跌打消腫止痛靈的皮膚用藥安全性研究

呂 鵬 何巧玲 羅 秀 陳兆霓 焦 楊 黃仁彬 張士軍*

（廣西南寧醫科大學，廣西 南寧 530021）

跌打消腫止痛靈是扁藤、骨碎補、田七、血竭、大羅傘組成的復方酊劑，有舒筋活絡、消腫止痛、活血化淤的功效，民間使用對跌打損傷、腰腿痛、風濕痛、軟組織損傷等有極好的療效。本課題組前期研究發現跌打消腫止痛靈經口服給藥具有良好的抗炎鎮痛作用，但是口服給藥在肝臟中存在“首過效應 ”，也容易在胃腸道中受到破壞[1]。為了延長跌打消腫止痛靈有效作用時間，減少作用次數，避免肝臟的和胃腸道的破壞，減少胃腸給藥的副作用，本課題組考慮采用皮膚用藥、皮膚用藥與口服給藥聯合等不同給藥途徑來維持跌打消腫止痛靈恒定的最佳血藥濃度或生理效應。為了確保跌打消腫止痛靈臨床皮膚用藥的安全性，本次試驗進行了跌打消腫止痛靈皮膚用藥的毒性試驗研究，從而為跌打消腫止痛靈的開發和臨床應用提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 動物

健康白色豚鼠，雌雄各半，普通級，體質量（250±20）g，由廣西醫科大學實驗動物中心提供。試驗動物生產許可證 SCXK（桂）2003-0003，試驗動物使用許可證 SYXK（桂）2003 -0005。常規兔飼料喂養，自由飲水。

1.2 試驗藥物及試劑

跌打消腫止痛靈：由本實驗室自行提取配制；2，4-二硝基氯苯（sigma公司，批號：Lot# MKAA0924V）。

1.3 方法

1.3.1 皮膚急性毒性試驗[2]

取白色豚鼠50只，雌雄各半，于給藥前24h，將背部脊柱兩側剃毛，去毛面積約40cm2，去毛后24h檢查去毛皮膚是否因去毛而受傷，受傷的皮膚不宜做完好皮膚的毒性試驗。破損皮膚的制作：采用400#細砂紙在豚鼠脫毛區皮膚上擦傷，以滲血為度。將剃毛豚鼠分為5組：空白對照組，完整皮膚高、低劑量組（16，4mL/kg），破損皮膚高、低劑量組（16，4mL/kg），每組10只，給藥體積 4mL，空白對照組給予等體積蒸餾水，采用多次重復皮膚給藥，將受試藥物均勻涂于脫毛區，每只動物分籠飼養。給受試藥物24h后，用溫水洗去殘留受試藥物，去除受試藥物后1、24、48、72h至第7日，每日觀察并記錄動物體質量、皮膚毛發、眼和結膜的變化、呼吸、中樞神經系統、四肢活動等及其他中毒表現，若遇有死亡動物，應及時進行尸檢和肉眼觀察，當有肉眼可見病變時，應進行病例組織學檢查。

1.3.2 皮膚刺激性試驗[2]

取白色豚鼠20只，雌雄各半，去毛及破損皮膚制作同上。試驗采用同體左右側自身對比，分完整皮膚組和破損皮膚組，每組10只，左側去毛區涂受試藥物1mL，右側涂蒸餾水1mL作為對照。每只動物分籠飼養，給受試藥物24h后，用溫水洗去殘留受試藥物，去除受試藥物后1、24、48、72h觀察并記錄涂抹部位有無紅斑和水腫等情況，按《皮膚刺激性反應評分標準》[2]進行評分，計算各組動物反應平均分值。根據《皮膚刺激性強度評價標準》[2]對皮膚刺激性強度進行評價。

1.3.3 多次給藥皮膚刺激性試驗[2]

取白色豚鼠20只，分組及給藥同上，連續涂藥7d，停藥后再觀察7d，每日觀察并記錄紅斑及水腫情況并評分，并觀察涂抹部位是否有色素沉著、出血點、皮膚粗糙或皮膚菲薄等情況。

1.3.4 皮膚過敏試驗[2]

白色豚鼠30只，雌雄各半，于給受試藥物24h前將背部兩側剃毛，去毛區范圍每側約3cm×3cm。將豚鼠按性別隨機分為3組：空白對照組、受試藥物組及陽性對照組，每組10只。受試藥物組給予跌打消腫止痛靈0.1mL，空白對照組給予等體積蒸餾水，陽性對照組給予等體積1% 2，4-二硝基氯苯。①致敏接觸：受試藥物組取跌打消腫止痛靈0.1mL，均勻涂于左側脫毛區，涂好后動物分籠飼養，于第7天和第14天以同樣的方式重復1次，共計3次。空白對照組與陽性對照組方法同上。②激發接觸：于末次給藥后14 d，將相應藥物0.1 ml涂于豚鼠背部右側脫毛區，陽性對照用0.1 % 2，4-二硝基氯苯，6h后去掉受試藥物，即刻觀察，然后于24、48、72h再次觀察皮膚過敏反應情況。按《皮膚過敏反應程度的評分標準》[2]進行評分，計算各組動物反應平均分值。同時注意觀察動物是否有哮喘、站立不穩或休克等嚴重的全身變態反應。根據《皮膚致敏性評價標準》[2]按致敏發生率推斷致敏性。

1.3.5 統計學處理

2 結 果

2.1 跌打消腫止痛靈的皮膚急性毒性試驗

跌打消腫止痛靈在低劑量和高劑量用藥時對完整皮膚豚鼠與破損皮膚豚鼠的行為、活動、飲食、皮毛光澤、眼和結膜、呼吸，體質量等均無任何影響，涂抹部位無紅斑和水腫現象，先后觀察7天內無豚鼠死亡，未出現任何急性毒性反應。與空白對照組比較完整皮膚組和±s，n=10 ）破損皮膚組的豚鼠體質量增加差異不顯著（P＞0.05）。結果表明，跌打消腫止痛靈經皮膚給藥無急性毒性反應，安全度較大。見表1。

表1 跌打消腫止痛靈皮膚急性毒性試驗對豚鼠體質量的影響 （χ—

表2 跌打消腫止痛靈對豚鼠皮膚刺激試驗（n=10 ）

表3 跌打消腫止痛靈對豚鼠皮膚致敏性試驗 （ n=10 ）

2.2 跌打消腫止痛靈的皮膚刺激性試驗

用溫水洗去殘留受試藥物后1、24、48、72h觀察涂抹部位，個別豚鼠有勉強可見紅斑，各組豚鼠均未見水腫情況。連續給藥 1周后，觀察發現個別豚鼠有勉強可見的紅斑，能夠很快自行消失，其余豚鼠未見水腫、色素沉著、出血點、皮膚粗糙或皮膚菲薄等情況。皮膚刺激程度平均反應分值均＜0.49，為無刺激性。結果表明，跌打消腫止痛靈對皮膚無刺激性。見表2。

2.3 跌打消腫止痛靈的皮膚過敏反應試驗

受試藥物組和空白對照組于0、24、48、72h觀察未見紅斑、水腫等皮膚變態反應情況；陽性對照組出現明顯的紅斑、水腫等皮膚致敏反應情況，平均分值較高，致敏率達到100%。各組豚鼠均未出現哮喘、站立不穩或休克等嚴重的全身變態反應。結果表明，跌打消腫止痛靈對皮膚無致敏性。見表3。

3 討 論

口服給藥是最常用的給藥途徑，藥物經過消化道，主要通過小腸進行吸收。藥物吸收后通過門靜脈進入肝臟，有些藥物進入肝臟后發生首過效應，從而減少了進入體循環的藥量。雖然口服用藥方便快捷，但是其吸收慢，欠完全，對在胃腸破壞的、胃腸刺激大的、首關消除多的藥物不適宜性的缺點也是顯而易見的[1]。皮膚給藥則避免了首關消除的缺點，用藥方便。藥物通過皮膚，進入體內循環，還能夠促進神經體液調節，改善各組織器官的免疫功能等，增強自身抗病修復能力[3]。

對于跌打損傷、腰腿痛、風濕痛、軟組織損傷等，通過皮膚途徑給藥，能夠更快捷的到達病灶，進入體內循環發揮藥效，保持較長時間的生理效應。皮膚途徑中的皮膚毒性、刺激性、致敏性是皮膚用藥安全性的重要保證。跌打消腫止痛靈是本課題組依托廣西特色中草藥材料，根據民間用藥經驗，提取配制的復方酊劑，其中扁藤祛風燥濕；骨碎補補腎強骨，續傷止痛；田七止血抗炎、活血化瘀，能夠擴張血管，改善微循環，增強機體免疫功能；血竭活血散瘀，止血生肌；大羅傘活血化瘀、消腫解毒。采用酊劑可以增加活血功效，有利于藥物吸收與藥效發揮。為研究其抗炎鎮痛的作用及其機制，首先必須確定跌打消腫止痛靈的皮膚用藥安全性。本課題組通過試驗研究發現跌打消腫止痛靈具有良好的皮膚用藥安全性，對皮膚無不良反應，下一步本課題組將通過不同的炎癥模型，進一步研究確定其通過皮膚給藥發揮藥效的作用機理，發揮藥物最大功效，以期望能夠開發出一種新的有效的抗炎鎮痛外用制劑，為臨床用藥提供試驗依據，為廣西地區特色中草藥開發研究利用奠定基礎。

[1]金有豫.藥理學[M].北京:人民衛生出版社,2001:18.

[2]中華人民共和國衛生部藥政管理局.中藥新藥研究指南[S].1995:209-212.

[3]陳文貴.對中藥皮膚給藥途徑的探討[J].黑龍江中醫藥,1995,4(1):41-44.