納洛酮對心肺復蘇后大鼠血漿內皮素水平的影響

中國醫科大學附屬盛京醫院ICU室（沈陽110004）

高琳琳 李國福 臧 彬

心肺復蘇（Car diopul monar y resuscitation，CPR）是全身缺血-再灌注損傷的過程，在此期間機體可發生一系列病理生理變化，血漿中多種細胞因子發生改變，對心肺復蘇后臟器功能損傷可能起著重要作用。本實驗通過觀察納洛酮對大鼠心肺復蘇后血漿中內皮素（Endot helin，ET）水平的影響，探討其在心肺復蘇過程中的作用。

材料與方法

1 動物與分組 Wistar雄性大鼠75只，體重200～260 g，由中國醫科大學附屬盛京醫院動物實驗室提供。實驗前禁食12h，不禁水，隨機分為3組：對照組（C組）僅經動、靜脈穿刺置管，不進行窒息性循環停止；腎上腺素組（E組）；納洛酮組（N組），每組25只。

2 麻醉方法 大鼠吸入異氟醚麻醉誘導，氣管插管后機械通氣，控制呼氣末二氧化碳分壓（PETCO2）在35～45 mm Hg，異氟醚吸入維持麻醉（濃度1.5%～2.0%），加熱燈照射控制鼓膜溫度在37±0.5℃。監測記錄平均動脈壓（MAP）、心率（HR）、心電圖（ECG）和體溫。

3 窒息性模型建立及給藥 一側頸內靜脈置管以備給藥及采集血樣，置管結束后，注入肝素50 U／100g抗凝和維庫溴銨0.02 mg／100g維持肌松。一側股動脈置管，接壓力傳感器監測MAP。參照文獻［1］的方法制作大鼠心肺復蘇模型。機械通氣15 min時，斷開呼吸機夾畢氣管導管致窒息，在窒息前5 min，注入維庫溴銨0.01 mg／100g防止窒息時自主呼吸恢復。窒息前1 min采集動脈血1 ml／100g與肝素50 U／100g、腎上腺素4μg／100g（E組）或腎上腺素4μg／100g+納洛酮0.1 mg／100g（N組）混合制成“復蘇合劑”。自主循環停止以心電機械分離或心電活動消失，MA P＜10 mm Hg為標準。持續10 min后進行復蘇，開放氣道機械通氣，由頸內靜脈注入“復蘇合劑”。出現規律自主心率且 MAP＞60 mm Hg、HR＞300次／min為自主循環恢復。

4 測定方法 窒息前、復蘇后30、60、120、180 min時點取靜脈血注入含有10%依地酸二鈉（Na2EDTA）和抑肽酶的抗凝試管中混勻，于4℃3 000轉／min離心10 min，分離出血漿-20℃保存待測ET。采用放射免疫法，試劑盒由解放軍總醫院東亞免疫技術研究所提供。因復蘇失敗而死亡等因素的影響，最后每組有8只動物入選。

5 統計學處理 本組采用SPSS11.5軟件進行統計分析，計量資料以均數±標準差（±s），三組間、組內比較采用單因素方差分析，兩組間比較采用成組t檢驗，以P＜0.05為有顯著性差異，P＜0.01為有極顯著性差異。

結 果

復蘇前各組血漿ET基礎值比較無顯著性差異（P＞0.05），復蘇后各時點E組、N組各組復蘇前、后大鼠血漿ET水平比較見附表，血漿ET值明顯高于基礎值（P＜0.05），且E組血漿ET值隨時間進行性增加；復蘇后120 min、180 min，N組血漿ET值明顯低于E組（P＜0.05）。

附表 復蘇前、后各組大鼠血漿ET水平的比較（±s，ng／L）

附表 復蘇前、后各組大鼠血漿ET水平的比較（±s，ng／L）

注：＊與基礎值比較，P＜0.05；＃ 與E組比較，P＜0.05

E組 8 79.1±10.7 100.7±11.1＊ 127.5±24.6＊ 154.6±19.6＊ 170.5±19.2＊N組 8 85.6±12.4 104.5±20.6＊ 136.8±19.1＊ 126.1±13.1＊＃ 106.3±21.8＊＃

討 論

本研究采用窒息致心肺復蘇大鼠模型簡單易行，可靠性較高［1，2］。近年來，國內外心肺復蘇的研究多采用窒息致心肺復蘇大鼠模型。研究結果表明腎上腺素和納洛酮混合的復蘇合劑對復蘇效力無明顯不良影響［1］，Chen等［3］的研究推薦心肺復蘇中納洛酮的適宜劑量為0.1 mg／100g，本研究中腎上腺素和納洛酮的劑量分別為0.4 mg／kg和0.1 mg／100g。

心跳驟停復蘇的過程是機體缺血再灌注的過程［4］。ET是迄今發現的最強的內源性縮血管物質之一，幾乎可引起各種血管收縮。心跳驟停復蘇時，重要臟器的低灌注狀態和一系列應激反應可引起血管內皮細胞損傷，促使ET分泌增加。ET可增加心臟、腎臟、大腦等重要生命器官的灌注壓并提高機體對外源性縮血管物質的反應，對復蘇早期維持血管緊張性等一系列生理功能具有重要的積極意義。

ET可刺激花生四烯酸產生并伴有自由基產生，自由基可破壞生物膜，使膜穩定性、通透性改變。ET持續增高且機體對其反應性增強，對重要器官將造成進一步損傷，可導致腦組織和心肌損傷加重，直接影響復蘇患者的預后。腦部微血管有很強的ET合成能力并對ET具有高度的敏感性，ET能夠通過興奮性氨基酸的釋放和Ca2+內流等途徑，導致腦血管痙攣，造成腦缺血缺氧［5］，在大腦中ET的增加可能與CPR后腦循環衰竭有關［6］。動物實驗表明ET對心肌有短暫的正性肌力而隨后出現持續的負性肌力、負性頻率作用［7］。持續增高的ET對機體的心輸出量亦無益處，ET通過收縮冠脈增加冠脈的灌注壓，并不增加心肌血流量，不能提高復蘇的成功率［8］。在復蘇過程中有效地調控ET水平，可能對減輕復蘇后腦功能和心功能的損傷起到重要作用。

納洛酮是一種特異性的阿片受體拮抗劑，同時具有清除自由基、改善細胞代謝、穩定生物膜的作用，可對抗缺血再灌注損傷用于心跳驟停復蘇后治療。本研究發現，復蘇后大鼠血漿ET水平高于基礎值，呈明顯上升趨勢，與以往的研究結果相一致；復蘇后120、180 min納洛酮組ET水平明顯低于腎上腺素組。說明納洛酮可降低缺血再灌注損傷時血漿ET水平，使ET的合成與釋放較為平穩，從而減輕ET對血管內皮細胞的損傷作用，使組織的灌注供氧得到改善，對各臟器起到保護作用。其機制可能為心跳驟停引起β-內啡肽（β-EP）大量釋放，納洛酮通過與阿片受體競爭性結合，阻斷了β-EP與阿片受體的結合，從而阻斷了內源性阿片肽（EOP）系統，而中樞的EOP與ET系統存在互相調節的作用，腦脊液中的β-EP平行調整鼠尾狀核中ET水平和ET-A受體［9］。另外，納洛酮還可抑制花生四烯酸代謝、刺激SOD生成，削弱TXA2-ET惡性循環及抑制血小板聚集、抗凝，并且直接作用于細胞膜減少細胞外Ca2+跨膜內流，而ETmRNA合成是一個Ca2+誘導過程［10］。因此納洛酮可降低復蘇后血漿ET水平，對復蘇后腦功能和心功能的恢復起到一定作用。

綜上所述，復蘇后ET水平的急劇升高是機體的應激過程和代償反應，在復蘇過程中應用納洛酮可有效地調控ET濃度，對減輕復蘇后腦功能和心功能的損傷起到一定作用。

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