應(yīng)用磁球凝固法建立適合未成年人凝血常規(guī)指標(biāo)參考區(qū)間的探討

孫 濤，艾 清＊，袁寶山，邱 俊

（1.吉林大學(xué)第一醫(yī)院二部 檢驗(yàn)科，吉林 長春130031；2.空軍航空大學(xué)門診部）

凝血常規(guī)檢測(cè)是反應(yīng)內(nèi)源性與外源性凝血途徑障礙的主要篩選試驗(yàn)，是臨床出血和血栓性疾病常用的檢驗(yàn)項(xiàng)目，主要包括PT、APTT、Fib、TT，但由于市場(chǎng)上血凝儀使用品牌眾多，各廠家檢測(cè)原理也不盡相同，所用參考區(qū)間多針對(duì)于成年人，而對(duì)適合未成年人的參考區(qū)間的探討鮮有研究，本文旨在通過回顧性分析探討應(yīng)用磁球凝固法建立適合未成年人凝血常規(guī)檢測(cè)的參考區(qū)間。

1 對(duì)象與方法

1.1 檢測(cè)對(duì)象 所有檢測(cè)對(duì)象均為我院2010年11月至2011年2月的間收治的非感染性的擇期手術(shù)未成年人（0－16歲）共計(jì)469例，其中男性289例（嬰幼兒組0－2周歲56例，學(xué)齡前組3－6周歲119例，學(xué)齡組7－12周歲71例，青春期組13－16周歲43例），女性180例（嬰幼兒組0－2周歲29例，學(xué)齡前組3－6周歲74例，學(xué)齡組7－12周歲58例，青春期組13－16周歲19例），所有未成年人無出血癥狀及血栓性疾病家族史，體格檢查正常，白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類正常，近2周內(nèi)未服用過抗凝及抗血小板藥物；成人對(duì)照組采用我院體檢中心體檢正常人群共計(jì)970例，其中男573例，女397例，年齡均在18－55周歲間，體檢無肝、腎功能異常，無血栓性疾病的人群。

1.2 試驗(yàn)儀器 采用法國stago公司生產(chǎn)的STA－Evolution全自動(dòng)血凝儀，磁珠凝固法，專用配套試劑、配套耗材、配套質(zhì)控品，檢測(cè)過程完全按照sop文件操作執(zhí)行，并在批檢測(cè)前確保室內(nèi)質(zhì)控在±2SD范圍內(nèi)。

1.3 試驗(yàn)方法 所有患者均為手術(shù)前常規(guī)采集枸櫞酸鈉抗凝靜脈血，采血量為1.8ml（采血量：抗凝劑＝9：1），采血管為奧地利GREINER公司生產(chǎn)VACUEETTE品牌，采集完畢后立即顛倒混勻8次，然后以1 750g離心力離心10分鐘，分離血漿，并于30min內(nèi)上機(jī)檢測(cè)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 計(jì)量資料采用95%可信區(qū)間確定各組參考范圍，采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，多組間均數(shù)比較采用單因素方差分析，以P＜0.01為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 將469例未成年人及970例成年人PT、APTT、Fib、TT檢測(cè)結(jié)果導(dǎo)入SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，計(jì)算均值及標(biāo)準(zhǔn)差，然后以均值±1.96倍標(biāo)準(zhǔn)差確定各項(xiàng)目參考范圍，見表1。

表1 469例未成年人及970例成年人凝血常規(guī)參考區(qū)間比較

2.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 將所有檢測(cè)結(jié)果導(dǎo)入到SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行多組間單因素方差分析，嬰幼兒組、學(xué)齡前組、學(xué)齡組、青春期組男孩與女孩間PT、APTT、Fib、TT結(jié)果分布差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P值均＞0.05）；成年男、女間各項(xiàng)指標(biāo)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。各男、女未成年組與男、女成年組PT、APTT、TT、Fib P值比較詳見表2。

表2 未成年男、女各年齡組與成年男、女組PT、APTT、TT、Fib比較的P值

3 討論

生物參考區(qū)間是臨床判斷健康與否的標(biāo)準(zhǔn)，實(shí)驗(yàn)室必須保證給臨床提供的參考區(qū)間正確、適用，否則會(huì)導(dǎo)致誤診，甚至錯(cuò)誤的治療。因此，實(shí)驗(yàn)室建立參考區(qū)間工作意義重大［1］，從上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果中可以看出PT、TT參考區(qū)間男、女未成年組與成年組無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），且兒童期的PT、TT水平已接近于成人。APTT參考區(qū)間各年齡組未成年人男、女間無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）；但嬰幼兒組、學(xué)齡前組、學(xué)齡組男、女均與成年組間有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.01），且男性青春期組與成年組有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.01），而女性青春期組與成年組無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），同時(shí)結(jié)果表明男、女各未成年組參考區(qū)間均高于成人組。Fib參考區(qū)間未成年各年齡組男、女間無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），但嬰幼兒組、學(xué)齡前組男、女均與成人組有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.01），且男、女各未成年組參考區(qū)間均低于成人組，并隨著年齡的增長呈上升趨勢(shì)。

未成年兒童APTT參考區(qū)間高于成年人是由于其維生素K依賴的凝血因子和接觸系統(tǒng)因子水平較低［2］，以及較高的紅細(xì)胞比容致血漿相對(duì)于抗凝劑的比例不足［3］導(dǎo)致，本研究顯示，嬰幼兒期、學(xué)齡前期、學(xué)齡期、青春期間的男孩APTT均值水平已高于男性成人對(duì)照組，嬰幼兒期、學(xué)齡前期、學(xué)齡期女孩APTT均值水平已高于女性成人對(duì)照組，故男性成人的APTT參考區(qū)間已不適用于小于16歲的男性兒童，女性成人的APTT參考區(qū)間已不適用于小于12歲的女性兒童。

Fib在肝臟合成，主要分布在血漿，也存在于血小板和巨核細(xì)胞［4］。從本實(shí)驗(yàn)中可以看出Fib水平隨著年齡的增長而增高，嬰幼兒期、學(xué)齡前期、學(xué)齡期、青春期的Fib水平均低于正常成年人，這與溫奕欣［5］研究結(jié)果基本一致，具體原因可能與胎兒型Fib向成人型Fib轉(zhuǎn)換有關(guān)［3］，故成人的Fib參考區(qū)間已不適用于小于6歲的兒童。

通過上述實(shí)驗(yàn)表明，同年齡段的男性兒童與女性兒童間凝血常規(guī)變化差異不大，這表明PT、APTT、Fib、TT參考區(qū)間分布與性別無關(guān)，可以適用同一參考區(qū)間。目前許多實(shí)驗(yàn)室使用的凝血常規(guī)參考區(qū)間多參考葉應(yīng)撫［6］或由儀器廠家所提供，且大多參考區(qū)間只針對(duì)于健康成年人，對(duì)于未成年兒童則未作過多說明，由于不同地區(qū)的儀器、試劑對(duì)凝血常規(guī)檢測(cè)結(jié)果也存在一定差異，所以更不能搬用其他地區(qū)的參考區(qū)間。因此，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立適合于自己實(shí)驗(yàn)室、儀器、年齡的凝血常規(guī)參考區(qū)間。

［1］李啟亮，李玉清，靳劍云.北京地區(qū)健康兒童PT和APTT正常參考范圍的探討［J］.現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2011，3（2）：84.

［2］Andrew M，Paes B，Milner R，et al.Development of the human coagulation system in the Full－tem infant［J］.Blood，1987，70：165.

［3］李建新，徐安平，賴 馨，等.兒童年齡相關(guān)的常規(guī)凝血功能測(cè)指標(biāo)參考區(qū)間的調(diào)查［J］.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2010，12（12）：1193.

［4］徐 剛，劉秋菊，章 文，等.兒童纖維蛋白原兩種測(cè)定方法的比較［J］.國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2008，6（6）：51.

［5］溫奕欣，洪曉鵬.252例健康人凝血參數(shù)參考范圍調(diào)查分析［J］.臨床醫(yī)藥實(shí)踐雜志，2005，5（5）：379.

［6］葉應(yīng)撫，王毓三，申子瑜，等.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程［M］.第3版.東南大學(xué)出版社，2006：210－211.