不同抗凝劑對血液分析儀測定參數的影響

聶鳳英 焦曉寧

河南省濮陽市中醫院檢驗科，河南濮陽 457000

不同抗凝劑對血液分析儀測定參數的影響

聶鳳英 焦曉寧

河南省濮陽市中醫院檢驗科，河南濮陽 457000

目的 探討乙二胺四乙酸鹽（EDTA－K2）、肝素、枸櫞酸鈉3種抗凝劑對血液各項指標的不同影響。方法2012年2月在本院體檢者中隨機選擇50例為研究對象，分別用3種不同抗凝劑抗凝后，對白細胞（WBC）計數、紅細胞（RBC）計數、血紅蛋白（Hb）、血細胞比容（HCT）、血小板（PLT）及淋巴細胞（LYM）計數等各項參數的檢測結果進行比較、分析和探討。 結果 WBC計數、RBC計數、Hb、HCT、LYM計數此5項參數在3種抗凝劑組間差異無統計學意義（P>0.05）；與EDTA-K2抗凝組相比，使用肝素和枸櫞酸鈉時，PLT計數降低，差異有統計學意義（P<0.01）。結論在血常規的檢測中，使用EDTA-K2、肝素、枸櫞酸鈉不同抗凝劑時，WBC計數、RBC計數、Hb、HCT、LYM計數此5項參數在3種抗凝劑組間無差異；肝素和枸櫞酸鈉使PLT計數降低。

靜脈血；抗凝劑；血細胞參數；血小板（PLT）

血常規檢驗是最常用的檢驗項目之一，對人體健康狀態的評估、疾病診斷有重要的臨床意義。隨著科學技術的發展，全血細胞分析儀以其結果準確率高、采血量少、分析項目多、分析時間短等優點被普遍應用在血常規檢驗中[1]。然而，由于醫療條件因素的限制，目前無論是門診患者還是住院患者的標本都不能及時得到檢查，從而使抗凝劑的使用十分普遍[2]。在血細胞計數中廣泛使用的是國際血液學標準化委員會（ICSH）認定的乙二胺四乙酸鹽（EDTA-K2），但不同的抗凝劑對血液各項指標的影響是不同的[3]。在本次試驗中，筆者采用EDTA-K2、肝素及枸櫞酸鈉3種抗凝劑。選擇了白細胞（WBC）計數、紅細胞（RBC）計數、血紅蛋白（Hb）、血細胞比容（HCT）、血小板（PLT）及淋巴細胞（LYM）計數等各項血細胞參數的檢測結果進行比較、分析和探討。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2012年2月在本院體檢者中隨機選擇50例，采集空腹靜脈血6 mL分別注入EDTA-K2、肝素、枸櫞酸鈉抗凝管中各 2 mL，室溫保存 2 h 后送檢，分別測定 WBC、RBC、Hb、HCT、LYM、PLT各項血細胞參數，平行測定3次，取平均值。

1.2 主要儀器與試劑

XT-1800i血細胞分析儀及其配套試劑（溶血素SYS-FBA、溶血素SYS-SLS、溶血素SYS-4DL、溶血素SYS-4DS）。

1.3 統計學分析

用SPSS 18.0統計軟件包進行分析，各組數值變量資料采用±s表示，組間比較采用配對t檢驗。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

50例標本經軟件分析：WBC計數、RBC計數、Hb、HCT、LYM此5項參數在3種抗凝劑組間差異無統計學意義（P>0.05）；與EDTA-K2抗凝組相比，使用肝素和枸櫞酸鈉時，PLT計數降低，差異有統計學意義（P<0.01）。具體結果見表1。

3 討論

目前三分類的半自動血液分析儀多采用電阻抗法進行血細胞分類和計數，根據血細胞相對非導電性質懸浮在電解質溶液中的細胞顆粒在通過計數小孔時，可引起電阻的變化為基礎，對血細胞進行計數和體積測定[4]。

表1 不同抗凝劑血細胞參數測定結果統計值（±s）

表1 不同抗凝劑血細胞參數測定結果統計值（±s）

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五分類的全自動血液分析儀則采用了多種技術相結合，多種參數共同判定的技術手段，對血細胞特別是WBC的計數和分類的準確性有了很大提高[5]。測WBC時采用了核酸熒光染色技術配合激光流式分析系統，避免了傳統三分類血細胞儀器中，因抗凝劑不同引起PLT的聚集被當成LYM計數，導致PLT下降而引起WBC和LYM比例顯著上升的現象。故在本實驗中不同的抗凝劑對WBC計數幾乎無影響[6]。

RBC計數是一個常規的檢測項目，大多數抗凝劑對RBC形態影響都有限，不同抗凝劑對紅系結果影響不大（P>0.05），故在檢測血氣分析、血液黏度或其他實驗中，需同時測RBC及HCT時，可以用肝素或枸櫞酸鈉抗凝[7]。任何類型、檔次的全血細胞分析儀，Hb測定原理都是相同的，即溶解RBC，釋放Hb進行測試。本研究也證實，不同的抗凝劑對Hb的檢測值之間的差異無統計學意義。

目前廣泛使用的抗凝劑是ICSH認定的EDTA-K2為血細胞分析檢測的抗凝劑。它能有效結合血液中的鈣離子，通過膜離子通道進入PLT膜內。由于它螯合作用要比枸櫞酸鈉絡合鈣離子作用強，能更好地防止血液中PLT因各種因素而發生凝集，對PLT計數影響較小，有較好的穩定性。

肝素抗凝主要是抑制凝血活酶與凝血酶形成，并激活纖溶酶而發揮作用。肝素能引起PLT聚集及腫脹，過量的肝素可導致PLT破壞，對PLT計數影響最大[8]。聚集的PLT通過微孔，由于體積較大，不易被識別，因此與EDTA抗凝劑比較，用肝素和枸櫞酸鈉抗凝時，PLY計數減少，差異有統計學意義（P<0.05）。

枸櫞酸鈉呈堿性，可與Ca形成可溶性螯合物，其抗凝性弱，易使PLT聚集而致總數減少，差異有統計學意義（P<0.05）。

綜上所述，EDTA可使離體后的PLT離散，抑制PLT聚集，使之成為一個顆粒或細胞通過微孔，而肝素和枸櫞酸鈉均無此作用。五分類血液分析儀檢測PLT時，應用鞘流電阻抗原理：當PLT體積大或聚集成較大顆粒通過微孔時，儀器只識別顆粒大小而不能識別顆粒性質，被誤認為LMY計數，某些PLT也會被誤認為小紅細胞而不納入PLT計數范圍，使PLT假性減低。本實驗結果顯示，EDTA-K2抗凝血的PLT及其參數的值分別高于其他兩種抗凝血，差異有統計學意義（P<0.01）。

[1]劉紅軍.藥物治療肝硬化對抗凝血測定白細胞總數及形態的影響[J].中國當代醫藥，2010，17（34）：82.

[2]孫楊.抗凝劑EDTA致PLT假性減少[J].檢驗醫學與臨床，2008，5（8）：504.

[3]鄒鴻燕.抗凝劑對血液檢驗結果的影響[J].中外健康文摘，2012，9（4）：41-42.

[4]吳曉蔓.臨床檢驗基礎與臨床實驗指導[M].北京：人民衛生出版社，2007：23-26.

[5]葉應撫，王毓三.全國臨床檢驗操作規程[M].南京：東南大學出版社，1991：65-68.

[6]方蓉，黃宇烽，鄭均，等.抗凝劑濃度不同血液的血細胞計數儀分析結果[J].臨床檢驗雜志，2001，19（2）：105-106.

[7]許德英，常永超，張淑珍，等.4種抗凝劑對血液分析儀計數結果的影響[J].洛陽醫專學報，2001，19（2）：156-157.

[8]馬雨東.血細胞分析儀測定血小板時抗凝劑等影響因素分析[J].檢驗醫學與臨床，2010，7（11）：189-191.

The influnce of different anticoagulants on blood analyzer determine parameters

NIE Fengying JIAO Xiaoning
Department of Clinical Laboratory,Hospital of Traditional Chinese Medicine in Puyang City,He′nan Province,Puyang 457000,China

Objective To explore the different influence of three anticoagulant agent of EDTA-K2,heparin,folic acid sodium to the index of blood.Methods Fifty cases with medical examination in our hospital from February 2012 were randomly chosen as the research object.The parameters testing results of white blood cells(WBC)counting,red blood cell count(RBC),hemoglobin(Hb),red blood cell deposited(HCT),platelet(PLT)and lymph cells(LYM)count,and so on,were compared,analyzed and discussed after administration of three different anticoagulants,respectively.Results The differences of five parameters of WBC count,RBC count,Hb,HCT,LYM count between three anticoagulant agent groups were not statistically significant(P>0.05);and compared with EDTA-K2anticoagulant group,PLT count reduced,the difference was statistically significant(P<0.01)with the use of heparin and folic acid sodium.Conclusion In the blood detection,WBC count,RBC count,Hb,HCT,LYM count between the three kinds of anticoagulant EDTA-K2,heparin,sodium citrate has no difference;PLT count decreases in heparin and sodium citrate.

Venous blood;Anticoagulants;Blood cells parameters;Platelet(PLT)

R446.11

A

1674-4721（2012）08（b）-0140-02

2012-05-04 本文編輯：郭靜娟）