高鹽飲食大鼠腦干基底部ET、CGRP含量變化情況分析

摘要：目的：本實驗動態測定高鹽飲食大鼠在食用高鹽不同時期腦干基底部 ET、CGRP含量的變化情況。

方法：把4%NaCl液體500ml裝在500ml水瓶中，讓2 月齡SD大鼠每天自由飲用，共持續10周時間，即可形成高血壓動物模型，該模型動物同時伴有心臟肥厚，血管壁中層增厚等血管重構現象。10周后麻醉宰殺SD實驗大鼠，速將大鼠置于冰盤上斷頭分離腦干、稱重，沸水浴10分鐘，置玻璃勻漿器， 加入1 mol/ L 預冷的醋酸（ w/v =1∶5） 勻漿， 低溫離心（ 4500rpm×10min，4℃），取上清液置于聚丙乙烯塑料試管中加 PELH 液補充至 3ml， 所取血液迅速置于含 10% EDTANa2501和100l 抑肽酶試管中， 混勻低溫離心（ 4500rpm×10min， 4℃） ， 取上清液置于聚丙乙烯塑料試管中，所有樣本均于-70℃低溫冰箱中保存。樣本收集齊后行一次性用南京建成出品的ET 和CGRP 放免藥盒進行測試，操作程序嚴格按各藥盒說明進行^[1]。然后用放射免疫酶聯法測試ET、CGRP含量。

結果：2月齡大鼠經過10周高鹽飲食后導致高血壓，其腦干勻漿組織中的ET含量均明顯高于同齡SD大鼠腦干勻漿組織中的ET含量（P<0. 01）。而12月齡大鼠腦干ET含量均明顯高于2月齡大鼠。

結論：①高鹽飲食可以導致高血壓；②高血壓的形成和發展可能與高水平的ET含量和較低的CGRP含量有關；③老齡化也是高血壓一個不容忽視的原因。

關鍵詞：ET CGRP 高血壓 高鹽飲食

【中圖分類號】R4 【文獻標識碼】A 【文章編號】1008-1879（2012）12-0008-01

1 材料與方法

1.1 實驗動物。2月齡SD大鼠100只，體重90～140g，12月齡SD大鼠50只，體重100～160g，購自西安交通大學醫學院實驗動物中心， 將2月齡SD大鼠隨機分為2組，即：對照組150只，造模組50只，12月齡SD大鼠50只裝在一個籠子內，即對照組II50只。3組大鼠分裝在3個大的動物飼養籠中，在同一條件下，用顆粒型普通大鼠飼料喂養，飲用自來水，適應性喂養1周。

1.2 高鹽飲食高血壓動物模型建立。將3組大鼠同樣喂養的基礎上，給造模組50只SD大鼠每天加入4 %NaCl液體500ml，SD大鼠每天自由飲用，共持續10周時間^[3]。

1.3 樣本收集及測定。10周實驗結束后，將所有大鼠，用20%烏拉（0.6ml/100mg）胸腔內注射麻醉，同時迅速將大鼠置于冰盤上斷頭分離腦干、稱重，沸水浴10分鐘，置玻璃勻漿器， 加入1 mol/ L 預冷的醋酸（w/v=1∶5） 勻漿， 低溫離心（4500rpm×10min，4℃），取上清液置于聚丙乙烯塑料試管中加 PELH 液補充至 3ml， 所取血液迅速置于含 10% EDTANa2501和1001抑肽酶試管中， 混勻低溫離心（4500rpm×10min， 4℃） ， 取上清液置于聚丙乙烯塑料試管中，所有樣本均置于-70℃低溫冰箱中保存。樣本收集齊后一次性用南京建成出品的ET和CGRP放免藥盒進行測試，操作程序嚴格按各藥盒說明進行。

1.4 統計處理。各組測定結果以表示， 用電子計算機進行各組均數和各組均數間差別顯著性檢驗（P檢驗）。

2 結果

表 各組SD大鼠腦ET、CGRP的變化比較（X±S，n=50只）

組別ET（pg/mg）CGRP（pg/ml）

對照組Ⅰ7.76±2.07**157.26±32.81**

對照組Ⅱ6.37±1.9441.02±27.50

造模組1.91±5.18**395.43±40.00

3 討論

本課題采用動物作為實驗研究對象，研究高血壓的病因及生化指標的變化，課題結果顯示： 2月齡SD大鼠高鹽飲食高血壓SD大鼠腦干中 ET水平明顯高于同齡正常血壓SD大鼠的含量（P<0.01），而 12月齡的正常血壓的SD大鼠腦干ET含量又明顯高于2月齡的含量（P<0.01）。2月齡高鹽飲食高血壓SD大鼠腦干CGRP 含量低于2月齡和12月齡SD大鼠的含量，并隨鼠齡增加，其含量逐漸下降。結果提示：①造模組SD大鼠每天加入4%NaCl液體500ml，共持續10周時間，所有大鼠都出現了高血壓，說明長期高鹽飲食可以形成高血壓，建議我們平時最好低鹽飲食；②2月齡高鹽飲食高血壓SD大鼠腦干和血漿中 ET水平明顯高于同齡正常血壓的SD大鼠腦干和血漿中 ET含量（P<0.01），而 12月齡的正常血壓SD大鼠的腦干和血漿ET和血漿CGRP 含量低于2月齡WR的含量（P<0.01）。

有報道^[5]，在高血壓狀態下， 腦組織缺血范圍比正常血壓狀態下大，而且恢復差， 除與側支循環血管的損害有關外，也可能與ET 的過量釋放有關。本實驗結果說明， 在中樞和外周高水平的ET 含量和較低水平的CGRP 含量可能與高血壓的形成、維持和發展有關。局部腦缺血后， ET在高血壓狀態下持續處于高水平，不利于側支循環的開放，而可能加速缺血性腦損傷的發生和發展， 此亦可能是臨床高血壓性腦梗塞患者恢復慢，療效差的一個重要原因。

參考文獻

[1] 彭英，黃如訓，李湘平等.高血壓致腦血管損害及其對腦梗塞影響的實驗研究[J].中華醫學雜志2011，14（11）：100

[2] 馬維紅，李琦.高血壓流行及危險因素調查現狀[J].內科，2010，2（15）：201-203

[3] 彭英，黃如訓，徐鐘源，等.高血壓及局部腦缺血后AII，ANF在下丘腦和血漿中的含量變化[J].中國病理生理雜志，2008，7（15）：705-707