山東產部分品種大棗活性成分含量比較

張 采 李 佳 張永清

（山東中醫藥大學，山東 濟南 250355）

大棗既是著名的水果，也是傳統中藥，藥用歷史已長達2000余年。具有補中益氣、養血安神等功效，用于治療中氣不足、脾胃虛弱、體倦乏力、食少便溏、血虛萎黃、婦女臟躁等病癥。現代研究證明，大棗含有多糖、黃酮類、皂苷類、三萜類、生物堿類、環磷酸腺苷等活性物質，具有增強免疫、抗氧化、抗腫瘤、抗衰老等藥理作用。大棗原產我國，自古以來就被列為“五果”（桃、李、梅、杏、棗）之一。據統計，全球大棗種質資源的98%以上、總產量的近100%都集中在我國。山東作為我國大棗主產區之一，品種眾多，著名的地方品種有金絲小棗、圓鈴棗、大馬牙、小馬牙、短果長紅、亞腰長紅等[1]。不同品種大棗的形狀、大小、顏色、甜度等具有明顯差異，但其藥用價值有無差異至今報道甚少。為了評價不同品種大棗的藥用質量，我們分析比較了山東產8個品種的總黃酮、齊墩果酸、熊果酸等活性成分含量。

1 材料與方法

1.1 大棗樣品

2009年9～10月份，采摘各地不同品種大棗近成熟果實，曬干，去核粉碎前50℃烘干。各品種大棗及采集地點見表1。

表1 各品種大棗及采集地點

1.2 儀器與試劑

紫外－可見分光光度計；電子分析天平；超聲震蕩儀。蘆丁（購自山東省藥品檢驗所）；齊墩果酸（購自四川省維克奇科技有限公司）；熊果酸（購自四川省維克奇科技有限公司）。95%乙醇；亞硝酸鈉；三氯化鋁；氫氧化鈉；甲醇；香草醛；冰醋酸；高氯酸；乙酸乙酯。均為分析純。

1.3 方法

采用分光光度法[2-4]。

1.3.1 總黃酮含量測定

1.3.1.1 標準曲線制作

精密稱取干燥至恒重的蘆丁對照品9.3mg，置25mL容量瓶中，加60%乙醇溶解，定容至刻度，搖勻，既得對照品溶液。精密吸取對照品溶液0mL、0.3mL、0.5mL、0.8mL、1.0mL、1.3mL、1.5mL、1.8mL、2.0mL，分別置10mL容量瓶中，加60%乙醇至5.0mL，精密加入5%亞硝酸鈉溶液0.3mL，搖勻，放置6min，再精密加入10%三氯化鋁溶液0.3mL，搖勻，放置6min，再加入4%氫氧化鈉溶液4.0mL，放置10min，最后加60%乙醇至刻度，搖勻，放置10min，以試劑空白做參比，在510nm處測吸光度值（A），以吸光度為縱坐標，蘆丁對照品溶液濃度（C）為橫坐標，繪制標準曲線，得出回歸方程：A＝12.6C＋0.0144（R＝0.9997)。

1.3.1.2 樣品測定

準確稱取樣品1.0000g，置于100ml錐形瓶中，加入60%乙醇30mL，浸泡24h，超聲處理1h，過濾，洗滌，濾液置50ml容量瓶中，60%乙醇定容，得樣品提取液。按照標準曲線制備方法操作，測定吸光度，帶入下列公式，計算總黃酮的含量。

總黃酮含量（mg/g）＝（A－0.0144）/12.6M

（M為樣品質量，單位g）

1.3.2 齊墩果酸含量測定

1.3.2.1 標準曲線制作

精密稱取齊墩果酸對照品5mg，置于25mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，即得200μg/mL齊墩果酸對照品溶液。分別吸取上述溶液0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL、1.2mL置于試管中，揮去溶劑后，準確加入5%香草醛冰醋酸溶液0.4mL，高氯酸1.6mL，混勻，置70℃恒溫水浴中加熱5min，冷卻至室溫，并轉移至10ml容量瓶中，加乙酸乙酯稀釋至刻度，搖勻，在560nm處測定吸光度（A）。以吸光度為縱坐標，齊墩果酸對照品溶液濃度（C）為橫坐標，繪制標準曲線，得出回歸方程：A＝24.393C＋0.0177（R＝0.9991）。

1.3.2.2 樣品測定

精密稱取樣品粉末1g，置于三角瓶中，加入95%甲醇10mL，在常溫下超聲提取30min，過濾，濾渣再提取1次，合并2次濾液，以95%甲醇定容至25mL。取1mL濾液，用95%甲醇來稀釋到25mL，作供試品溶液，按照標準曲線制備方法操作，測定吸光度，帶入下列公式，計算齊墩果酸的含量。

齊墩果酸含量（mg/g）＝（A－0.0177）（25×25）/24.393M（M為樣品質量，單位：g）

1.3.3 熊果酸含量測定

1.3.3.1 標準曲線制作

精密稱取熊果酸對照品6mg，置于50ml容量瓶中，加無水乙醇溶解，并定容至50mL，配成0.12mg/mL對照品溶液。分別取對照品溶液0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL、1.2mL，置于試管中，水浴揮干溶劑，分別加5%香草醛-冰醋酸溶液0.5mL，高氯酸0.8mL，置于60℃水浴中12min，冰浴冷卻2min，加冰醋酸5ml，搖勻，在顯色5～60min內于548nm處測定吸光度，以熊果酸毫克數（N）為橫坐標，吸光度（A)為縱坐標，繪制標準曲線，得出回歸方程：A＝0.8723N＋0.0282（R＝0.99965）。

1.3.3.2 樣品測定

精密稱取樣品粉末1g，置于三角瓶中，加入95%甲醇10mL，在常溫下超聲提取30min，過濾，濾渣再提取1次，合并2次濾液，用95%甲醇定容至25mL。取1mL濾液，用95%甲醇來稀釋到25mL，作供試品溶液，按照標準曲線制備方法操作，測定吸光度，帶入下列公式，計算熊果酸的含量。

熊果酸含量（mg/g）＝（A－0.0282）×25/M

（M為樣品質量，單位：g）

2 結果與分析

經測定，山東產部分品種大棗中的總黃酮、齊墩果酸與熊果酸含量如表2所示。

表2 山東產部分品種大棗中的活性成分含量（mg/g）

表2結果顯示，不同品種大棗中的總黃酮、齊墩果酸及熊果酸含量差異明顯。總黃酮含量以躺棗含量最高，達1.469mg/g，最低者是仲秋紅，為0.373mg/g，最高者是最低者的3.94倍；齊墩果酸含量以金絲新四最高，達10.754mg/g，最低者是磨盤棗，為6.883mg/g，最高者是最低者的1.56倍；熊果酸含量以磨盤棗最高，達14.409mg/g，最低者是長棗，為7.081mg/g，最高者是最低者的2.03倍；三類活性成分總量以冬棗最高，達23.947mg/g，最低者是長棗，為17.671mg/g，最高者是最低者的1.36倍。

3 討論與小結

大棗所以能夠藥用，是因為其中含有能夠治療疾病的活性成分。現代研究表明，黃酮類化合物可抗菌、消炎、抗突變、降壓、清熱解毒、鎮靜、利尿，在抗氧化、抗癌、防癌、抑制脂肪酶等方面也有顯著效果；齊墩果酸、熊果酸屬于三萜酸類，具有抑菌、保肝、降脂、升白細胞、增強肌體免疫等重要生理功能[6-9]。因此，大棗中總黃酮、齊墩果酸、熊果酸的含量高低，對其臨床治療效果會有顯著影響，可作為大棗藥材質量控制的指標。本試驗結果表明，不同品種大棗總黃酮、齊墩果酸、熊果酸含量差異顯著，說明其藥材質量明顯不同。以現有試驗結果進行判斷，在山東產8個品種大棗中，以冬棗、圓棗的藥用價值較高。因此，藥用大棗的品種問題應予以重視，但目前該領域的研究工作甚少，必須予以加強。

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