水稻黑條矮縮病毒RNA干擾載體的構建及遺傳轉化

摘要：針對水稻黑條矮縮病毒S6、S10兩條RNA雙鏈，參考相關文獻，設計了2對引物，通過RT-PCR獲得了2條干擾片段，將這些干擾片段分別構建到RNA干擾載體中，進一步將整個RNA干擾片段構建入以玉米泛素Ubi為啟動子、以生物安全性的bar基因為選擇標記的植物雙元表達載體pCA1300-Ubi中，經農桿菌介導對黃淮稻區主栽水稻品種圣稻13進行遺傳轉化，為下一步對水稻黑條矮縮病的研究及抗性品種的培育提供候選材料。

關鍵詞：水稻黑條矮縮病；RNA干擾（RNAi）；Ubi啟動子；bar基因

中圖分類號：Q781文獻標識號：A文章編號：1001-4942（2013）01-0019-06

水稻是世界上最重要的糧食作物之一，亞洲近3/4的人口以食用稻米為主。目前我國水稻常年種植面積約占全國糧食種植面積的30%，其產量占我國糧食總產量的40%以上。因此，稻米產量的高低及品質的優劣直接關系到人們的生活及健康，已受到人們越來越多的重視。

水稻黑條矮縮病（ rice black-streaked dwarf disease， RBSDD） 是由水稻黑條矮縮病毒引起的、由灰飛虱傳播的一種病毒病，主要分布于中國、朝鮮、韓國和日本等東亞國家和地區， 對水稻、大麥、小麥、玉米等禾谷類作物造成危害。在20世紀60年代，該病曾廣泛發生在我國華東諸市， 之后有一段沉寂期；20世紀90年代后期， 該病在浙江省再次爆發流行， 且蔓延速度非常快，對包括浙江、上海、江蘇、安徽、江西以及福建北部在內的長江流域中東部整個稻作區的水稻生產造成毀滅性危害，發病田塊一般減產10%～40%，重病田甚至絕產，造成了巨大的經濟損失[1]。目前，對于水稻黑條矮縮病的防治主要是農藥防治傳毒介體灰飛虱，但由于介體昆蟲種群數量大，防治效果不佳且對環境的影響較大。……