凝血因子Ⅴ、Ⅷ和組織因子與2型糖尿病合并冠心病的關(guān)系

王 曉，朱均權(quán)

(嵊州市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，浙江 嵊州 312400)

資料顯示，糖尿病(diabetes mellitus，DM)患者體內(nèi)多存在高凝狀態(tài)，具有血栓形成的風(fēng)險(xiǎn)，血栓形成在DM心血管并發(fā)癥的發(fā)生、發(fā)展過程中起著重要的促進(jìn)作用[1];而 2型 DM(type 2 diabetes mellitus，T2DM)并發(fā)心血管疾病是患者死亡的主要原因[2]。組織因子和凝血因子Ⅴ、Ⅷ在T2DM患者血液高凝狀態(tài)及血栓形成中扮演重要的角色，并可能與并發(fā)冠心病(coronary heart disease，CHD)有關(guān)[3-4]，但他們與不同類型 CHD關(guān)系的研究較少。因此，我們通過檢測(cè)凝血因子Ⅴ促凝活性(FⅤ:C)、凝血因子Ⅷ促凝活性(FⅧ:C)及組織因子(tissue factor，TF)抗原水平，探討其與2型DM合并CHD的關(guān)系及其臨床價(jià)值。

材料和方法

一、研究對(duì)象

2011年3至2011年10月在嵊州市人民醫(yī)院首次住院的114例T2DM患者，均符合世界衛(wèi)生組織(WHO)1999年T2DM診斷標(biāo)準(zhǔn)，其中單純T2DM 29例、T2DM合并CHD 85例，合并CHD的患者符合WHO 1979年公布的診斷標(biāo)準(zhǔn)。將85例T2DM合并CHD患者根據(jù)CHD不同類型分為T2DM合并急性心肌梗死(acute myocardial infarction，AMI)19例、T2DM合并陳舊性心肌梗死(old myocardial infarction，OMI)23例、T2DM 合并不穩(wěn)定型心絞痛(unstable angina pectoris，UAP)25例、T2DM合并穩(wěn)定型心絞痛(stable angina pectoris，SAP)18例。患者均排除其他血栓性疾病及出血性、感染性疾病，于試驗(yàn)前1周內(nèi)未服用影響凝血功能的藥物，且肝、腎功能未見明顯異常;合并CHD患者排除其他心臟病，且無煙酒嗜好。同時(shí)按性別、年齡相匹配選取同期嵊州市人民醫(yī)院健康體檢者24名作為正常對(duì)照組。正常對(duì)照者和患者基本情況見表1。

表1 正常對(duì)照者和T2DM患者基本資料

二、方法

患者入院后于次日清晨空腹(T2DM合并AMI者于溶栓前，正常對(duì)照者于清晨空腹)采集靜脈血2.7 mL，以枸櫞酸鈉1 ∶9抗凝，200×g離心10 min分離富血小板血漿，測(cè)定血小板聚集率(PAR)，1500×g離心10 min分離乏血小板血漿，分別測(cè)定FⅤ:C、FⅧ:C、血管性血友病因子(VWF)活性以及TF水平。PAR采用美國(guó)Helena Laboratories公司的血小板聚集測(cè)試儀測(cè)定，誘導(dǎo)劑為ADP(10 μmol/L);FⅤ:C和FⅧ:C分別采用德國(guó)SIEMENS公司乏因子血漿和凝血酶原時(shí)間(PT)、活化部分凝血活酶時(shí)間(APTT)試劑測(cè)定，測(cè)定儀器為日本Sysmex株式會(huì)社 CA7000型血凝分析儀;VWF和TF采用美國(guó)Diagnostica公司酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)試劑盒測(cè)定。所有操作均嚴(yán)格按照說明書及標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

結(jié) 果

一、T2DM患者FⅤ:C、FⅧ:C和TF水平

T2DM合并 CHD組和單純 T2DM組 TF、FⅤ:C和 FⅧ:C水平均明顯高于正常對(duì)照組(P＜0.001);T2DM合并CHD組明顯高于單純T2DM 組(P ＜0.01)。見表2。

二、T2DM合并不同類型CHD患者FⅤ:C、FⅧ:C和TF水平分析

T2DM合并AMI組和T2DM合并UAP組TF水平、FⅤ:C和FⅧ:C均明顯高于單純T2DM組、T2DM合并OMI組以及T2DM合并SAP組(P＜0.001);且T2DM合并AMI組明顯高于T2DM合并 UAP組(P＜0.01)。T2DM 合并 OMI組和T2DM合并SAP組TF水平均明顯高于單純T2DM組(P＜0.01)，但3組間 FⅤ:C和 FⅧ:C差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見表3。

三、TF、FⅤ:C、FⅧ:C 與 VWF、PAR 的相關(guān)性分析

TF、FⅤ:C、FⅧ:C與VWF及PAR均呈明顯正相關(guān)(P ＜0.05)，見表4。

表2 T2DM合并CHD組、單純T2DM組及正常對(duì)照組TF、FⅤ:C和FⅧ:C比較()

表2 T2DM合并CHD組、單純T2DM組及正常對(duì)照組TF、FⅤ:C和FⅧ:C比較()

注:與正常對(duì)照組比較，*P＜0.001;與單純T2DM組比較，#P＜0.01

組別 例數(shù) TF(IU/L) FⅤ:C(%) FⅧ:C(%)24 6.9 ±3.1 89.3 ±15.6 97.6 ±14.0單純 T2DM 組 29 16.9 ±6.9* 103.4 ±19.8* 110.2 ±16.9*T2DM 合并 CHD 組 85 24.6 ±7.8*# 124.3 ±17.9*# 132.5 ±17.1*#F 值 17.34 14.51 11.92 P值正常對(duì)照組0.00 0.00 0.00

表3 合并不同類型CHD的T2DM患者TF、FV:C和FⅧ:C比較

表4 TF、FⅤ:C、FⅧ:C 與 VWF、PAR 的相關(guān)性

討 論

在生理?xiàng)l件下，人體循環(huán)中僅存極微TF，而在血栓形成過程中，TF釋放、凝血因子和血小板活化則扮演重要的角色[2，5]。凝血瀑布學(xué)說[6-7]表明，TF和凝血因子Ⅴ、Ⅷ均為凝血系統(tǒng)活化的輔助因子，TF可通過激活FⅧ而在凝血過程中起始動(dòng)作用，而活化的凝血因子Ⅷ和V在活化血小板提供磷脂的參與下對(duì)凝血過程具有非常顯著的放大效應(yīng)，從而可以加速血栓形成。因此，在某種程度上，TF釋放、凝血因子Ⅷ和凝血因子Ⅴ活化增加可能比其他凝血因子在血栓形成過程中具有更重要的促進(jìn)作用，并在心血管疾病的發(fā)生中具有重要作用。

T2DM合并CHD多與動(dòng)脈粥樣硬化及患者凝血網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)活化而導(dǎo)致的血栓形成有關(guān)[8-9]。資料顯示，凝血因子Ⅴ和凝血因子Ⅷ與DM高凝狀態(tài)及血栓形成有密切關(guān)系[10]。高血糖可導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷和內(nèi)皮細(xì)胞增殖，從而使TF合成和釋放增加，凝血系統(tǒng)激活，血小板活化黏附、聚集增強(qiáng)，同時(shí)抗血栓物質(zhì)合成和分泌減少、消耗增加而易導(dǎo)致血栓形成，并促進(jìn)CHD的發(fā)生[1，9]。本研究結(jié)果顯示，單純T2DM 和T2DM 合并CHD患者TF、FⅧ:C和FⅤ:C均明顯高于正常對(duì)照者，且T2DM合并CHD者三者水平也明顯高于單純T2DM者。表明TF、凝血因子Ⅷ和凝血因子Ⅴ在T2DM患者心血管疾病的發(fā)生中具有重要作用，與T2DM合并CHD的發(fā)生、發(fā)展具有更加密切的關(guān)系。其原因可能是T2DM合并CHD時(shí)，患者在DM導(dǎo)致凝血網(wǎng)絡(luò)紊亂的基礎(chǔ)上，又由于冠狀動(dòng)脈損傷和粥樣硬化斑塊破裂，從而導(dǎo)致大量TF和VWF釋放，血漿濃度顯著增加，同時(shí)血小板活化聚集增多，而VWF為凝血因子Ⅷ載體，且活化血小板可表達(dá)大量凝血因子Ⅴ[8，10]。因此，患者可表現(xiàn)為TF水平、FⅧ:C和FⅤ:C顯著增加，這對(duì)T2DM心血管并發(fā)癥的發(fā)展有促進(jìn)作用。對(duì)此，從三者與PAR、VWF具有顯著相關(guān)性可以得到進(jìn)一步印證。因此，TF、FⅧ:C和FⅤ:C增高是T2DM合并CHD發(fā)生、發(fā)展的重要促進(jìn)因素。

CHD的嚴(yán)重程度多與心肌缺血程度有關(guān)，在冠狀動(dòng)脈粥樣硬化基礎(chǔ)上，繼發(fā)血栓形成導(dǎo)致心肌不同程度的缺血是各種類型CHD共同的病理、生理基礎(chǔ)。因此血栓形成因素的輕重與CHD嚴(yán)重程度有關(guān)[11]。而DM所致的高凝狀態(tài)與動(dòng)脈粥樣硬化所致凝血網(wǎng)絡(luò)紊亂的疊加，可能增強(qiáng)凝血系統(tǒng)活化程度而更易導(dǎo)致血栓形成，從而發(fā)生CHD事件[3]。本研究結(jié)果顯示，在 T2DM合并CHD患者中，合并AMI和UAP的患者TF、FⅤ:C和FⅧ:C明顯高于單純T2DM者，且合并AMI者也明顯高于合并UAP者。表明TF水平、FⅤ:C和FⅧ:C的高低與DM合并CHD患者的病情嚴(yán)重程度有關(guān)，可作為患者病情進(jìn)展的判斷指標(biāo)。這也進(jìn)一步表明三者在T2DM并發(fā)CHD的發(fā)生中起重要作用。因此，通過動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)他們的血漿水平可以為采取及時(shí)的預(yù)防和治療措施提供依據(jù)，以防止急性CHD事件發(fā)生。但本研究T2DM合并OMI和T2DM合并SAP患者僅TF水平明顯高于單純T2DM者，表明TF對(duì)T2DM合并CHD病情判斷是更加敏感的指標(biāo)。因此，TF、FⅤ:C和FⅧ:C可作為T2DM患者合并CHD的診斷指標(biāo)。TF對(duì)判斷T2DM合并CHD患者病情的進(jìn)展有重要價(jià)值。

[1]王兆鉞.糖尿病與血栓形成[J].血栓與止血學(xué)，2006，12(2):90-93.

[2]羅 丹，鄢盛愷，程歆琦，等.同型半胱氨酸及胱硫醚β-合成酶基因多態(tài)性與2型糖尿病合并冠心病的關(guān)系[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2009，24(3):182-185.

[3]Alzahrani SH，Ajjan RA.Coagulation and fibrinolysis in diabetes[J].Diab Vasc Dis Res，2012，7(4):260-273.

[4]Dayer MR，Mard-Soltani M，Dayer MS，et al.Inter-pretation of correlations between coagulation factors FⅤ，F(xiàn)Ⅷand vWF in normal and type 2 diabetes mellitus patients[J].Pak J Biol Sci，2011，14(9):552-557.

[5]Breitenstein A，Tanner FC，Lüscher TF.Tissue factor and cardiovascular disease:quo vadis[J].Circ J，2010，74(1):3-12.

[6]Gailani D ，Renné T.Intrinsic pathway of coagulation and arterial thrombosis[J].Arterioscler Thromb Vasc Biol，2007，27(12):2507-2513.

[7]Mackman N，Tilley RE，Key NS.Role of the extrinsic pathway of blood coagulation in hemostasis and thrombosis[J].Arterioscler Thromb Vasc Biol，2007，27(8):1687-1693.

[8]Jesty J，Beltrami E.Positive feedbacks of coagulation:their role in threshold regulation[J].Arterioscler Thromb Vasc Biol，2005，25(12):2463-2469.

[9]Stratmann B，Tschoepe D.Atherogenesis and atherothrombosis-focus on diabetes mellitus[J].Best Pract Res Clin Endocrinol Metab，2009，23(3):291-303.

[10]Wood JP，Silveira JR，Maille NM，et al.Prothrombin activation on the activated platelet surface optimizes expression of procoagulant activity[J].Blood，2011，117(5):1710-1718.

[11]李延輝，萬昕紅.冠心病研究進(jìn)展系列講座(2)冠心病的分型和病理生理機(jī)制[J].人民軍醫(yī)，2007，50(8):481-482.