枸櫞酸克羅米芬治療精子頂體酶異常的療效觀察

[摘要]目的 觀察枸櫞酸克羅米芬治療精子頂體酶活性低患者的療效。 方法 65例精子頂體酶活性低于正常的患者分為A、B兩組，A組患者接受克羅米芬50 mg/d，連續20 d；B組患者接受維生素C 0.2 g/d，連續20 d。 結果 A組19例患者精子頂體酶大于48.2 μIU/106，有效率為57.6%；B組9例患者精子頂體酶大于48.2 μIU/106，有效率為28.1%（P<0.01）。用藥后A組精子頂體酶（59.2±28.3）μIU/106，B組精子頂體酶（36.2±16.9）μIU/106 ，差異有統計學意義（P<0.01）。 結論 克羅米芬可以有效改善精子頂體酶活性，其機制有待探索。

[關鍵詞] 枸櫞酸克羅米芬；頂體酶；精子

[中圖分類號] R321.1；R698.2 [文獻標識碼] B [文章編號] 2095-0616（2013）01-89-02

精子頂體內膜和赤道部膜上含有頂體酶，其活性反映精子質量，頂體酶幫助精子穿透卵子外層，是精卵融合的先決條件，頂體酶活性不足可以導致不孕。頂體的形成很復雜，精子成熟過程的早期階段已經開始，但是影響頂體形成和頂體酶活性的因素目前并不清楚[1]，因此臨床缺乏治療頂體酶活性不足的有效方法。本研究使用枸櫞酸克羅米芬治療精子頂體酶活性低于正常的患者，并觀察其效果。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2010年2月～2012年7月東莞市人民醫院生殖醫學中心就診的男性患者，經檢測精子頂體酶低于48.2μIU/106，共65例，按照就診序號單雙號分為A組共33例，B組共32例。A組患者年齡23～31歲，平均（29.2±3.5）歲，B組患者年齡25～29歲，平均（27.7±2.6）歲，差異無統計學意義（P>0.05）。A組精子頂體酶（32.8±12.1）μIU/106，B組精子頂體酶（31.6±11.3）μIU/106，差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 精子頂體酶測定 采用Kennedy 改良法：患者禁欲3～7 d，采集新鮮精液完全液化后，根據精子密度計算標本量，得到精子量約7.5×106個；標本離心2 000 g×20 min，棄去精漿，加入抑制劑100 μL，反應液100 μL，混勻后于24℃孵育1 h，倒入0.5 cm比色皿，分光光度計波長410 nm下讀取數值，計算頂體酶數值。

1.2.2 治療方法 A組和B組的患者分別接受藥物治療和安慰劑治療：A組患者接受枸櫞酸克羅米芬（塞浦路斯高特制藥有限公司，H20091079 HK-24713）50 mg/d口服，連續20 d；B組患者接受維生素C 0.2 g/d，連續20 d。兩組患者停藥10 d后復查精子頂體酶。

1.3 統計學方法

使用SPSS 13.0統計軟件進行處理，計量資料采用（）表示，采用t檢驗，計數資料采用x2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

用藥后，A組19例患者精子頂體酶大于48.2μIU/106，有效率為57.6%；B組9例患者精子頂體酶大于48.2μIU/106，有效率為28.1%，差異有統計學意義（P<0.01）。見表1。

3 討論

精子形成和成熟過程中頂體逐漸形成，頂體中的各種酶活性正常是精卵結合的前提條件。精子頂體酶活性受很多因素的影響，但是其確切影響機制目前還不清楚，還沒有治療精子頂體酶活性異常的有效方法，多數患者因此失去自然妊娠的機會。

本研究使用枸櫞酸克羅米芬治療精子頂體酶活性低于正常的患者，用藥后精子頂體酶活性顯著提高，其中57.6%的患者精子頂體酶活性達到正常范圍，明顯高于安慰劑組。

枸櫞酸克羅米芬治療精子異常頂體酶活性的機制并不清楚，推測其作用可能通過調節患者性激素或者鈣離子內流介導。克羅米芬是一種人工合成的非類固醇復合物，其抑制下丘腦和垂體部位的雌激素受體，增加促性腺激素釋放激素的分泌，刺激黃體生成素和卵泡刺激素的分泌，同時選擇性地刺激腎上腺雄激素的生物合成，Da Ros等[2]發現克羅米芬刺激內源性雄激素合成，同時黃體生成素刺激睪丸間質細胞分泌睪酮。因此克羅米芬改變男性雌激素和雄激素的合成分泌。性激素是精子頂體酶活性重要影響因素之一，研究表明雌激素與雄激素的平衡影響精子活力和受精能力，并改善精子頂體缺陷[3-4]。克羅米芬可能通過這一途徑影響精子頂體酶的活性。另外一點，精子頂體酶激活需要鈣離子內流[5]，Darszon等[6]發現鈣離子通道在精子成熟、游向卵母細胞和精卵結合過程起非常重要的作用。Jiann等[7]發現克羅米芬可以增加鈣離子內流，克羅米芬是否能通過增加細胞鈣離子濃度改善頂體酶活性還有待進一步研究。

克羅米芬的治療效果良好，但是其作用機制不很清楚，這一點也是今后的研究方向。

[參考文獻]

[1] Berruti G，Paiardi C.Acrosome biogenesis[J].Spermatogenesis，2011，1（2）：95-98.

[2] Da Ros CT，Averbeck MA. Twenty-five milligrams of clomiphene citrate presents positive effect on treatment of male testosterone deficiency-a prospective study[J].Int Braz J Urol，2012，38（4）：512-518.

[3] Carreau S，Wolezynski S，Galeraud-Denis I.Aramatase，oestrogens and human male reproduction[J].Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci，2010，365（1546）：1571-1579.

[4] 陳可，包華瓊，丁杰，等.精子頂體酶活性與精液常規檢查參數關系分析[J].中國醫學創新，2011，8（14）：8-10.

[5] Ikawa M，Inoue N，Benham A，etc al. Fertilization： a sperm’s journey to and interaction with the oocyte[J].J Clin Invest，2012，120（4）：984-994.

[6] Darszon A，Nishgaki T，Beltran C，et al. Calcium channels in the development maturation，and function of spermatozoa[J].Phusiol Rev，2011，9（4）：1305-1355.

[7] Jiann BP，Lu YC，Chang HT，etc al. Effect of clomiphene on Ca2+ movement in human prostate cancer cells[J].Life Sci，2002，70（26）：3167-3178.

（收稿日期：2012-11-03）