冠狀動脈內臍血干細胞移植對冠心病患者室性心律失常的影響

韋方，羅罕，李安杰，周永剛，梁青龍，周松

(1.貴州省人民醫院心內科，貴州貴陽550002;2.武威市人民醫院內科，甘肅武威733000)

近年來，采用現代分子生物學技術，將促血管生成因子或干細胞移植到缺血區域，通過促進新生血管形成及側支循環的建立和開放達到所謂“分子搭橋”的治療技術越來越引起人們的興趣和關注。目前干細胞移植治療的疾病已經達80多種，在惡性腫瘤、免疫缺陷、神經系統損傷、組織器官修復、糖尿病、血管疾病及心臟病等的治療上顯示出巨大的潛力［1］。但是干細胞移植后是否會打破正常心肌的電活動而引起心律失常尚無定論［2］。本文旨在探討冠狀動脈內臍帶血單個核細胞移植對冠心病患者室性心律失常的影響，為其臨床應用提供參考。

1 對象與方法

1.1 病例

選擇2009年1月至2010年12月我科住院患者40例，所有患者經冠狀動脈造影證實為多支血管彌漫病變，均無介入手術及冠脈搭橋指征。年齡47～72歲(56.4±8.8)歲，男28例，女12例。隨機分為內科藥物治療組(對照組)和干細胞移植組(實驗組)，實驗組在內科藥物治療基礎上選擇左前降支(LAD)為干細胞移植靶血管。兩組患者年齡、性別、合并高血壓、糖尿病等情況及基礎心功能間差異無統計學意義。所有患者無嚴重的肝腎功能不全，排除惡性腫瘤、血液系統疾病，全部患者知情同意并接受手術。

兩組患者均規律服用阿司匹林，ACEI或ARB，β-受體阻滯劑，他汀類，硝酸脂類，利尿劑等，每日服用劑量及次數間差異無統計學意義。

1.2 方法

1.2.1 人臍血單個核細胞的提取與制備 所有臍帶血均來自貴州省人民醫院婦產科，采自無妊娠并發癥，身體健康，新生兒足月分娩(37～40周)孕婦。均為捐獻者自愿捐獻，且同意用于科學研究和臨床治療。一次性血袋采集臍血80～120 mL，6 h內分離，采用60 g/L羥乙基淀粉沉淀及1.077 g/L Ficoll-Paque密度梯度離心兩步分離法，吸取中間含單個核細胞的白膜層，PBS洗2次，全程嚴格無菌操作，分離好的干細胞在30 min內注入冠狀動脈內。1.2.2 臍血單個核細胞移植手術 患者取平臥位，常規消毒鋪巾，2%利多卡因局部麻醉，橈動脈穿刺建鞘，通過指引導管經鋼絲ATM(日本醫療器械公司泰爾茂Terumo Corp)將非快速交換球囊(overthe-wier，美國強生Cordis公司)超選擇到左前降支，退出鋼絲，4～6 ATM充盈球囊，經球囊中央孔將5 mL臍帶血單個核細胞緩慢灌注3 min至前降支。全程監測心率、血壓、血氧飽和度。

1.2.3 24 h動態心電圖檢測 術前，術后1周，術后8周行24 h動態心電圖檢查(采用24 h 12導聯同步動態HOLTER型號SDD-12A動態心電圖分析系統，由長春時代數碼有限責任公司生產)。心律失常的判斷按照Lambeth會議標準，評分參照Wang等［3］的評分規則。具體如下:①0分，無心律失常;②1分，偶發室性期前收縮(指1 min內發生3次以下的室性期前收縮);③2分，頻發室性期前收縮(指1 min內發生3次或3次以上的室性期前收縮);④3分，偶發室速(指1 min內發生3次以下的室速);⑤4分，頻發室速(指1 min內發生3次或3次以上的室速)或偶發室顫(指1 min內發生3次以下的室顫);⑥5分，頻發室顫(指1 min內發生3次或3次以上的室顫)或死亡。

1.3 統計學處理

采用SPSS 18.0統計分析軟件處理，計量資料采用配對t檢驗;資料以均數±標準差(±s)表示;P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

實驗組所有患者均成功完成手術，平均手術時間為(12.6±3.2)min。移植后1周、8周心律失常評分明顯低于對照組及移植前(P ＜0.05、0.01)，移植后8周時心律失常評分較移植后1周降低(P＜0.05)。

表1 兩組患者心律失常評分比較 ±s，n=20

表1 兩組患者心律失常評分比較 ±s，n=20

與對照組比較，a:P ＜0.05，b:P ＜0.01;移植后8周與1周比較，c:P ＜0.05。

組別 移植前 移植后1周 移植后8周對照組 2.80 ±0.75 2.91 ±0.96 2.87 ±0.73實驗組 2.88 ±1.05 1.67 ±0.71a 1.07 ±0.43b，c

3 討論

心肌梗死后心肌細胞丟失，損傷的心肌被纖維瘢痕取代，由此而導致的結構和電重構是導致心力衰竭(心衰)進展及心律失常的主要因素。常用的藥物治療、介入治療及冠狀動脈旁路移植雖有一定效果，但都不能代替壞死的心肌細胞，因而療效有限。近年來隨著分子生物學和細胞生物工程技術的發展以及對細胞研究的深入，大量動物實驗和基礎研究證實可通過干細胞移植技術，使干細胞在瘢痕組織內分化為有功能的心肌細胞，替代壞死心肌，從而改善心功能［4］。臍血干細胞因來源豐富，取材方便、幾乎無免疫原性、多向分化潛能、移植成功率高等優點，是近年來倍受矚目的理想移植細胞［5］，因此本研究選擇臍血干細胞。

惡性心律失常所致的心源性猝死是冠心病最主要的死亡原因，是影響患者生存的主要因素，干細胞移植后是否有致心律失常作用也是人們所長期關注的。體外研究表明，胚胎干細胞在體外培養向心肌細胞轉化的過程中可記錄到INa電流，可能具有致心律失常作用［6］。但活體動物實驗研究結果證實干細胞移植并未增加心律失常發生率［7］。本研究結果表明，移植后1周、8周心律失常評分較術前及對照組明顯降低，而移植后8周時心律失常評分進一步降低，說明臍血干細胞移植不但沒有增加室性心律失常發生，反而有助于減少惡性心律失常的發生，究其原因，可能與干細胞移植后心功能改善及心肌灌注改善有關，具體機制有待進一步研究。

［1］Tse W，Laughlim MJ.Umbilical cord blood transplanta-tion:a new alternative option［J］.Hematology Am Soc Hematol Educ Program，2005(1):377－383.

［2］Menasche P，Hagege AA，Vilquin JT，et al.Autologous skeletal myoblast transplantation for severe postinfarction left ventricular dysfunction［J］.J Am Coll Cardiol，2003，41(7):1078－1083.

［3］Wang GY，Wu S，Pei JM，et al.Kappa-but not delta-opioid receptors mediate effects of ischemic preconditioning on both infarct and arrhythmia in rats［J］.Am J Physiol Heart Circ Physiol，2001，280(1):H384 －391.

［4］Strauer BE，Brehm M，Zeus T，et al.Repair of infarcted myocardium by autologous intracoronary mononuclear bone marrow cell transplantation in humans ［J］.Circultation，2002，106(15):1913 －1918.

［5］Ma N，Stamm C，Kaminski A，et al.Human cord blood cells induce angiogenesis following myocardial infarction in NOD/scid-mice ［J］.Cardiovasc Res，2005，66(1):45－54.

［6］Satin J，Kehat I，Caspi O，et al.Mechanism of spontaneous excitability in human embryonic stem cell derived cardiomyicytes［J］.J Physiol，2004，559(pt2):479 －496.

［7］史力生.自體骨髓干細胞心肌移植治療急性心肌梗死過程中電生理特性表達及對心律失常影響的機制研究［D］.石家莊:河北醫科大學，2006.