中藥方劑腸癰Ⅱ號(hào)中總黃酮的含量測(cè)定

摘要：利用分光光度法測(cè)定腸癰Ⅱ號(hào)中總黃酮的含量。以95%乙醇及各顯色試劑為參比溶液，蘆丁為對(duì)照品，確定最大吸收波長(zhǎng)為508 nm，線性方程為y=0.012 4x—0.006 2（R2=0.999 7），測(cè)定腸癰II號(hào)中總黃酮含量為0.25%。研究結(jié)果為腸癰Ⅱ號(hào)的后續(xù)研究提供基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞：中藥方劑腸癰Ⅱ號(hào)；總黃酮；分光光度法；蘆丁

中圖分類號(hào)：O657.32 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439—8114（2012）19—4364—02

黃酮類化合物是植物的重要次生代謝產(chǎn)物， 也是中藥材的有效成分之一[1]。常用定量方法[2—4]有HPLC法和分光光度法，考慮到方法的簡(jiǎn)便、快捷以及可行性，采用在堿性介質(zhì)中加鋁鹽顯色的分光光度法測(cè)定了中藥方劑腸癰Ⅱ號(hào)中總黃酮的含量。腸癰Ⅱ號(hào)為延安大學(xué)附屬醫(yī)院保密配方，由君藥（敗醬草、二華），臣藥（地丁、丹皮、丹參），佐使藥（制附片、薏米仁、皂刺、木香、穿山甲）等10味藥材構(gòu)成，具有消腫散瘀、排膿解毒之功效，效果甚佳，本研究為腸癰Ⅱ號(hào)的后續(xù)深入研究提供基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 儀器

SY—1000E多用途恒溫超聲提取機(jī)（北京弘祥隆生物技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司）；TU—1810紫外可見(jiàn)分光分度計(jì)（北京普析通用儀器有限公司）；SHB—Ⅲ型循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司）；燒杯（江蘇省泰興市振科儀器廠）；量筒（江蘇省泰興市振科儀器廠）；回流提取裝置（1 000 mL）（西安儀器廠生產(chǎn)）；FZ102微型植物試樣粉碎機(jī)（天津市泰斯特儀器有限公司）；ME2353電子天平（北京賽多利斯儀器有限公司）。

1.2 試劑

蘆丁（中國(guó)藥品生物制品檢定所提供），乙醇、氫氧化鈉、亞硝酸鈉、硝酸鋁（天津市化學(xué)試劑五廠，分析純），中藥方劑腸癰Ⅱ號(hào)藥材（延安大學(xué)附屬醫(yī)院藥劑科提供，經(jīng)黃劍林教授鑒定）。

1.3 測(cè)定方法

1.3.1 最大吸收波長(zhǎng)的確定及標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制[1] 準(zhǔn)確稱取蘆丁5 mg置于25 mL容量瓶中，用95%乙醇定容備用，記為1號(hào)，用吸量管分別吸取0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mL于25 mL容量瓶?jī)?nèi)，記為2、3、4、5、6、7號(hào)，在2～7號(hào)中分別加入0.7 mL 15%亞硝酸鈉溶液，搖勻，放置5 min；再加入7.0 mL 10%硝酸鋁溶液，搖勻，放置10 min；再加入5.0 mL 1 mol/L氫氧化鈉，搖勻，放置5 min，用95%乙醇定容至刻度。取5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品，掃描400～570 nm所對(duì)應(yīng)的吸收波長(zhǎng)，從而確定最大吸收波長(zhǎng)為508 nm，結(jié)果見(jiàn)圖1。固定吸收波長(zhǎng)為508 nm，以2號(hào)為參比溶液分別測(cè)定3～7號(hào)標(biāo)準(zhǔn)溶液吸收波長(zhǎng)，繪制工作曲線，結(jié)果見(jiàn)表1，圖2。

1.3.2 腸癰Ⅱ號(hào)中樣品的含量測(cè)定方法 準(zhǔn)確稱取樣品10 g置于200 mL三角瓶中，加入10倍體積的95%乙醇，超聲提取3次，合并濾液，減壓濃縮至10 mL左右，移入25 mL容量瓶，用95%乙醇定容至刻度，用吸量管吸取3份0.5 mL樣品，分別置于25 mL容量瓶?jī)?nèi)，記為樣1、樣2、樣3，分別加入0.7 mL 5%亞硝酸鈉溶液搖勻，放置5 min；加入7.0 mL 10%硝酸鋁溶液，搖勻，放置10 min；再加入5.0 mL 1 mol/L 氫氧化鈉搖勻，放置5 min，再用95%乙醇定容至刻度，待測(cè)。

總黃酮含量=（比色濃度×1 mL×稀釋倍數(shù)/投樣質(zhì)量）×100%

2 測(cè)定結(jié)果

腸癰Ⅱ號(hào)樣品中的黃酮含量測(cè)定結(jié)果如表2所示，總黃酮含量均為0.25%。

3 小結(jié)

通過(guò)比色法測(cè)定中藥制劑腸癰Ⅱ號(hào)總黃酮的含量，其含量為0.25%，該結(jié)果為其后續(xù)研究與開(kāi)發(fā)提供基礎(chǔ)。

腸癰Ⅱ號(hào)為延安大學(xué)附屬醫(yī)院自主研制的中藥配方，具有很好的療效，但因其開(kāi)發(fā)技術(shù)及設(shè)備局限，未得到很好的利用，今后應(yīng)對(duì)腸癰Ⅱ號(hào)進(jìn)一步深入研究，使腸癰Ⅱ號(hào)充分開(kāi)發(fā)利用，從而造福于人。

參考文獻(xiàn)：

[1] 鄭杭生，李計(jì)萍，韓 煒，等.紫外—可見(jiàn)分光光度法測(cè)定總黃酮含量的方法學(xué)考察要點(diǎn)[J].中成藥，2008，30（9）：1364—1366.

[2] 魏永生，王永寧，石玉平，等.分光光度法測(cè)定總黃酮含量的實(shí)驗(yàn)條件研究[J].青海大學(xué)學(xué)報(bào)，2003，21（30）：61—63.

[3] 丁利君，吳振輝.金銀花中黃酮類物質(zhì)最佳提取工藝的研究[J].食品科學(xué)，2002，23（2）：62—65.

[4] 王 崢，李紹順.百蕊草藥材及其制劑中總黃酮的含量測(cè)定研究[J].中成藥，2007，29（1）：138.