銀屑膠囊的薄層色譜定性鑒別

[摘要] 目的 建立銀屑膠囊的薄層鑒別方法。 方法 采用薄層色譜法對銀屑膠囊中的土茯苓、菝葜分別進(jìn)行定性鑒別。 結(jié)果 在薄層色譜中能檢出土茯苓、菝葜藥材，薄層色譜斑點(diǎn)清晰，陰性對照溶液無干擾，且專屬性強(qiáng)，重現(xiàn)性好。 結(jié)論 所建立的薄層色譜方法可用于該制劑的質(zhì)量控制。

[關(guān)鍵詞] 銀屑膠囊；質(zhì)量控制；薄層色譜法

[中圖分類號] R286.0 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] B [文章編號] 2095-0616（2013）01-111-02

銀屑膠囊是根據(jù)中醫(yī)理論研制的中藥復(fù)方制劑，處方由土茯苓、菝葜兩味藥材按一定比例組成，具有清熱解毒、祛濕除痹、活血化瘀、祛風(fēng)止痛的功效，臨床用于治療銀屑病、濕疹等疾病。為控制該藥的內(nèi)在質(zhì)量，確保用藥安全有效，采用薄層色譜法（TLC）進(jìn)行了定性鑒別，旨在為本品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂提供依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

3 L PQ3120BENCH超聲處理器，日本島津薄層鋪板器，層析缸等。

1.2 試藥

硅膠G（薄層層析用），青島海洋化工廠，國家藥典委員會監(jiān)制；所用試劑均為分析純。土茯苓對照藥材（批號121439-200401）、菝葜對照藥材（批號121466-200501），均由中國藥品生物制品檢定所提供。

2 方法與結(jié)果

2.1 試液的制備

2.1.1 供試品溶液制備 取本品約3 g，加水60 mL，超聲處理30 min，放冷，轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，加鹽酸調(diào)pH至2，再加入乙酸乙酯震搖提取兩次，每次取用乙酸乙酯量均為20 mL，合并兩次的提取液，通過鋪有無水硫酸鈉的漏斗后將濾液蒸干，加入甲醇1 mL使殘?jiān)芙猓芙庖鹤鳛楣┰嚻啡芤骸?/p>

2.1.2 陰性液的制備 （1）取缺菝葜的陰性樣品，按照供試品溶液制備的方法制成菝葜的陰性液，由于處方僅為土茯苓、菝葜兩味藥材按一定比例組成，因此該陰性液即為土茯苓的藥材溶液。（2）同（1）法，取缺土茯苓的陰性樣品，按照供試品溶液制備方法制成土茯苓的陰性液，該陰性液即為菝葜的藥材溶液。

2.1.3 對照藥材溶液的制備 （1）菝葜對照藥材溶液的制備：取菝葜對照藥材5 g，加水100 mL，加熱回流4 h，濾過，濾液濃縮至約10 mL，加乙醇15 mL，攪拌，靜置，濾過，濾液蒸干，按供試品溶液制備方法同法制成對照藥材溶液。（2）土茯苓對照藥材溶液的制備：取土茯苓對照藥材5 g，加水100 mL，加熱回流4 h，濾過，濾液濃縮至約10 mL，加乙醇15 mL，攪拌，靜置，濾過，濾液蒸干，按供試品溶液制備方法同法制成對照藥材溶液。

2.2 薄層鑒別

2.2.1 菝葜的鑒別 按照薄層色譜法[1]（《中國藥典》2010年版第一部附錄Ⅵ B）進(jìn)行試驗(yàn)，取硅膠G薄層板，分別吸取上述3種溶液（即供試品溶液、菝葜陰性液及菝葜對照藥材溶液）各15 μL，點(diǎn)于此板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸（15︰2︰1）為展開劑進(jìn)行展開，展開后取出晾干。結(jié)果：在色譜中，供試品與對照藥材色譜相應(yīng)位置上，顯示出相同顏色的斑點(diǎn)，且Rf值適中，斑點(diǎn)的分離度、重現(xiàn)性均較好，陰性樣品在相應(yīng)位置上無干擾，專屬性良好。見圖1。

2.2.2 土茯苓的鑒別 照薄層色譜法[1]（《中國藥典》2010年版第一部附錄Ⅵ B）進(jìn)行試驗(yàn)，取硅膠G薄層板，分別吸取上述3種溶液（即供試品溶液，土茯苓陰性液及土茯苓對照藥材溶液）各10 μL，點(diǎn)于此板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸（15︰5︰1）為展開劑進(jìn)行展開，展開后取出晾干。以三氯化鐵乙醇溶液為顯色劑噴板進(jìn)行顯色。結(jié)果：在色譜中，供試品與對照藥材色譜相應(yīng)位置上，顯示相同顏色的斑點(diǎn)，且Rf值適中，斑點(diǎn)的分離度及重現(xiàn)性均較好，陰性樣品在相應(yīng)位置上無干擾，專屬性良好。見圖2。

3 討論

土茯苓和菝葜兩種藥物的乙酸乙酯提取物有顯著的抑菌抗炎作用，且抑菌范圍廣，抑菌活性強(qiáng)[2-3]。因此在試液的制備中采取乙酯乙酯萃取成分加以分析。

土茯苓藥材中含有琥珀酸[4]，而菝葜藥材中未描述有琥珀酸，以琥珀酸為標(biāo)準(zhǔn)品，甲苯-乙酸乙酯-甲酸（5︰4︰1）為展開劑，展開后取出晾干，在105℃加熱半小時，放冷，噴以0.05%溴甲酚綠乙醇溶液進(jìn)行鑒別[5]，結(jié)果在與對照品色譜相應(yīng)位置上，未顯相同顏色的斑點(diǎn)，故未列入標(biāo)準(zhǔn)。

在土茯苓的薄層色譜鑒別中，曾參考《中藥活性成分分析手冊》中土茯苓的鑒別方法[6]，以三氯甲烷-乙酸乙酯（9︰1）為展開劑，展開后取出晾干，以10%磷鉬酸乙醇溶液為顯色劑進(jìn)行噴板顯色，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。但結(jié)果不理想，專屬性不好。

在試驗(yàn)中，曾以三氯甲烷-丙酮-冰醋酸（7︰2︰1）為展開劑進(jìn)行研究，供試品色譜中，在與土茯苓陰性液色譜相應(yīng)的位置上，顯示出相同黃色的斑點(diǎn)，菝葜陰性液（即土茯苓藥材溶液）在此處無斑點(diǎn)，故本方法具有專屬性，但Rf值太大，故還需調(diào)整展開劑。另將薄層板噴以三氯化鐵乙醇溶液進(jìn)行顯色，供試品色譜中，在與菝葜陰性液色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，土茯苓陰性液（即菝葜藥材溶液）在此處無斑點(diǎn)，故本方法具有專屬性，但Rf值太小，故還需調(diào)整展開劑。

采用薄層色譜法，分別以菝葜、土茯苓為對照藥材進(jìn)行定性鑒別，試驗(yàn)結(jié)果表明，本方法簡便、準(zhǔn)確、專屬性強(qiáng)。由于兩種藥材中的檢測成分有極性差異，因此采用不同的展開系統(tǒng)進(jìn)行鑒別，并同時采用對照藥材加以鑒別。實(shí)驗(yàn)證明，采用薄層色譜鑒別處方中的土茯苓、菝葜的特征色譜斑點(diǎn)，重現(xiàn)性好，專屬性強(qiáng)，陰性對照液無干擾，可以作為該制劑的定性質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 國家藥典委員會.中國藥典一部[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2010：附錄34.

[2] 陳紅梅，秀蘭，吳占全，等.土茯苓的化學(xué)與藥理研究進(jìn)展[J].中國民族醫(yī)藥雜志，2008，11（11）：71-73.

[3] 晏綠金，文莉，于國平，等.菝葜活性部位抗炎機(jī)理研究[J].中藥材，2008，31（8）：1235-1236.

[4] 李強(qiáng).土茯苓現(xiàn)代研究概述[J].中國藥業(yè)，2008，17（14）：76-77.

[5] 中華人民共和國衛(wèi)生部.中華人民共和國衛(wèi)生部部頒藥品標(biāo)準(zhǔn)《腦心清片》[S].WS3-B-3974-98，Z20-294.

[6] 常新全，丁麗霞.中藥活性成分分析[M].北京：學(xué)苑出版社，2002：105-106.

（收稿日期：2012-09-28）