2589例健康已婚女性宮頸解脲脲原體感染調(diào)查及藥敏分析

張務香 何仁亮

（1 安仁縣婦幼保健院，湖南 安仁423600；2 中山市黃圃人民醫(yī)院，廣東 中山 528429）

為探討解脲脲原體在健康已婚女性泌尿生殖道中的流行病學情況以及對不同藥物的敏感性，我們通過利用熒光定量-聚合酶鏈反應以及支原體培養(yǎng)十藥敏試驗對2589例健康已婚女性宮頸分泌物進行檢測，現(xiàn)將檢測的結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2009年5月至2010年5月常規(guī)婦科檢查的2589例健康已婚女性子宮頸管分泌物作為標本，患者年齡18～65歲，平均年齡33.2歲。其中18～25歲422例，26～35歲571例，36～45歲1197例，其中絕經(jīng)19人，46～55歲321例其中絕經(jīng)37例，56～65歲217例，其中絕經(jīng)204例。

1.2 標本采集和方法

用無菌生理鹽水脫脂棉拭子插入女性宮頸管內(nèi)2～4cm處旋轉l～2周，停留約l0s后置于無菌干試管中送檢。

1.3 標本檢驗及方法

對所取標本先用熒光定量-聚合酶鏈反應（PCR）進行Uu初篩，初篩結果陽性者進行Uu培養(yǎng)和藥敏實驗。

1.3.1 熒光定量-聚合酶鏈反應（PCR）

儀器：美國PE7700自動熒光PCR儀。試劑：HBV-FQ-PCR試劑盒由中山醫(yī)科大學達安基因診斷中心生產(chǎn)；ELISA試劑盒由珠海麗珠集團麗珠試劑廠生產(chǎn)。操作：將標本洗滌液化12000r/min離心5min，去上清液，采用常規(guī)堿裂解法提取Uu-DNA，各反應管放入PE7700自動熒光儀，按下列條件擴增73℃2min預變性，然后按下列條件擴增:93℃45s～55℃120s，共做40個循環(huán)，反應結束以后，電腦自動計算出定量結果。

1.3.2 解脲脲原體培養(yǎng)和藥敏實驗。

1.3.2.1 將所取標本30min內(nèi)接種于選擇性培養(yǎng)基中。并將棉拭子插入2mL培養(yǎng)液中充分振洗并在瓶壁擠干拭子，取出棄之，混合均勻。在支原體培養(yǎng)試劑條的培養(yǎng)孔及藥敏孔中各加入上述溶液100μL，然后各孔再加入1滴無菌礦物油覆蓋，置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

1.3.2.2 試劑

采用其昌達生物高科技（上海）有限公司出品的Uu和Mh培養(yǎng)鑒定、藥敏試劑盒，藥物種類分別為強力霉素（Dox）、紅霉索（Ery）、羅紅霉素（Rox）、阿奇霉素（Azi）、交沙霉索（Jos）、克拉霉素（Cla）、甲砜霉素（Thi）、環(huán)丙沙星（Cip）、可樂必妥（Cra）、加替沙星（Cat）等十種。

1.4 結果判斷

培養(yǎng)24h后判讀Uu結果。以培養(yǎng)基變成酒紅色為陽性，同時觀察藥敏孔的顏色，如變?yōu)榫萍t色為耐藥，變?yōu)榈t色為中度敏感，淡黃色（不變色）為敏感，分別計算不同藥敏種類。

2 結 果

2589例健康已婚女性子宮頸管分泌物檢測標本中，Uu陽性例數(shù)為1530例，陽性率為59.096%，Uu陽性的年齡分布見表1；1530例Uu陽性的藥敏結果。見表2。

表1 1530例Uu陽性的年齡分布和絕經(jīng)情況

3 討 論

3.1 既往的研究認為解脲支原體是引起一系列婦產(chǎn)科疾病的潛在致病因素[1]，在機體抵抗力低下或黏膜受損的情況下可成為致病菌，不僅可以引起非淋菌性宮頸炎，還與女性不孕癥、早產(chǎn)、自然流產(chǎn)等密切相關[2]。但是今年來解脲脲原體已趨向于被認為不致病[3]。

3.2 本研究提示在不同的年齡階段，Uu感染的情況有所不同。在18～25歲年齡段，約為67.06%；在26～35歲年齡段，約為60.77%；在36～45歲年齡段，約為64.82%，其中絕經(jīng)者發(fā)生率5.26%（1/19）；在46～55歲年齡段，約占34.89%，其中絕經(jīng)者發(fā)生率8.1%（3/37）；56～65歲年齡段，約占8.29%，其中絕經(jīng)者感染率5.88%（12/204）。與劉朝暉等[4]的研究結果相似。

3.3 在檢出的Uu菌株的藥敏試驗中，大環(huán)內(nèi)酯類抗生素阿奇霉素顯示出極強的抗菌活性，敏感率達91.9% 耐藥率只有1.7% ；四環(huán)素類抗生素中，強力霉素敏感性高達94.2%，耐藥率也只有2.5%；這和徐明等[5]、吳翠云等[6]的報道相似。見表1。

綜上所述，在健康已婚女性的宮頸分泌物中可以正常存在Uu的感染，在18～45歲期間，Uu檢出的比率明顯高于46～65歲，但在絕經(jīng)后感染率明顯降低，具體的原因暫時不是很清楚，可能與性活躍期，雌激素水平較高，性生活頻率較多，而46歲以后，雌激素水平開始下降、性生活頻率減少有一定的關系。所以，對于已婚女性宮頸分泌物檢出Uu并不一定意味致病性。張帝開等[7]認為隨著檢測技術的不斷進步，試劑盒越來越敏感，Uu的陽性檢出率也隨之增高，結果的評價必須結合其他臨床資料，了解Uu正常攜帶狀態(tài)，有助于我們評價條件致病狀態(tài)時的作用。臨床中如果從宮頸分離出Uu，評價一定要慎重，對于Uu的進一步定量和分型有助于判斷感染狀態(tài)和攜帶狀態(tài)。藥敏試驗提示所檢出的Uu對強力霉素、阿奇霉素的敏感性較高。提示對于考慮因Uu感染所致婦科疾病，在選擇抗菌素時，可以根據(jù)具體的情況選擇強力霉素、阿奇霉素進行治療。

表2 1530例Uu 對1O種抗菌藥物的敏感度類

[1]Blanchard A.Yanez A,Dybring K,et al.Evaluation of intraspecies genetic variation within the 16s rRNA gene of mycoplasmd hominis and detecting by poly- erase chain reaction[J].J Clin Microbio1,1993,31(4):1358.

[2]陸春,朱國興,黃懷球.解脲支原體對子宮頸致病性的臨床分析[J].臨床皮膚科雜志,2002,31(3):149-150.

[3]連石.生殖道衣原體感染.見:張學軍主編.皮膚性病學[M].7版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2008:230.

[4]劉朝暉,張淑增,任翊.解脲支原體在正常人群宮頸的存在情況及分群分型[J].中國實用婦科與產(chǎn)科雜志,2003,19(3):161.

[5]徐明,孫瑩.上海地區(qū)門診性病患者支原體感染調(diào)查及其藥敏結果分析[J].檢驗醫(yī)學,2004,19(1):75-76.

[6]吳翠云,薛敏,肖松舒.1636例宮頸拭子支原體、表原體檢測及支原體耐藥性分析[J].實用預防醫(yī)學,2005,12(3):535-537.

[7]張帝開,李秀云,覃春容,等.健康婦女下生殖道解脲脲原體及其分群分型研究[J].中國微生態(tài)雜志,2007,19(3):288-292.