鼻咽癌患者EB病毒檢測的臨床意義

陳瑜萍，阮輝，肖志勇

（1.福建省福州市第二醫院耳鼻喉科，福建 福州 350007；2.福建省福州市第二醫院檢驗科）

鼻咽癌在我國東南地區是一種常見惡性腫瘤，其發生被證實與EB病毒感染密切相關。EB病毒（epstein－barr virus，EBV）是一種γ皰疹病毒，目前已有令人信服的證據支持EB病毒是鼻咽癌重要的致病因子，肯定參與鼻咽癌的多階段、多因素發生過程［1］。被病毒感染的細胞具有EBV的基因組，并可產生各種抗原及相應的抗體。對EB病毒各種抗原抗體及EBV－DNA檢測一直是鼻咽癌篩查、輔助診斷和監測病情變化的主要生物學方法［2］。本研究旨在對確診為鼻咽癌患者放療前后血漿中EBVVCA－IgA、EBV－EA－IgA、EBV－DNA的檢測結果進行對比，從而對鼻咽癌放療后的療效及預后判斷進行探討。

1 資料和方法

1.1 臨床資料

我科自1998年至2010年收集鼻咽癌患者76例，均經病理診斷為低分化鱗癌，其中男性47例，女性29例，年齡18－73歲。

1.2 試劑和儀器

VCA－IgA酶聯免疫吸附法（ELISA）檢測試劑盒（北京貝爾生物工程有限公司）；EA－IgA酶聯免疫吸附法檢測試劑盒（德國IBL International GMBH公司）；EB病毒核酸擴增聚合酶鏈反應（PCR）熒光檢測試劑盒（中山大學達安基因股份有限公司）；EL－808半自動酶標測試儀；德國Roche LightCybler實時熒光定量基因擴增系統。

1.3 方法

放療前均通過酶聯免疫吸附法檢測患者血清VCA－IgA和 EA－IgA，PCR法（FQ－PCR）定量檢測患者血漿中EBV－DNA，實驗操作均按試劑盒要求。并進行電子鼻咽鏡檢查，鼻咽部CT掃描（包括顱底骨質和全頸部），胸部X光片，腹部B超檢查。放療總劑量一般為7 000cGy，每周5次，每次200cGy，分7周完成。如診斷為N2期及以上淋巴結轉移，則同步行化療。放化療后3個月復查上述實驗室指標及一系列影像學檢查，比較放療前后EBV－VCAIgA、EBV－EA－IgA 和 EBV－DNA 的變化及與臨床情況對比。

2 結果

根治性治療后3個月復查 EBV－VCA－IgA、EBV－EA－IgA和EBV－DNA結果如表1。76例中，放療前VCA－IgA陽性71例，陰性5例；治療后陽性69例，陰性7例。EB－EA－IgA放療前陽性68例，陰性8例；治療后陽性者64例，陰性12例。以上兩種指標治療前后陽性率變化經統計學檢驗無明顯顯著差異（P＞0.05），但兩種指標陽性抗體滴度都較治療前有明顯下降。放療前EBV－DNA檢測陽性者60例，陰性者16例；治療后陽性者11例，陰性者65例。治療后陽性率明顯下降，經統計學檢驗差異有顯著意義（P＜0.01）。11例檢出陽性者中2例證實為遠處轉移，8例為臨床復發，故其腫瘤進展陽性預測值為90.9%，其中10例腫瘤進展者EBV－DNA水平在放療前就高于其他患者。在65例陰性患者中，共有3例遠處轉移，8例復發，故陰性預測值為83.1%。64例患者血漿EBV DNA水平與臨床結果相符，故準確率為84.2%。

表1 鼻咽癌患者放化療前后EB－VCA－IgA，EB－EA－IgA及EBV－DNA檢測結果（例）

3 討論

EB病毒與鼻咽癌的發生、發展密切相關，EB病毒感染人體，在裂解期病毒基因完全表達，細胞主要合成早期細胞內抗原（early intracellular antigen，EA）、衣殼抗原（EB virus capsid antigen，VCA）等。大量文獻報道，聯合檢測EBV－VCA－IgA、EBV－EAIgA抗體水平對鼻咽癌具有診斷意義［3］。EB病毒僅能在B淋巴細胞中增殖，以環狀DNA形式游離在胞漿中，并整合于染色體內。隨著PCR技術的推廣，血漿中EBV－DNA水平檢測也廣泛運用于鼻咽癌早期診斷、預后判斷、療效監測和臨床分期等。本研究通過檢測上述3項指標，檢測結果進行對比，從而對鼻咽癌放療后的療效及預后判斷進行探討。

從結果觀察到，放療前后 EBV－VCA－IgA、EBV－EA－IgA陽性率變化無明顯差異，提示此兩項陽性率指標對療效觀察不敏感，可能是由于兩種抗體在人體內的半衰期較長，即使體內EBV清除后，仍有較長時間維持在較高濃度，因此發生質變即轉陰仍不明顯。但其陽性抗體滴度較治療前有較明顯下降，此與曾希等［4］的研究結果相似。可間接提示，隨著治療進行與病灶的縮小，EB病毒EBV－VCAIgA、EBV－EA－IgA抗體滴度逐漸下降，有著量變的過程，也間接提示 EB病毒 EBV－VCA－IgA、EBVEA－IgA與治療過程呈一定相關性。

從結果觀察到，EBV－DNA治療前后陽性率有明顯變化，提示該指標對療效觀察敏感。本實驗中，經過治療，EBV－DNA陽性率由78.9%轉為14.5%，迅速轉陰，提示隨著治療腫瘤縮小及清除，EB病毒也隨之清除，體現在EBV－DNA水平迅速下降轉陰，故EBV－DNA對監測鼻咽癌放療后療效存在價值。64例患者血漿EBV－DNA水平與臨床結果相符，準確率為84.2%，提示其不失為一個判斷療效及腫瘤進展情況較可靠的指標。11例放療后陽性患者中被證實為復發及轉移者10例，腫瘤進展陽性預測值為90.9%，故放療后仍為陽性者提示腫瘤進展可能性極大，預后不良。應該進行更全面的臨床和影像學檢查，可縮短隨訪的間隔時間，進行更加密切的隨訪。65例陰性患者中有11例腫瘤進展，陰性預測值為83.1%，提示放療后轉陰患者仍有腫瘤復發及進展的可能，仍需定期隨訪，以防止漏診。

鼻咽癌臨床分期是影響其預后的主要因素，鼻咽癌患者血清中EB病毒分子水平與腫瘤的分期和臨床進展有明顯相關性［5］。通過檢測治療前后EBV－DNA水平發現，預后越差者其EBV－DNA水平越高。本研究也進一步證實了鼻咽癌患者血漿EBV－DNA可以準確反應腫瘤負荷［6］，并隨著腫瘤的清除而迅速下降至檢測極限值以下［7］。因此，從理論上講鼻咽癌治療后血漿中檢測出EBV－DNA提示腫瘤復發或遠處轉移，本次研究結果與此相符。

總之，鼻咽癌放療后患者血漿EBV－DNA是監測腫瘤進展的有效方法，有利于早期診斷復發和轉移，并采取臨床干預措施。

［1］潘孝彰.新發傳染?。跰］.北京：人民衛生出版社，2004：59－61.

［2］季明芳，郭媛卿，梁錦勝，等.鼻咽癌患者發病前后EB病毒VCA／IgA和EA／IgA滴度動態分析［J］.中華腫瘤雜志，2003，25（3）：243－245.

［3］陳云，劉根焰，姚堃，等.定量檢測EB病毒 VCA－IgA和 EAIgA抗體對EB病毒相關鼻咽癌的診斷意義［J］.南京醫科大學學報（自然科學版），2009，29（12）：1638－1642.

［4］曾希，曾穎，王承龍.33例鼻咽癌患者治療前后血清EB病毒VCA－IgA跟蹤分析［J］.南華大學學報：醫學版，2010，38（1）：62－64.

［5］胡春卉，李山.EB病毒診斷方法研究進展［J］.腫瘤學雜志，2010，16（1）：78－80.

［6］Lin JC，Wang WY，Chen KY，et al.Quantification of plasma Epstein－Barr virus DNA in patients with advanced nasopharyngeal Carcimoma［J］.N Engl 1Jmed，2004，350（24）：2461－2470.

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