晚期糖基化終產物受體在心房顫動患者血清中的表達及意義

劉麗華 徐 莉 李 燁

湖北省武漢市普仁醫院心內科，湖北武漢 430081

晚期糖基化終產物受體在心房顫動患者血清中的表達及意義

劉麗華 徐 莉 李 燁

湖北省武漢市普仁醫院心內科，湖北武漢 430081

目的 探討心房顫動 （AF）患者血清高遷移率族蛋白1（HMGB1）、晚期糖基化終產物內源性分泌受體（es-RAGE）及晚期糖基化終產物C端短截受體（cRAGE）水平的變化。 方法 本研究收集我院連續入院的75例AF患者，另外納入32例年齡和性別與AF組相匹配的健康查體者作為對照組。采用ELISA法檢測兩組人群血清HMGB1、cRAGE及esRAGE水平。 結果 陣發性AF組及持續性AF組HMGB1水平高于對照組（均P<0.05）；持續性AF組HMGB1水平高于陣發性AF組（P<0.05）。陣發性AF組及持續性AF組cRAGE水平高于對照組（均P<0.05）；持續性AF組cRAGE水平高于陣發性AF組（P<0.05）。陣發性AF組及持續性AF組esRAGE水平低于對照組（均P<0.05）；持續性AF組esRAGE水平低于陣發性AF組（P<0.05）。 結論 本研究顯示持續性和陣發性AF患者血清HMGB1和cRAGE水平顯著升高，而esRAGE水平顯著降低，提示cRAGE和esRAGE可能成為AF的兩種新型生物標記物，且可能與HMGB1共同參與了AF發生的病理生理過程。

高遷移率族蛋白1；晚期糖基化終產物內源性分泌受體；晚期糖基化終產物C端短截受體；炎癥；心房顫動

心房顫動（AF）是臨床上最常見的持續性心律失常，隨著年齡的增長患病率增加。在普通人群中，AF的患病率為0.4%～1.0%，在80歲以上的人群中，AF的發生增至8%[1-2]。現有的研究顯示炎癥過程和AF發展及復發相關[3-5]。RAGE是免疫球蛋白超家族的一個信號轉導受體，包括晚期糖基化終產物C端短截受體（cRAGE）和糖基化終產物內源性分泌受體（esRAGE）兩種主要的類型。esRAGE是通過前mRNA的選擇性剪接而產生；cRAGE由基質金屬蛋白酶將細胞表面蛋白水解而生成后進入血液中；這兩種變體均可作為糖基化終產物（AGEs）及多種促炎因子的誘導配體[6-8]。RAGE是高遷移率族蛋白1（HMGB1）的主要受體之一，且HMGB1可以通過RAGE促進其他促炎因子如白介素-6（IL-6），腫瘤壞死因子-α（TNF-α ）和 C 反應蛋白（CRP）的釋放[9]。 然而，AF 患者血清esRAGE及cRAGE水平的變化目前尚不清楚。本研究旨在探討AF患者血清esRAGE及cRAGE水平的變化及意義。

1 資料與方法

1.1一般資料

2009年6 月～2012年6月本研究收集我院連續入院的75例AF患者，另外納入32例年齡和性別與AF組相匹配的健康查體者作為對照組。所有研究對象均需采集詳細病史，行體格檢查、常規生化檢查和12導聯心電圖。心臟超聲評估瓣膜功能、左心室的大小包括左室舒張末期直徑（LVEDD）和心臟射血分數（EF）及左房直徑（LAD）。AF持續時間根據患者描述的突發心悸的性質以及發作后心電圖AF的證據確定。排除標準：結構性心臟病、冠心病、左室射血分數低于45%、其他類型心律失常、6個月內手術或中風患者、感染病史、慢性炎癥疾病、肝臟疾病、惡性腫瘤、慢性腎功能衰竭、自身免疫性疾病、甲狀腺功能異常、電解質紊亂、服用抗炎藥物如糖皮質激素和非甾體類抗炎藥（阿司匹林除外）者。

1.2 AF分類

首次AF發作持續時間不超過7 d定義為新發AF，AF發作超過兩次則為再發AF。再發AF若可自行終止且持續時間少于7 d，則為陣發性AF；持續時間超過7 d則為持續性AF，其中包括永久性AF。首次檢測的AF可能是陣發性或持續性AF。無心臟病變或高血壓者發生的AF成為孤立性AF[1]。

1.3 樣本收集和生化檢測

研究對象空腹12 h后在早上7∶00～8∶00從肘前靜脈抽取外周靜脈血。血清標本等量分裝后保存在-70℃冰箱備用。所有樣品均一次性解凍使用。使用Hitachi912分析儀（德國羅氏公司）按標準實驗室技術檢測血清高敏C反應蛋白（hs-CRP）。血清HMGB1水平則采用HMGB1 ELISA試劑盒Ⅱ（日本東京Shino-Test公司）按說明書操作檢測。血清cRAGE和esRAGE水平采用RAGE ELISA試劑盒 （美國B-Bridge International公司）按說明書操作檢測。

1.4 統計學方法

采用統計軟件SPSS 16.0（美國芝加哥SPSS公司）進行數據分析。數據以均數±標準差（）或者百分率表示。組間率比較采用χ2檢驗或者Fisher精確概率法。多組間的比較采用方差分析，兩兩比較采用SNK檢驗。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組患者一般臨床特征

如表1所示，陣發性AF組、持續性AF組及對照組三組間性別、吸煙、飲酒、高血脂、糖尿病、高血壓和藥物使用（地高辛除外）、年齡、體重指數（BMI）差異均無統計學意義（P＞0.05）。

表1 三組患者一般臨床特征比較[n（%）]

2.2 三組患者心臟超聲比較

如表2所示，持續性AF組LAD大于陣發性AF組及對照組（P＜0.05）。陣發性AF組LAD大于對照組，但差異無統計學意義（P＞0.05）。三組患者LVEDD、LVEF（左室射血分數）比較，差異均無統計學意義（均P＞0.05）。

表2 三組患者心臟超聲比較（）

表2 三組患者心臟超聲比較（）

注：與對照組和陣發性AF組相比，#P＜0.05

指標 對照組（n=32）陣發性AF組（n=42）持續性AF組（n=33）LAD（mm）LVEDD（mm）LVEF（%）30.5±3.2 46.3±3.8 61.5±3.9 33.6±4.8 47.9±5.0 61.3±5.0 41.7±5.5#48.3±4.9 59.3±6.5

2.3 三組患者血清各種因子比較

如表3所示，持續性AF組hs-CRP水平高于陣發性AF組及對照組（P＜0.05）。陣發性AF組hs-CRP水平高于對照組（P＜0.05）。持續性AF組HMGB1水平高于陣發性AF組及對照組（P＜0.05）。陣發性AF組HMGB1水平高于對照組（P＜0.05）。陣發性AF組及持續性AF組血清cRAGE水平高于對照組（P＜0.05）；持續性AF組cRAGE水平高于陣發性AF組 （P＜0.05）。然而，陣發性AF組及持續性AF組esRAGE水平低于對照組（P＜0.05）；持續性AF組esRAGE水平低于陣發性AF組（P＜0.05）。

表3 三組患者血清高敏C反應蛋白、高遷移率族蛋白1、晚期糖基化終產物C端短截受體和晚期糖基化終產物內源性分泌受體比較（）

表3 三組患者血清高敏C反應蛋白、高遷移率族蛋白1、晚期糖基化終產物C端短截受體和晚期糖基化終產物內源性分泌受體比較（）

注：與對照組相比，#P＜0.05；與陣發性AF組相比，▲P＜0.05

指標 對照組（n=32）陣發性AF組（n=42）持續性AF組（n=33）hs-CRP（mg/L）HMGB1（μg/L）cRAGE（ng/L）esRAGE（ng/L）1.11±0.28 2.18±0.98 486.8±204.5 418.7±169.4 2.12±0.85#5.87±2.12#689.8±268.3#263.5±159.2#4.78±1.20#▲8.99±3.41#▲989.3±309.7#▲178.2±121.5#▲

4 討論

盡管已有大量的研究，AF發生的潛在病理生理機制仍未明確。目前大量證據顯示AF的發展和復發與炎癥過程有相關性[3-5]。研究顯示，在AF患者中，一些促炎細胞因子如CRP、hs-CRP、TNF-α及IL-6等顯著增高，這可能與電復律及導管消融后AF復發的高風險有關[3-5]。這些結果提示，促炎因子在AF的發展及復發中起著重要的作用，且是AF可能的致病環節。近期研究顯示，HMGB1作為一種非染色體核蛋白，能調節基因的轉錄并維持核小體的結構和功能，是心血管疾病中一種新型的促炎因子[7-9]。最近，楊新紅等[10]報道，AF患者（包括陣發性和持續性AF）血清HMGB1水平顯著增高，且與血清hs-CRP水平呈正相關，hs-CRP水平在AF患者中顯著增高，且是AF患者成功心臟電復律及復律后維持竇性心律的重要預測因子[11]。本研究中，筆者也發現陣發性及持續性AF患者血清HMGB1及hs-CRP水平顯著增高。這提示HMGB1如hs-CRP一樣可能成為AF的一種新型預測因子。

RAGE是免疫球蛋白超家族的一個信號轉導受體，包括cRAGE和esRAGE兩種主要的類型。這兩種配體間存在此消彼長的關系，如降低的esRAGE和/或升高的cRAGE水平是糖尿病、動脈粥樣硬化和心臟衰竭患者配體-RAGE相互作用增強的生物標記物[8]。RAGE是HMGB1的主要受體之一，且HMGB1可以通過RAGE促進其他促炎因子如IL-6、TNF-α和CRP的釋放[9]。本研究中，筆者發現陣發性和持續性AF患者血清cRAGE及HMGB1水平顯著升高，然而esRAGE水平顯著降低，尤其在持續性AF患者中。此外，HMGB1已被證實是一種RAGE（包括cRAGE和esRAGE）的新型配體[9，12]。HMGB1與RAGE的結合促進了受體的脫落[13]。其信號通過RAGE激活炎癥途徑和強化細胞氧化應激，從而導致促炎因子的大量產生及黏附分子的表達增高，這是AF發生主要的病理生理機制[3-5]。以上研究結果提示cRAGE和esRAGE可能成為AF的兩種新型生物標記物，且可能與HMGB1共同參與了AF發生的病理生理過程。

本研究發現陣發性及持續性AF患者血清HMGB1和cRAGE水平顯著升高，而esRAGE水平顯著降低；提示cRAGE和esRAGE可能成為AF的兩種新型生物標記物，且可能與HMGB1共同參與了AF發生的病理生理過程。

[1]黃從新，張澍，馬長生，等.心房顫動：目前的認識和治療建議-2010[J].中華心律失常學雜志，2010，14：328-369.

[2]Go AS，Hylek EM，Phillips KA，et al.Prevalence of diagnosed atrial fibrillation in adults：national implications for rhythm management and stroke prevention：the anticoagulation and risk factors in atrial fibrillation （ATRIA） study[J].JAMA，2001，285：2370-2375.

[3]Liu T，Li G，Li L，et al.Association between C-reaction protein and recurrence of atrial fibrillation after successful electrial cardioversion[J].J Am Coll Cardiol，2007，49：1642-1648.

[4]Leftheriotis DI，Fountoulaki KT，Flevari PG，et al.The predictive value of inflammatory and oxidative m arkers following the successful cardioversion of persistent lone atrial fibrillation [J].Int J Cardiol，2009，135：361-369.

[5]Li J，Solus J，Chen Q，et al.Role of inflammtion and oxidative stress in atrial fibrillation[J].Heart Rhythm，2010，7：438-444.

[6]Basta G.Receptor for advanced glycation endproducts and atherosclerosis：from basicmechenisms to clinical implications[J].Atherosclerosis，2008，196：9-21.

[7]Yan XX，Lu L，Peng WH，et al.Increased serum HMGB1 level is associated with coronary artery disease in nondiabetic and type 2 diabetic patients[J].Atherosclerosis，2009，205：544-548.

[8]Wang LJ，Lu L，Zhang FR，et al.Increased serum high-mobility group box-1 and cleaved receptor for advanced glycation endproducts levels and decreased endogenous secretory receptor for advanced glycation endproducts levels in diabetic and non-diabetic patientswith heart failure[J].Eur JHeart Fail，2011，13：440-449.

[9]Andrassy M，Volz HC，Igwe JC，et al.High-mobility group box-1 in ischemia-reperfusion injury of the heart[J].Circulation，2008，117：3216-3226.

[10]楊新紅，李艷，胡笑容，等.心房顫動患者高遷移率族蛋白1血清水平[J].中國心臟起搏與心電生理雜志，2011，25：136-138.

[11]Watanabe E，Arakawa T，Uchiyama T，et al.High-sensitivity C-reactive protein is predictive of successful cardioversion for atrial fibrillation and maintenance of sinus rhythm after conversion[J].Int JCardiol，2006，108：346-353.

[12]Sparvero LJ，Asafu AD，Kang R，et al.RAGE （Receptor for Advanced Glycation Endproducts）， RAGE ligands， and their role in cancer and inflammation[J].JTransl Med，2009，7：17.

[13]Raucci A，Cugusi S，Antonelli A，et al.A soluble form of the receptor for advanced glycation endproducts （RAGE）is produced by proteolytic cleavage of the membrane-bound form by the sheddase a disintegrin andmetalloprotease 10（ADAM10）[J].FASEB J，2008，22：3716-3727.

Expression of receptor for advanced glycation endproducts levels in patients with atrial fibrillation

LIU Lihua XU Li LIY
Department of Cardiology,Puren Hospital ofWuhan City,Hubei Province,Wuhan 430081,China

Objective To investigated the changes of serum high-mobility group box 1(HMGB1),endogenous secretory receptor for advanced glycation endproducts(esRAGE)and cleaved receptor for advanced glycation endproducts(cRAGE)levels in patients with atrial fibrillation(AF).MethodsA total of 75 consecutive atrial fibrillation(AF)patients were enrolled.Another 32 age and sex matched healthy people were considered as control group.Serum HMGB1,esRAGE and cRAGE concentration in AF patients and healthy peoplewasmeasured by ELISA.ResultsHMGB1 level in paroxysmal AF group and persistent AF group were higher than that in control group (all P<0.05);and HMGB1 level in persistent AF group was higher than that in paroxysmal AF group (P<0.05).cRAGE level in paroxysmal AF group and persistent AF group were higher than that in control group (all P<0.05);and cRAGE level in persistent AF group was higher than that in paroxysmal AF group (P<0.05).However,esRAGE level in paroxysmal AF group and persistent AF group were lower than that in control group (all P<0.05);and esRAGE level in persistent AF group was lower than that in paroxysmal AF group (P<0.05).ConclusionIn the present study,serum cRAGE level of paroxysmal and persistent AF patients increase significantly,while serum esRAGE level decreases significantly.These suggested that cRAGE and esRAGE may be as two novel biomarkers for AF,and may possibly be involved in the pathogenesis of AF accompanied with HMGB1.

HMGB1;cRAGE;esRAGE;Inflammation;Atrial fibrillation

R541.7

A

1673-7210（2012）11（c）-0012-03

2012-07-31 本文編輯：郝明明）