高效液相色譜技術在食品安全檢測中的應用

摘要：高效液相色譜技術在食品安全中起著越來越重要的作用，為人們的食品安全帶來了保障。本文分析了高效液相色譜技術在食品營養成分、食品添加劑、食品有毒有害物質等檢測中的應用。

關鍵詞：高效液相色譜法技術 食品營養成分 食品添加劑

一、高效液相色譜法

高效液相色譜（High performance liquid chromatography，HPLC）也叫高壓液相色譜（High pressure liquid chromatography），是在經典液相色譜法的基礎上，于20世紀60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發展起來[1]。

高效液相色譜法具有適用范圍廣、分離效率高、速度快、流動相可選擇范圍寬、固定相的種類繁多、靈敏度高、色譜柱可反復使用等特點。因而，廣泛應用于揮發性低、熱穩定性差、分子量大的高分子化合物以及離子型化合物的分離檢測。

二、HPLC技術在食品安全檢測中的應用

1、HPLC技術在食品營養成分檢測中的應用

（1）糖類的檢測。對于碳水化合物的測定，HPLC法操作簡便，靈敏度高，可同時測定各種糖，國際上已將HPLC法作為酒類糖分含量測定的仲裁法。林婧燁等采用高效液相色譜- 蒸發光散射測定龍眼果中水溶性單糖和寡糖組分的種類和含量。

（2）氨基酸的檢測。氨基酸是生物體中重要的生命物質，是組成酶和蛋白質的基本單元，準確靈敏地測定食物中氨基酸的含量具有十分重要的意義。目前，柱前衍生化高效液相色譜法以其靈活和易于推廣的特點，逐漸取代了傳統的茚三酮方法，用以檢測氨基酸。劉霄玲采用柱前衍生法，用C18反相色譜柱分離試樣，經HPLC測定乳制品中16種氨基酸的含量，結果表明，該方法操作簡便，重現性好，色譜分離時間短且分離度好。

（3）維生素的檢測。維生素是維持人體生命活動必需的一類有機物質，也是保持人體健康的重要活性物質，如果長期缺乏某種維生素，就會引起生理機能障礙而發生某種疾病。一般由食物中取得。[1]劉惠敏等用高效液相色譜法同時測定維生素B1和維生素B2的方法，該方法色譜條件為 uBondpak C（18）柱；甲醇/水=40/60（V/V）為流動相，流速為0.8ml/min；采用熒光檢測器；平均回收率分別為95.50%和95.82%。該方法具有簡單、省時、干擾小等優點，并有較高的靈敏度、準確度和寬的應用范圍。

2、HPLC技術在食品添加劑檢測中的應用

（1）甜味劑的檢測。HPLC法可以測定食品中糖精鈉、甜味素、甜蜜素、安賽蜜、甘草苷、甜菊苷等多種甜味劑，其測定人工合成甜味劑最常用的方法為RHPLC-UVD法、陰離子交換色譜法、離子對色譜法。因此，常用檢測器有UVD、CD；色譜柱為C18柱、陰離子交換柱和-NH2柱。

（2）防腐劑的檢測。HPLC法測定防腐劑方法簡便、靈敏、準確。其中，BA、CA、對羥基苯甲酸乙酯（丙酯）、脫氫乙酸均可采用RHPLC測定。UVD-RID串聯可同時檢測甜蜜素、BA和CA。

（3）色素的檢測。HPLC可同時測定多種人工合成色素和天然色素，方法簡便。如采用HPLC-UVD，C18柱分離的梯度洗脫系統可同時測定新紅、檸檬黃、莧菜紅、胭脂紅、日落黃、赤蘚紅、亮藍。

3、HPLC技術在食品有毒有害物質檢測中的應用

（1）HPLC法檢測農藥殘留

目前使用的農藥都是有機化合物，具有強極性、熱不穩定性、分子量大及低揮發性。食品中的農藥殘留檢測主要應用氣相色譜法，但對于一些對熱不穩定或易失去活性和堿性條件下易分解的物質（如氨基甲酸酯農藥的分析，溴氰菊酯的分析、敵克松的分析等），不能直接使用氣相色譜法（GC法），HPLC法在一定程度上彌補 GC 法在測定蔬菜水果中不同種類農藥的殘留的缺點和不足，成為農藥殘留定性、定量的有效手段。

（2）HPLC法檢測獸藥殘留

獸藥殘留是對食品動物用藥后，動物產品的任何食用部分中的原型藥物或和其代謝產物，包括與獸藥有關的雜質的殘留。殘留較大的獸藥主要包括：抗生素類、合成抗菌素類、抗寄生蟲類、生長促進劑和殺蟲劑等。抗生素和抗菌素是最主要的獸藥。[2楊守國等建立了一種養殖海水中諾氟沙星、環丙沙星和恩諾沙星3種喹諾酮類抗生素殘留量的高效液相色譜-熒光測定方法。水樣經稀鹽酸調pH后經HLB固相萃取柱富集、凈化，用外標法定量。實驗結果表明，該方法靈敏度高，重現性好，適用于養殖海水中諾氟沙星、環丙沙星和恩諾沙星的檢測。[3]田德金等建立了動物組織中4種苯并咪哇類藥物多殘留檢測的高效液相串聯質譜法。液質聯用儀（LC-MS/Ms）檢測，采用外標法定量，可用于此類藥物在動物組織中殘留量的定性定量檢測。

（3）HPLC法檢測食品微生物及微生物代謝物

食品中含有大量的微生物以及微生物的代謝物，如果食品中的這些代謝物超標，將嚴重影響到人們的食用安全。HPLC法依據不同微生物的化學組成或其產生的代謝產物，可直接分析各種樣品中的各種細菌代謝產物，確定病原微生物的特異性化學組分，從而確定被檢測食品中是否存在微生物超標的情況以及是否威脅到人們的健康等。HPLC主要用于對多組分混合物的分離，這種方法不僅使以往的柱色譜法達到高速化，而且其分離性能大大提高。[4]林裕建立HPLC測定食品儲藏過程中產生的黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2 含量的方法，用熒光檢測器檢測。

三、結語

目前，HPLC技術在食品安全中起著越來越重要的作用，為人們的食品安全帶來了保障。現今科學技術日益更新，HPLC儀器也在不斷地更新發展，并且與各種檢測技術的聯用越來越普遍，包括液相色譜（LC）和質譜儀（MS ）及核磁共振譜儀的集成（LC-MS-NMR）等，大大拓寬了HPLC的應用范圍，提高了檢測水平，在今后HPLC也會有更廣闊的發展空間。

參考文獻：

[1]劉惠敏，施向東等.同時測定食品中維生素B1和維生素B2的高效液相色譜方法[J].廣西農業大學學報1996年01期

[2]楊守國，李兆新，王清印等.高效液相色譜法檢測海水養殖環境中喹諾酮類藥物殘留[J].漁業科學進展，2010年02期

[3]田德金，婁喜山，郭海霞等.超高效液相色譜-串聯質譜法測定動物組織中苯并咪唑類藥物的殘留量[J].食品工業科林，2008，29（9）：277-283.

[4]林裕.高效液相色譜法測定食品中黃曲霉毒素[J].中國熱帶醫學，2006，6（4）：677-679.