血清Fractalkine和超敏C反應蛋白與早期2型糖尿病腎病的相關性研究

謝紹鋒，黃莉吉，趙 越，安曉飛，劉敬順，余江毅

糖尿病是以高血糖為主要標志的代謝性疾病，糖尿病腎病(DN)是其嚴重微血管并發癥之一，蛋白尿貫穿于DN整個過程，而且是直接導致腎功能惡化的重要危險因素［1］。研究顯示，多種炎性因子作用導致的腎損傷可能是DN蛋白尿發生的重要原因之一［2］。C反應蛋白 (CRP)是一種敏感的、非特異性的炎癥標志物［3］;Fractalkine(FKN)是一種重要的炎癥趨化刺激因子，是CX3C類趨化因子中的惟一成員［4］。本研究通過測定139例2型糖尿病患者血清FKN和超敏C反應蛋白(hs－CRP)水平，探討二者與相關代謝指標及尿微量清蛋白的關系和臨床意義。

1 資料與方法

1.1 病例納入標準 入選標準:(1)符合2007年《中國2型糖尿病防治指南》［5］中T2DM的診斷標準;(2)年齡在50～75周歲，性別不限;(3)無慢性并發癥，或僅有輕度微血管并發癥〔尿清蛋白/肌酐 (UACR) ＜300 mg/g;無明顯視網膜病變或非增生性糖尿病視網膜病變〕;(4)血壓≤140/90 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa);(5)體質指數 (BMI)≤30 kg/m2。

排除標準:(1)空腹血糖 (FBG)≥13.9 mmol/L，或近1個月內出現糖尿病危急重癥，如酮癥酸中毒、糖尿病高滲狀態;(2)合并感染、急性損傷、風濕等炎性反應性疾病;(3)合并腎囊腫、腎結石、尿道感染及其他原發性腎臟疾病;(4)已有大血管并發癥，如冠心病、腦血管意外、下肢血管病變等;(5)具有嚴重的原發性心、肝、肺、腎、血液或影響其生存的嚴重疾病等。

1.2 一般資料 選取2009年3月—2010年2月在江蘇省中醫院內分泌科門診就診的2型糖尿病患者139例，其中男69例，女70例;平均年齡 (61.4±6.5)歲;糖尿病病程 (73.3±54.3)個月。本研究方案經倫理委員會批準，并獲得患者書面知情同意。

根據UACR水平，將患者分為正常蛋白尿組 (UACR＜30 mg/g)92例，UACR平均為 (20±5)mg/g;微量清蛋白尿組(30 mg/g≤UACR＜300 mg/g)47例，UACR平均為 (47±22)mg/g。兩組患者除腰圍間差異有統計學意義 (P＜0.01)外，性別構成、年齡、病程、BMI、血壓、高血壓患者比例間均有可比性 (P＞0.05，見表1)。

1.3 方法 所有入選者禁食10 h以上，次日晨空腹采肘部靜脈血液，采血前避免劇烈活動及應激等。(1)生化指標檢測:包括FBG、糖化血紅蛋白 (HbA1c)、血脂〔總膽固醇 (TC)、三酰甘油 (TG)、高密度脂蛋白膽固醇 (HDL－C)、低密度脂蛋白膽固醇 (LDL－C)〕、血肌酐，均采用Olympus AU2700全自動生化分析儀檢測;根據Cockcroft－Gault公式計算腎小球濾過率 (eGFR)［6］;(2)連續3次測定隨機尿清蛋白和尿肌酐水平，計算UACR［7］;(3)血清FKN測定采用雙抗體夾心酶聯免疫 (ELISA)法:血標本在室溫下靜置1 h左右，3 000 r/min離心8～10 min后分離血清，分裝保存于－70℃冰箱中待檢。采用BIO－RAD酶標儀、洗板機和美國USCN Life公司血清FKN試劑盒測定。采用Olympus AU2700全自動生化分析儀，利用免疫比濁法測定血清hs－CRP水平，最低檢測值為0.15 mg/L。

1.4 統計學方法 采用SAS 8.0統計軟件進行統計分析。符合正態分布的計量資料以 ()表示，兩組間比較采用t檢驗。hs－CRP為非正態分布，采用常用對數轉換后呈正態分布，采用t檢驗。采用Pearson相關分析及多元逐步回歸分析判斷兩個變量間的相關關系。采用雙側檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者觀察指標比較 兩組患者 FBG、HbA1c、hs－CRP水平比較，差異有統計學意義 (P＜0.01);而兩組血脂指標、FKN水平及eGFR比較，差異均無統計學意義 (P＞0.05，見表2)。

表1 兩組患者一般資料比較Table 1 Comparison of clinical characteristics between normoalbuminuric and microalbuminuric groups

表2 兩組患者觀察指標比較 ()Table 2 Comparison of obvervational index between normoalbuminuric and microalbuminuric groups

表2 兩組患者觀察指標比較 ()Table 2 Comparison of obvervational index between normoalbuminuric and microalbuminuric groups

注:FBG=空腹血糖，HbA1c=糖化血紅蛋白，TC=總膽固醇，TG=三酰甘油，HDL－C=高密度脂蛋白膽固醇，LDL－C=低密度脂蛋白膽固醇，eGFR=腎小球濾過率，FKN=Fractalkine，hs－CRP=超敏C反應蛋白;*為對數換轉后的數據

組別 例數 FBG(mmol/L)HbA1c(%)TC(mmol/L)TG(mmol/L)HDL－C(mmol/L)LDL－C(mmol/L)eGFR(ml·min －1·1.73 m－2)FKN(μg/L) hs－CRP*3±0.41微量清蛋白尿組 47 7.76±2.63 7.05±1.59 4.76±0.73 1.70±1.11 1.22±0.27 2.85±0.54 117.0±31.1 0.63±0.17 1.22±0.49 t正常蛋白尿組 92 6.89±1.67 6.30±1.18 4.82±0.90 1.41±0.85 1.31±0.34 2.89±0.67 110.2±21.5 0.65±0.19 0.8值4 ＜0.01 2.92 3.24 0.42 1.72 1.61 0.32 1.50 0.64 4.96 P值 0.004 0.002 0.675 0.088 0.110 0.748 0.136 0.52

2.2 血清FKN、hs－CRP與其他指標的相關性分析 139例2型糖尿病患者血清FKN水平為 (0.62±0.18)μg/L，與BMI、腰圍、TG、hs－CRP均呈正相關 (P＜0.05)。多元逐步回歸分析結果表明，調整年齡、性別、糖尿病病程、腰圍、血壓、血糖、HbA1c、血脂后，血清 FKN水平與 BMI相關 (β=0.32，P ＜0.01，R2=0.40，見表3)。

139例2型糖尿病患者血清hs－CRP對數轉化值為 (0.96±0.48)，與BMI、腰圍、eGFR、TG、UACR均呈正相關 (P＜0.01)，與HDL－C呈負相關 (P＜0.05);多元逐步回歸分析結果表明，調整年齡、性別、糖尿病病程、腰圍、血壓、血糖、HbA1c、血脂后，血清hs－CRP與 BMI(β=0.30，P＜0.01，R2=0.37)、UACR(β =0.17，P ＜0.01，R2=0.27)相關 (見表3)。

表3 血清FKN、hs－CRP水平與其他指標的相關性分析及多元逐步回歸分析結果 (n=139)Table 3 Correlation of serum fractalkine and hs－CRP level with different variables in all study subjects(n=139)

3 討論

DN是糖尿病的主要死亡原因之一，已成為終末期腎病的主要原因。近年來許多研究認為炎癥反應在2型糖尿病、肥胖癥等代謝性疾病及其慢性血管并發癥的發生過程中起著重要的作用［8］。DN的發生發展與有關炎性因子及促炎因子密切相關，并認為DN是一種炎癥性疾病［9］。

研究表明，趨化因子FKN通過與其受體CX3CR1結合，參與單核細胞和T細胞趨化、黏附，導致血管內皮細胞損傷，從而促進動脈粥樣硬化的形成［4］。然而，目前有關FKN與糖尿病慢性血管并發癥關系的臨床研究所獲結論卻并不一致。Shah等［10］發現2型糖尿病患者血清FKN水平顯著高于非糖尿病患者 〔(0.506±0.262)μg/L與 (0.422±0.210)μg/L，P＜0.0001〕。Damas等［11］研究表明冠心病不穩定型心絞痛患者血清FKN水平明顯高于健康人群 〔(1 199±112)ng/L與(423±25)ng/L〕。而另一項研究發現非糖尿病的冠心病患者FKN水平與健康人群相似 〔(477±225)ng/L與 (572±205)ng/L，P=0.303)〕，而1型糖尿病患者血清FKN水平明顯低于健康人群 〔(430±256)ng/L與 (572±205)ng/L，P=0.042〕［12］;研究者認為冠心病和1型糖尿病患者FKN水平下降可能與多數病例使用了具有一定抗炎作用的血管緊張素轉換酶抑制劑或血管緊張素受體阻滯劑類降壓藥物、他汀類降脂藥物治療有關。

目前有關血清FKN水平與糖尿病尿清蛋白關系的臨床研究報道僅有1篇［13］，該研究檢測了130例2型糖尿病患者及40例正常人群的血清FKN水平，結果發現2型糖尿病患者血清FKN水平隨著UAER的升高逐漸升高，并與血糖、血脂代謝紊亂密切相關。而本研究結果顯示，微量清蛋白尿患者(即早期2型DN患者)血清FKN水平與正常清蛋白尿2型糖尿病患者相似，FKN與BMI、腰圍、TG、hs－CRP呈正相關，而與糖尿病病程、血糖、血壓無相關性;多元逐步回歸分析結果表明，BMI是血清FKN水平獨立的影響因素。結論的不一致可能與研究的人群不同有關，本研究選擇的人群為2型糖尿病微量清蛋白尿期患者，且入組2型糖尿病患者血糖、血壓控制基本達標。盡管本研究排除了使用具有一定抗炎作用的ACEI或ARB類降壓藥物、他汀類降脂藥物治療的2型糖尿病患者，但口服降糖藥物或胰島素注射治療是否對糖尿病患者低度炎癥狀態具有影響目前尚不清楚。此外，由于本研究缺乏正常人群的資料，因此尚不確定糖代謝異常的2型糖尿病患者較正常人群血清FKN水平是否升高。

CRP是一種非糖基化的聚合蛋白，含有5個亞單位，屬于Pentraxin家族;由肝臟產生并分泌，受激活的單核細胞、巨噬細胞產生的白介素1、腫瘤壞死因子α、轉化生長因子β、白介素6等細胞因子的調節［14］。越來越多的研究表明，血清hs－CRP水平作為一種敏感的、非特異的炎癥指標，在高血壓、糖尿病以及非糖尿病患者尿清蛋白產生過程中起著重要的作用［3］。Zambrano－Galvan等［15］研究發現升高的 hs－CRP 水平作為獨立的主要風險因素，與UACR呈正相關，而與血肌酐水平無相關性。另一項有關多種族亞裔人口的研究發現，升高的hs－CRP水平獨立于高血壓、高血糖，與尿微量清蛋白密切相關［16］。本研究相關分析結果表明，早期 DN患者hs－CRP水平較正常清蛋白尿組顯著升高，且與BMI、腰圍、eGFR、TG、UACR呈正相關，與HDL－C呈負相關;多元逐步回歸分析結果表明，BMI和UACR是血清hs－CRP水平主要的獨立影響因素。

目前，大多數研究都將BMI或腰臀比 (WHR)作為衡量肥胖程度的重要指標。由于本研究缺乏WHR數值，盡管相關分析結果表明，BMI、腰圍與血清FKN、hs－CRP均呈正相關，但回歸分析結果僅提示BMI為血清FKN和hs－CRP的獨立影響因素，與以往文獻報道一致［17－19］，提示2型糖尿病高BMI患者慢性炎癥狀態較低BMI患者更加明顯。Guven等［19］研究表明高BMI是肥胖癥患者血清hs－CRP水平升高的重要相關因子，并推測肥胖促進CRP水平升高的原因可能與肥胖時多種脂肪源性激素分泌增多、血脂和游離脂肪酸增高、氧化應激增強、血液流變學異常等病理生理改變，從而促進機體的輕微慢性炎癥的進展有關。

綜上所述，本研究初步探討了血清炎性因子FKN和hs－CRP與早期2型DN患者UACR、血糖、血脂等代謝指標的關系。結果表明，升高的血清hs－CRP水平與早期DN患者UACR密切相關，提示低度炎癥是早期DN微量蛋白尿產生的獨立危險因素。而血清FKN水平與早期2型DN患者UACR無相關，血清FKN水平在預測早期2型DN中的作用及其與糖尿病慢性并發癥的關系尚需要更大樣本的、更加合理、科學的臨床試驗進行研究。

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