[7]于國芳,譚立明,李華,等.吸入性變應原檢測對診斷過敏性疾病的臨床應用[J].實驗與檢驗醫學,2012,30(3):230-232.

[8]候明.成人特發性血小板減少性紫癜的規范化診斷與治療[J].臨床血液學雜志,2008,21(1):3-4.

Analysis of experimental results in 59 children with Idiopathic thrombocytopenic purpura

CAI Xuqing，HUANG Daolian. Clinical Laboratory,Hospital of Torch Development Zone of Zhongshan City,Guangdong Zhongshan 528437,China

Abstrac:ObjectiveTo analyse the morphologic changes of bone marrow megakaryocytes and platelets and allergy index changes in children with idiopathic thrombocytopenic purpura(ITP).Methods Fifty-nine children with ITP were enrolled to undergo morphology observation of bone marrow megakaryocyte and platelet，eosinophil counts and allergen detection.Results Vacuoles were visible in cytoplasma of bone marrow megakaryocytes in 91.5%ITP children.Immature megakaryocytes were observed producing platelets in 50.8%ITP children.88.1%ITP children had platelet morphologic abnormalities.The numbers of bone marrow eosinophil increased in 83.1%ITP children，and the levels of peripheral blood IgE increased in 72.9%ITP children.Conclusions Morphological changes of megakaryocyte have important significance in final diagnosis of ITP,the increase of bone marrow eosinophilia and serum IgE is helpful to differential diagnosis and therapy of ITP.

Idiopathic thrombocytopenic purpura;Megakaryocyte;Eosinophil;Morphology;Allergen IgE

R331.1+43,R558+.1,R446.11+1

A

1674-1129(2013)01-0031-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2013.01.011

蔡旭清，女，1972年生，大專，主管檢驗技師，從事醫學檢驗工作。