酶標(biāo)儀在加樣儀中比對、性能確認(rèn)的運(yùn)用

[摘要] 目的 建立全自動加樣儀儀器的比對、性能確認(rèn)的可靠、簡易方法。 方法 利用酶標(biāo)儀比色方法對全自動加樣儀進(jìn)行儀器的比對、性能確認(rèn)，以期對全自動加樣儀狀態(tài)進(jìn)行定期或時時監(jiān)控，以避免加樣過程的漏加而引起非試劑因素的漏檢。 結(jié)果 不同的全自動加樣儀不同加樣量的吸光度均值經(jīng)過調(diào)液體曲線校正后，加樣儀1與加樣儀2加樣結(jié)果較為接近。 結(jié)論 避免酶聯(lián)檢測中因儀器因素所引發(fā)的漏檢，提高設(shè)備運(yùn)行效率，減少非預(yù)期的風(fēng)險(xiǎn)。

[關(guān)鍵詞] 全自動加樣儀；加樣；性能確認(rèn)；比對；酶標(biāo)儀

[中圖分類號] R457 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 2095-0616（2013）01-83-02

2012發(fā)布的《血站基本操作技術(shù)規(guī)程》4.3.1新的或者經(jīng)過大修的檢測設(shè)備在正式投入正常使用之前應(yīng)經(jīng)過確認(rèn)。新設(shè)備的確認(rèn)應(yīng)包括安裝確認(rèn)、運(yùn)行確認(rèn)和性能確認(rèn)。經(jīng)過大修的設(shè)備根據(jù)需要進(jìn)行適當(dāng)?shù)拇_認(rèn)，必要時應(yīng)進(jìn)行計(jì)量檢定或校準(zhǔn)。4.3.3如果使用多臺設(shè)備測一個項(xiàng)目，應(yīng)對設(shè)備之間的性能和差異進(jìn)行比較。

1 材料與方法

1.1 設(shè)備與試劑

HAMILTON STAR-8CH 全自動加樣儀2臺（定義為加樣儀1和加樣儀2）、AUTOBIO PHOMO 酶標(biāo)儀、其林貝爾QB-9002微板快速振蕩器、吉爾森加樣槍10-100（已較準(zhǔn)）；長春博德抗A抗B血型定型試劑（20101216-2）。

1.2 方法與步驟

（1）于空白（未包被、無封閉）的酶標(biāo)微孔中用加樣槍手工準(zhǔn)確分配100 UL的0.9%生理鹽水于各孔，共12塊板（96孔）。（2）分別用不同的全自動加樣儀（加樣儀1和加樣儀2）采用一次吸樣多次分配的方式，分別分配50、10、100、20 UL的長春博德抗A抗B血型定型試劑的抗B血清（使用前要混勻）于（1）中所備的空白酶標(biāo)微孔中，每種體積各96孔（一塊板），其中10、20 UL采用液面接觸滴注的方式。于震蕩器中中速震蕩5 min后酶標(biāo)儀單波長450讀數(shù)。（3）加樣儀2加樣曲線重新編輯，按照（2）的方法分配50、10、100、20 UL于各板中。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS13.0版統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，相關(guān)計(jì)量資料采取U檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

表1可見加樣儀1的加樣結(jié)果與加樣儀2相差較大，可微調(diào)整液體曲線中的校正量。調(diào)整后可見經(jīng)過調(diào)液體曲線校正后，加樣儀1與加樣儀2加樣結(jié)果較為接近。見表2。

3 討論

如何做好全自動設(shè)備的確認(rèn)，提高設(shè)備運(yùn)行效率，減少非預(yù)期的風(fēng)險(xiǎn)，是實(shí)驗(yàn)室人員共同面對的問題[1]。在設(shè)備確認(rèn)工作中，運(yùn)行確認(rèn)和性能確認(rèn)是整個確認(rèn)工作的核心，專業(yè)性強(qiáng)，由于設(shè)備類別和原理等不同，同時缺乏統(tǒng)一模式，需按照國家和行業(yè)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，并結(jié)合設(shè)備說明書以及血站的使用需求，對設(shè)備性能和運(yùn)行進(jìn)行全面測試[2]。全自動加樣儀的性能確認(rèn)、比對大多數(shù)做法是與酶聯(lián)后處理結(jié)合在一起為一個檢測系統(tǒng)來評估[3-4]。這樣對標(biāo)本和試劑的選擇標(biāo)準(zhǔn)要相當(dāng)高：需選擇臨介值附近的標(biāo)本；需選擇敏感及重復(fù)性好的試劑，而且酶聯(lián)后處理要穩(wěn)定性很好，這樣才能敏感反應(yīng)出全自動加樣儀的狀態(tài)。但酶聯(lián)反應(yīng)的影響因素相當(dāng)多，因此這樣較難真正反應(yīng)出全自動加樣儀的狀態(tài)。另汪德海等[4-5]報(bào)道：全自動加樣儀的性能確認(rèn)與比對采用與其校準(zhǔn)一樣的模式，即稱重法。但此法需特殊儀器及專業(yè)人員操作，一般較難常規(guī)化，且加樣僅能單個通道單次加樣，這樣很耗時且加樣模式與平常工作模式（一般為一次吸樣多次分配）相差較大，也未能真正反應(yīng)全自動加樣儀日常的加樣狀態(tài)。本研究方法采用長春博德抗A抗B血型定型試劑的抗B血清為標(biāo)本，其本身為穩(wěn)定的有色物質(zhì)且其黏度系數(shù)與血漿較為接近，加樣模式與日常工作一致，在短時間內(nèi)可獲得大量的可靠數(shù)據(jù)，可進(jìn)行儀器間比對或與手工加樣進(jìn)行比對而達(dá)到全自動加樣儀的性能確認(rèn)、儀器日常運(yùn)行狀態(tài)的監(jiān)控目的。如表2所示，加樣儀儀器2CV要比加樣儀器1大些，可依據(jù)溫濤等[5-6]報(bào)道方法適當(dāng)調(diào)整液體曲線，以期達(dá)到最佳的CV值。

酶聯(lián)檢測中因儀器因素所引發(fā)的漏檢，除了全自動加樣儀的漏加樣外，酶聯(lián)后處理儀器的試劑的漏加也是因素之一。本研究作者在每批次的酶聯(lián)檢測中的前面與最后的位置都由加樣儀分別自動添加一室內(nèi)質(zhì)控樣本，在一定程度上可對后處理儀器的試劑的加入情況間接進(jìn)行監(jiān)控。當(dāng)然，對于酶聯(lián)后處理儀器的試劑滴注后的及時直接監(jiān)控是下一步的研究重點(diǎn)，也是防止漏檢另一關(guān)健要點(diǎn)。

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（收稿日期：2012-11-09）