江新鳳 邵宛芳 劉彩霞
(1.江西省蠶桑茶葉研究所 330202; 2.云南農業大學龍潤普洱茶學院 650201)
普洱茶是我國歷史悠久的特種茶,民間飲用普洱茶的人認為普洱茶具有消食、去膩、減肥、降血脂等功效,先人的茶藥總結,往往是憑感官、經驗而得,多數是知其然而不知其所以然。而如今隨著科學技術的進步,普洱茶藥效引起了國內外專家、學者們的特別關注,到目前為止,研究者們已對茶葉的降血脂、抗氧化、抗癌及防治心腦血管疾病、減肥、消炎、健齒護牙等功效開展了一系列的研究,但用普洱茶茶湯灌胃的研究報道較少。本研究旨在初步探討普洱茶調節血脂和預防脂肪肝作用,為進一步研究和探討普洱茶的保健作用提供科學依據。
1)茶葉原料:普洱茶(生茶)、普洱茶(熟茶):由云縣天龍生態茶葉有限責任公司生產;生產時間:2007年6月。經檢測:普洱生茶的水分含量9.08%<13%,總灰分4.98% <7.5%,水浸出物質48.83%>35.0% ,茶多酚33.7% >20%;普洱熟茶的水分含量9.97 % <14.0%,總灰分8.12% <8.5%,水浸出物質30.82% >28.0%,茶多酚11.8% <15%,成分符合《地理標志產品普洱茶》國家標準(GB/T22111 -2008)的規定,說明受試茶樣品質合格,并具有一定的代表性。
2)對照藥品:調節血脂中藥(XZK),藥店購買。
3)實驗動物:SD 雄性大鼠100 只,購于昆明醫學院實驗動物中心,許可證號:SYXK(滇)2005 -0008,飼養于昆明醫學院天然藥物研究所SPF 級重點實驗室。
總膽固醇(TCHO)、甘油三脂(TG)購于北京中生生物工程技術公司;低密度脂蛋白膽固醇(LDL -C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)。
RE-52AA 旋轉蒸發儀,上海亞榮生化儀器廠;TMS-1024 全自動生化分析儀,日本京都;Leica RM-2145 石蠟包埋切片機,德國制造;Leica EG1160包埋機:德國制造;Leica APS200 組織脫水機,德國制造。
1.4.1 茶湯制備方法[1]
普洱茶100g→沸水浸提三次(各次茶水比為1:20;1 :20;1:10;浸提時間分別為20min、20min、10min)→脫脂棉過濾→合并三次浸提茶湯→濾液減壓濃縮至100mL(濃縮溫度60℃)→裝瓶滅菌備用。(其茶湯濃度為1 g 茶/mL)。茶湯一周濃縮一次,濃縮后的茶湯低溫冷藏(4℃),灌胃前充分搖勻,現配現用。
1.4.2 藥的制備
準確稱取2g 市售降脂藥研缽內研細,放入燒杯中,加入蒸餾水攪拌溶解后定容至50mL,即為4%市售對照藥溶液,現配現用。
鼠用營養顆粒飼料,高壓滅菌,常溫貯存。自制高脂飼料其比例為:基礎飼料788 g/kg,豬油100g/kg,蛋黃粉100g/kg,膽固醇10g/kg,膽鹽2g/kg[2]。
SD 大鼠100 只適應性飼養一周后,10 只飼喂基礎飼料,其余飼喂高脂飼料,飼喂28 天,高脂模型建成后,挑選80 只高脂血癥大鼠按血清TC 水平和體重隨機分為8 組,10 只/組。試驗處理9 個:空白對照組,高脂模型組,藥物對照組,生茶低劑量組,生茶中劑量組,生茶高劑量組,熟茶低劑量組,熟茶中劑量組,熟茶高劑量組。低、中、高劑量分別為0.5g/kg·bw,1.0g/kg·bw,2.0g/kg·bw,經口灌胃,空白對照組、高脂模型組灌胃蒸餾水。灌胃量為10mL/kg·bw。受試物30 天后,SD 大鼠禁食12h,股動脈采血,收集血樣,分離血清,分裝待測。參照試劑盒說明書進行TCHO、TG、LDL -C、HDL -C 含量測定,同時觀察腹腔各臟器外觀并摘取肝組織進行常規HE 染色,以觀察其病理變化。
根據2006年2月中華醫學會肝病學分會脂肪肝和酒精性肝病學組制定的《非酒精性脂肪性肝病診療指南》[3],依據肝細胞脂肪變性占據所獲取肝組織標本量的范圍,可將肝細胞脂肪變性程度分為4 度(F0 -F4):F0 <5%肝細胞脂肪變性;Fl 為5%~30%肝細胞脂肪變性;F2 為31% ~50%肝細胞脂肪變性;F3 為51% ~75%肝細胞脂肪變性;F4 為75%以上肝細胞脂肪變性。炎癥程度可分3 級(G0-G3);GO 為無炎癥;G1 灶狀肝細胞炎癥或點狀肝細胞壞死;G2 小片狀肝細胞炎癥或壞死;G3 為大片狀肝細胞炎癥或壞死。

表1 普洱茶對高脂血癥SD 大鼠體重的影響(X ±SE)
給藥前(T0),各給藥組體重明顯高于陰性對照組,與模型組相當。表明造模結束后根據TC 隨機分組,體重間無明顯差異,給藥前的分組科學。從統計表1 中可以看出高脂模型組體重增長最為迅速,而灌胃普洱茶生茶和熟茶的各劑量組大鼠體重均有一定程度的抑制。
由表2 可見大鼠血清中總膽固醇(TC)普洱茶熟茶各劑量組與正常大鼠組水平接近,其余各組與高脂模型組相近;甘油三脂(TG)含量各給茶組明顯低于高脂模型組,其中XZK 對照組與模型組相當;高密度脂蛋白(HDL-C)各給茶組均高于模型組和XZK 對照組;低密度脂蛋白(LDL -C)均低于高脂模型組。
如圖1,普洱茶茶組AI 值與高脂模型組AI 值(為0.64 ±0.07)相比,茶組的動脈粥硬化指數(AI值)明顯偏低,且具有顯著性差異。與陰性對照組相比,給茶組稍高于陰性對照組;其中XZK 對照組AI 系數明顯高于其他各組。說明普洱茶能很好的抑制動脈粥樣硬化的產生,其中熟茶作用更明顯,其作用明顯優于XZK 降脂藥。
表2 大鼠血清TC、TG 、HDL-C 及LDL-C 水平(mmol/L)的影響( ±SE)

表2 大鼠血清TC、TG 、HDL-C 及LDL-C 水平(mmol/L)的影響( ±SE)
組別TCTGHDL-CLDL-C陰性對照1.61 ±0.05BC0.31 ±0.03BC1.41 ±0.01BC0.15 ±0.06 BC高脂模型2.42 ±0.08A0.83 ±0.09A1.30 ±0.08A1.05 ±0.21A XZK 對照組2.36 ±0.16A0.80 ±0.14A1.33 ±0.14A0.85 ±0.41A生茶低劑量2.40 ±0.16A0.24 ±0.04BC1.60 ±0.12ABC0.96 ±0.33A生茶中劑量2.29 ±0.15bA0.24 ±0.36BC1.69 ±0.13ABC0.78 ±0.36A生茶高劑量2.32 ±0.15bA0.28 ±0.05BC1.70 ±0.16ABC0.42 ±0.34BC熟茶低劑量1.92 ±0.07bA0.11 ±0.02aBC1.42 ±0.08bc0.63 ±0.43AB熟茶中劑量1.96 ±0.07Bc0.20 ±0.04BC1.45 ±0.07bC0.32 ±0.19BC熟茶高劑量1.84 ±0.05BC0.22 ±0.03BC1.49 ±0.04bC0.33 ±0.12 BC

圖1 普洱茶對高脂血癥大鼠AI 值的影響
除陰性對照組外(見表3),所有動物可見肝細胞脂肪空泡增多,有的泡被擠至一側,病變程度組間有明顯差別:普洱生茶、熟茶6 個劑量組肝臟脂肪變性明顯輕于模型組及XZK 對照組。熟茶3 個劑量組組間病變程度無明顯差異。普洱茶生茶高劑量組與普洱茶熟茶三個劑量組病變程度基本相當,變性程度輕于生茶中、低劑量組。表明普洱茶生茶、熟茶均有明顯防治高脂飲食引起的SD 大鼠肝臟脂肪變性的作用,其作用優于XZK 對照組,熟茶作用優于生茶。
表3 及圖1 結果顯示,肝臟脂肪病變程度和血脂指標一致,即普洱茶熟茶效果優于普洱茶生茶,且與劑量成正相關。

表3 普洱茶對高脂血癥大鼠肝臟脂肪病變程度
普洱茶能很好地抑制大鼠體重增長,延緩大鼠肥胖的發生。[4]
普洱茶能改善高脂血癥大鼠的血脂水平。血清生化檢測結果表明,普洱茶生茶和普洱茶熟茶可降低大鼠血清TC、TG、LDL - C 水平,升高大鼠血清HDL-C 水平。降低LDL -C 效果普洱茶熟茶優于普洱茶生茶;升高大鼠血清HDL -C 水平普洱茶生茶優于普洱茶熟茶,普洱茶熟茶低、中、高劑量組分別升高7.74%、7.74%、6.43%。其原因可能是普洱茶生茶和普洱茶熟茶的內含成分差異導致。[5~6]
普洱茶能預防大鼠脂肪肝變性。試驗結果表明:普洱茶生茶中、高劑量組和普洱茶熟茶低、中、高劑量組極顯著降低AI 值(P <0.01,),說明普洱茶能改善血管內皮功能,可減少機體對AS 和CHD 的易患性,而且具有明顯的抗AS 和預防心血管疾病作用,從而達到治療高脂血癥和動脈硬化的作用,普洱茶組能很好地抑制SD 大鼠脂肪肝的變性。
[1]劉勤晉,陳文品,白文祥.普洱茶急性毒性安全性評價研究報告[J].茶葉科學,2003,23(2):141 ~145.
[2]Yeh CW,Chen WJ,Chiang CT,et a1. Suppression of fatty acid synthase in MCF-7 breast cancer cells by tea and tea polyphenols:a possible mechanism for their hypolipidemic efects. J Pharmacogenomics,2003,3(5):267 ~276.
[3]中華醫學會肝臟學分會脂肪肝和酒精肝病學組.非酒精性脂肪性肝病診療指南[J].中華肝臟病雜志,2006,14(03):161 ~162.
[4]Y. Hou ,Wf. Shao,R. Xiao,et al. Pu -erh tea aqueous extracts lower atherosclerotic risk factors in a rat hyperlipidemia model[J]. Experimental Gerontology,2009 ,44:434 ~439.
[5]江新鳳,邵宛芳,侯艷.普洱茶預防高脂血癥及抗氧化的研究[J]. 云南農業大學校報(自然科學版),2009,24(5):705 ~712
[6]江新鳳,邵宛芳.普洱茶對高脂血癥大鼠血脂、血漿中血栓B2、6 -酮前列腺素F1α 水平影響[J].食品科學,2011,32(7):317 ~320