姜 波 周 萌 王 濤
(1.山東省濟南市畜產品質量安全監測中心,濟南 250002;2.山東省濟南市畜產品質量安全監測中心,濟南 250002;3.山東省濟南市動物衛生監督所,濟南 250002)
畜產品質量安全已成為我國乃至世界共同關注的話題。如何控制藥物殘留,確保畜產品質量安全,保證人們吃到“放心肉”,監督和檢測環節至關重要。畜產品質量安全包括“肉、蛋、奶”等多方面,其中“瘦肉精”的添加使用備受關注。國家對“瘦肉精”的控制使用、監督檢查和檢測方面都投入了大量人力、物力。監督檢測部門需要更科學、高效、準確的檢測方法來監督監測藥物殘留。下面介紹3種最常見的“瘦肉精”及其快速檢測方法。
“瘦肉精”包括很多種,一般最常見、最常添加的“瘦肉精”主要包括鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺和沙丁胺醇3種,它們是一種人工合成的β-腎上腺素能興奮劑,具有擴張支氣管的作用。當其應用劑量達到治療量的5~10倍時,又具有能量重分配作用,可使肌肉合成增加,脂肪沉淀減少。因此,將其俗稱為“瘦肉精”。在畜牧業生產過程中,一些非法使用者將其作為一種生長促進劑添加到動物飼料中,用以改善酮體的品質,同時也造成食物中“瘦肉精”的殘留。當人們食用含有這些殘留的產品后,會出現心動過速,低血鉀,低磷酸鹽血癥,肌肉震顫,頭暈,口干,失眠等癥狀,嚴重的會出現癱瘓。
快速檢測試紙分別是用鹽酸克倫特羅單克隆抗體、萊克多巴胺單克隆抗體和沙丁胺醇單克隆抗體為基礎,根據現代免疫學技術設計組裝。待測尿樣在層析過程中,樣品中的“瘦肉精”與NC膜上的檢測線(T線)上“瘦肉精”——蛋白偶聯復合物共同競爭金標特異性抗體。以試紙上T線的顏色變化與質控線(C線)比較判定樣品中的“瘦肉精”含量。
試紙條是一種快速篩選檢測的方法,能快速檢測出動物尿液中鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺和沙丁胺醇,對監督檢查“瘦肉精”工作提供了便利條件。為防止“瘦肉精”的非法使用,保證食品安全提供了一種高效的檢測手段。
2.3.1 檢測步驟
(1)取出所需試紙置于平面,并與樣品對應編號;
(2)在試紙加樣孔中加入100μL或3滴待檢樣品,開始記時;(3)5 min內觀察記錄結果,10 min以內判斷結果。
2.3.2 結果判定
(1)T線和C線都出現棕紅色條帶,結果為陰性,樣品中“瘦肉精”的含量小于其對應的檢測靈敏度。
(2)T線不出現棕紅色條帶,C線出現一條棕紅色條帶,結果為陽性,樣品中“瘦肉精”的含量大于或等于其對應的檢測靈敏度,其陽性結果可用酶聯免疫法進行進一步測定。
(3)若T線和C線都沒有出現棕紅色條帶,說明操作不當或者是檢測試紙失效。
注:鹽酸克倫特羅的檢測靈敏度:3 ng/ml(ppb);萊克多巴胺的檢測靈敏度:8 ng/ml(ppb);沙丁胺醇的檢測靈敏度:10 ng/ml(ppb)。
結果如圖所示:

(1)由于動物尿樣樣品的個體差異,受年齡、品種、性別和養殖環境的影響,抽取動物尿液樣品有差異,在檢測過程中,可能會影響檢測線顏色偏淡,一般并不影響結果的判斷,只要檢測線出現條帶,不論深淺,就可以判定為陰性。
(2)澄清的動物尿樣樣品不需要特殊的處理,可以直接用于檢測;如果尿樣中污染有雜物或呈渾濁狀時必須經離心或者過濾后再用于檢測,嚴重污染或渾濁者不可用于檢測。
(3)檢測時,檢測溫度、濕度和檢測時間都會對實驗結果有所影響。試驗過程中,環境的溫度盡量控制在20℃左右進行;試紙條從拆封到檢測,時間盡量控制在每個樣品10 min之內,以保證試紙條不受潮,減少對檢測結果的影響因素。快速檢測試紙條一般存放溫度控制在4~30℃之內,密封、干燥、避光存放,嚴防受潮。
(4)如果動物尿液樣品為冷凍狀態,應使其化凍回溫再進行檢測,以免影響檢測結果,必須保證尿液樣品在常溫之內。
(5)尿液樣品吸管不可混用,以免交叉感染;如果尿樣中污染有雜物或呈渾濁狀時要經離心或者過濾后再用于檢測,嚴重污染或渾濁者不可用于檢測。
(6)由于各種原因,動物尿樣樣品檢測時有可能會出現假陽性,對可疑樣品或陽性樣品,可重復實驗(每支試紙只能使用1次),也可用酶聯免疫法做進一步確定。實驗后的廢棄物要妥善處理。
動物尿液中“瘦肉精”快速檢測的優勢是動物尿樣不需要特殊處理,可直接用于檢測,監督檢查人員和檢測人員可進行現場檢測,快速高效判斷結果,節省大量人力、物力,提高了工作效率。但由于是快速檢測,其結果受溫度、濕度等環境和其他影響較多,若出現陽性或假陽性結果,還需做進一步實驗確定。