氣相色譜法測定丁酸丙酸氫化可的松的殘留溶劑*

劉 霞

(南開大學附屬口腔醫院，天津 300041)

丁酸丙酸氫化可的松是糖皮質激素類藥物，外用有抗炎、抗過敏、止癢及減少滲出的作用，可經皮膚吸收，在皮膚破損處吸收很快，現己收入藥典。本品在化學合成過程中由于使用了乙酸乙酯和氯仿，在質量控制中必須考查該原料藥有機溶劑殘留量問題。筆者參照《中國藥典》2005 版(一部)［1］和有關文獻［2-4］，采用氣相色譜法對這兩種有機溶劑進行測定和驗證，方法簡便，精密度較高，可有效對丁酸丙酸氫化可的松中殘留的有機溶劑進行控制，為藥品質量標準的制定和生產工藝改進提供依據。

1 儀器與試藥

1.1 儀器安捷倫7890 氣相色譜儀，METTLER AE240 分析天平。

1.2 試藥 乙酸乙酯和氯仿均為國產分析純試劑，二甲基亞砜為國產色譜純試劑。丁酸丙酸氫化可的松樣品(湖北恒安藥業有限公司，批號091201、091202、091203)。

2 方法與結果

2.1 色譜條件與系統適用性試驗 色譜柱:DB -624石英毛細管柱(6%氰丙基苯基-94%二甲基聚硅氧烷，30 mm ×0.32 mm，1.8 μm);柱溫:40 ℃保持3 min，以2 ℃/min 的速度升至75 ℃，再以80 ℃/min 的速度升至230 ℃，保持10 min;氣化室:200 ℃;檢測器:FID，250 ℃;載氣:氮氣;分流比:10∶ 1;流速:0.6 ml/min;進樣量:1 μl。

2.2 溶液的制備

2.2.1 對照溶液的制備 精密量取乙酸乙酯1 111 μl(相當于1 000 mg)和氯仿8.2 μl(相當于12 mg)，置200 ml 量瓶中，加二甲基亞砜稀釋至刻度，搖勻，作為對照貯備溶液。精密量取5 ml，置50 ml 量瓶中，用二甲基亞砜稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液。

2.2.2 供試品溶液的制備 取本品約0.5 g，精密稱定，置5 ml 量瓶中，加二甲基亞砜溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

2.3 專屬性試驗 分別精密量取對照溶液和供試品溶液，按上述色譜條件進樣測定，出樣順序為乙酸乙酯、氯仿。兩個成分之間分離度均＞3.0，且理論塔板數均大于10 000，對稱性好，見圖1。

圖1 對照品(A)供試品(B)氣相色譜圖

2.4 標準曲線的建立 精密量取對照貯備溶液0.5、2、3、5、7 和10 ml 分別置于50 ml 量瓶中，加二甲基亞砜稀釋至刻度，搖勻，制成一系列濃度的對照溶液;分別精密量取上述對照溶液1 μl，注入氣相色譜儀，依“2.1”項下方法測定，以對照溶液濃度為橫坐標(X)，對照峰面積為縱坐標(Y)，進行線性回歸。結果顯示乙酸乙酯在50 ～1 000 μg/ml、氯仿在0.6 ～12 μg/ml的范圍內線性關系良好，線性方程分別為Y =7.81 ×10-1X+20.79 (r=0.999 3);Y=6.76 ×10-1X+0.16(r=0.999 6)。

2.5 重現性試驗 精密量取對照溶液5 ml 置50 ml量瓶中，加二甲基亞砜稀釋至刻度，搖勻，配制6 份溶液，各精密量取1 μl，連續進樣，考查重復性。乙酸乙酯和氯仿峰面積的RSD 分別為1.4%和1.8%。

2.6 穩定性試驗 取對照溶液每間隔4 h 進樣，考查溶液的穩定性。經檢驗，對照溶液在24 h 內，各物質的峰面積基本不變，表明24 h 內穩定，乙酸乙酯和氯仿峰面積的RSD 分別為1.8%和0.6%。

2.7 最小檢出限 精密量取對照貯備溶液0.5 ml 置于50 ml 量瓶中，加二甲基亞砜稀釋至刻度，搖勻，再進行逐步稀釋。分別精密量取1 μl 注入氣相色譜儀，乙酸乙酯的最低檢出限為2.5 μg/ml，氯仿的最低檢出限為0.6 μg/ml。

2.8 回收率試驗 精密量取對照貯備溶液0.4、0.5和0.6 ml 各3 份，分別置于已加入0.5 g 樣品的5 ml量瓶中，加二甲基亞砜使溶解并稀釋至刻度，搖勻，制成含對照相當于檢查限度80%、100%及120%的樣品溶液。另取本品約0.5 g，精密稱定，置5 ml 量瓶中，加二甲基亞砜稀釋至刻度，作為回收率測定的空白溶液。同時配制相應濃度的對照溶液。依“2.1”項下方法測定，按外標法計算回收率，結果見表1，乙酸乙酯和氯仿的平均回收率分別為101.6%和102.2%;RSD 分別為1.1%和1.5%。

2.9 樣品中乙酸乙酯、氯仿殘留量的檢查精密量取對照溶液及供試品溶液各1 μl，注入氣相色譜儀，照殘留溶劑測定法［1］，依法測定。按外標法以峰面積計算，含乙酸乙酯和氯仿分別不得超過0.5%和0.006%。實驗結果表明，3 批樣品均未檢出待測殘留溶劑。

表1 乙酸乙酯和氯仿回收率試驗結果(n=9)

3 討論

本次方法學實驗采用直接進樣的方式。二甲基亞砜對樣品溶解良好，因此確定其作為溶劑。由于恒溫實驗分離效果不佳，因此采用程序升溫進行實驗。根據上述項目的驗證，表明本方法具有良好的專屬性、精密度、準確性，驗證范圍內線性關系良好。采用外標法直接進樣，方便快捷，能很好地控制樣品中殘留溶劑的檢測。因此，本法適用于丁酸丙酸氫化可的松殘留溶劑的測定。

1 中國藥典.一部.2005:附錄35

2 趙海橋，付建，劉存領，等.頂空氣相色譜法測定硫酸氫氯吡格雷中有機溶劑殘留量.齊魯藥事，2011，30(8):455

3 逯素珍，戴淑琴，宋敏.氣相色譜法測定葛根素衍生物有機溶劑殘留量.天津藥學，2011，23(4):20

4 張秋菊，裴付軍，郭毅.GC 法測定鹽酸索他洛爾中有機溶劑殘留量.齊魯藥事，2011，30(7):392