古牛蹄豆莖、葉揮發(fā)油成分GC—MS分析

摘要：利用水蒸氣蒸餾法制備古樹牛蹄豆（Pithecellobium dulce）待測樣品，采用氣質(zhì)聯(lián)用法分析牛蹄豆古樹莖、葉中揮發(fā)油的化學(xué)成分。結(jié)果表明，從葉中分離出36個(gè)峰，占總化學(xué)成分種類的93.377%，從莖中分離出2個(gè)峰，占總化學(xué)成分種類的100.000%。古樹牛蹄豆葉中揮發(fā)性油主要化學(xué)成分為烷烴、雜環(huán)、酯、芳香烴化合物，莖葉中揮發(fā)油物質(zhì)種類相差很大。

關(guān)鍵詞：古牛蹄豆（Pithecellobium dulce）；揮發(fā)油；氣質(zhì)聯(lián)用儀

中圖分類號(hào)：O657.6 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2012）23-5469-03

Analysis of the Chemical Constituents of Volatile Oil from Leaves and Stems of Ancient Pithecellobium dulce by GC-MS

LIU Bing-jing1，2，JIAN Lan2，ZENG Jing1，JIANG Zhi-wei1，LI Chao1

（1.College of Pharmacy，Gannan Medical University / Jiangxi Provincical Key Lab of Cerebrovascular Pharmacology， Ganzhou 341000， Jiangxi， China； 2.College of Chemistry and Chemical Engineering / Key Laboratory of Tropical Medicinal Plant Chemistry of Ministry of Education， Hainan Normal University， Haikou 571158， China）

Abstract： To study the chemical constituents of volatile oils from leaves and stems of ancient Pithecellobium dulce， the analyzing sample was water vapor distillation， the volatile oils of leaves and stems were analyzed and determined by GC-MS. 36 peaks were isolated from the leaves by gas chromatography， the amount of the identified compounds was account for 93.377% and only 2 peaks were isolated from the stems by gas chromatography， the amount of the identified compounds was account for 100.000%. The main chemical constituents are alkanes， heterocyclic， esters， aromatic hydrocarbons compounds，and types of volatile oils from leaves and stems differed largely.

Key words： ancient Pithecellobium dulce；volatile oil； GC-MS

海南屬于熱帶地區(qū)，生長著大量的藥用植物， 其中包含了許多不可多得的熱帶古樹。從20世紀(jì)90年代開始，海南一方面保護(hù)野生中藥材資源，另一方面對(duì)藥用植物進(jìn)行深入的普查和篩選，鼓勵(lì)開展野生中藥材變家種，促使中藥材種植得到迅速發(fā)展。

牛蹄豆（Pithecellobium dulce（Roxb）Benth）隸屬含羞草科（Mimosaceae）猴耳環(huán)屬（Pithecellobium）植物[1]，原產(chǎn)于南美，具有重要的藥用價(jià)值[2，3]，國外學(xué)者對(duì)牛蹄豆進(jìn)行廣泛的化學(xué)成分研究，鑒定出大量三萜[4]和三萜苷[5]類成分。牛蹄豆易被動(dòng)物消化，是熱帶地區(qū)重要的草料樹種，可為牲畜供應(yīng)粗蛋白[6]。此外，通過物理、化學(xué)和生物過程，牛蹄豆還能改良土壤，可用于礦區(qū)土壤恢復(fù)[7]。

國內(nèi)外學(xué)者對(duì)牛蹄豆的主要化學(xué)成分和藥理活性進(jìn)行了大量的報(bào)道，但是其揮發(fā)性成分的研究未見報(bào)道。本研究組在海南師范大學(xué)校園內(nèi)發(fā)現(xiàn)一棵具有85歲高齡的牛蹄豆古樹，由于牛蹄豆是早期從南美引進(jìn)我國，在我國出現(xiàn)如此高齡的古牛蹄豆十分少見，因此對(duì)該古樹的研究具有重要的意義。本研究利用GC-MS技術(shù)分析了牛蹄豆古樹莖、葉揮發(fā)油的化學(xué)成分。為進(jìn)一步研究該古樹的性質(zhì)提供理論依據(jù)，也為珍稀物種的保護(hù)提供參考。

1 材料與方法

1.1 儀器

Agilent7890-5975氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（Agilent公司），旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（日本東京理化公司），水蒸氣蒸餾裝置（上海亞榮生化儀器廠）。

1.2 材料

牛蹄豆采自海南師范大學(xué)南校區(qū)，古樹后繼資源編號(hào)為HX0190。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 牛蹄豆莖葉揮發(fā)油提取和制備 分別稱取牛蹄豆莖500 g、葉350 g分別置于圓底燒瓶中，加入適量去離子水，并用水蒸氣發(fā)生器蒸餾，提取6 h，用乙醚萃取蒸餾液3次，蒸餾乙醚，收集揮發(fā)油，用無水硫酸鈉干燥，適量乙醚溶解，作為揮發(fā)油測定樣品。

1.3.2 GC-MS實(shí)驗(yàn)條件 氣相色譜條件：石英毛細(xì)管柱DB-5MS（30 m ×250 μm ×0.25 μm），程序升溫：從50 ℃開始，以5 ℃/min升到230 ℃，保持51 min，載氣為He（99.99%），柱流量1.0 mL/min，進(jìn)樣口溫度230 ℃，分流比60∶1。

質(zhì)譜條件：電子轟擊（EI）離子源，電離電壓70 eV，離子源溫度230 ℃，掃描范圍40～500 amu，進(jìn)樣量1.0 μL。

2 結(jié)果與分析

經(jīng)過水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油葉得率為0.3%，莖得率為0.1%，葉揮發(fā)油香氣濃郁，具有增濃香氣及襯托花香的功效，留香時(shí)間較長。所得揮發(fā)油各組分的相對(duì)含量以峰面積歸一化法定量，所得結(jié)果列于表1。在葉揮發(fā)油中，共鑒定出36種化合物，占揮發(fā)油總量的93.377%，包括8種烷烴、11種雜環(huán)、4種酯、7種芳香烴、2種醇、2種酮和2種酸類化合物。其中占1.000%以上的成分有14種，相對(duì)含量較高的有1，2-苯二甲酸單（2-乙基己基）酯（14.284%）、吲哚（11.657%）、2，3-苯并二氫呋喃（11.478%）、3-甲基正己烷（6.782%）、吡啶（5.641%）等。莖揮發(fā)油只含有2種成分，1，2-苯二甲酸二丁酯（22.953%）和9-甲基十九烷（77.047%），占揮發(fā)油總量的100.000%。

3 小結(jié)與討論

本研究首次報(bào)道了利用GC-MS技術(shù)分析古樹牛蹄豆莖、葉揮發(fā)性成分。從分析結(jié)果來看， 古樹牛蹄豆葉中可揮發(fā)的化學(xué)成分非常豐富，含有多種烴類、雜環(huán)類、有機(jī)酸、有機(jī)醇或酚和酯類化合物；但古樹牛蹄豆莖中可揮發(fā)的化學(xué)成分很少，僅含有1，2-苯二甲酸二丁酯和9-甲基十九烷這2種成分，這是否與高齡古樹的生理年齡、代謝方式有關(guān)還需進(jìn)一步的研究。依據(jù)這些分析結(jié)果，可為下一步研究該古樹提供可靠的參考數(shù)據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

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（責(zé)任編輯 胡西洲）