臨床ABO血型正反定型不一致原因分析及對策

袁志臣

臨床ABO血型正反定型不一致原因分析及對策

袁志臣

目的分析日常工作中常見ABO定型困難原因及可采用的辦法。方法根據ABO正反定型原則，從紅細胞表面及血清中相應的抗體兩方面分析。結果ABO血型正反定型不符原因一般有四種情況;血清中抗體減弱或意外抗體、紅細胞上減弱或缺失或未知的抗原反應。結論正確解決血型正反定型不一致情況，確保臨床輸血安全。

ABO血型;血型亞型;分析;對策

自今紅細胞系已發現26個血型系統，血型抗原有400多種以上。臨床輸血血型鑒定包括正反定型，日常工作中長遇到血型正反定型不一致現象，給鑒定血型帶來了麻煩，現根據情況發表個人的解決辦法，報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本院臨床受血者血液標本1687例。

1.2 方法 留取受血者抗凝血液標本，用條形碼標識防止血液標本搞錯，室溫保存。試劑由上海醫藥公司和長春博德公司提供，均在有效期內使用。

2 結果

見表1。

表1 1687例血型鑒定情況

3 原因分析及對策

3.1 減弱或缺少的抗原反應 ①A或B抗原的亞型;抗原數目的減少，正常1個RBC上有1百萬個A抗原分子，A2有25萬個，A3僅有3萬多個，但亞型RBC上H抗原數增多。疑為A或B亞型，在試驗中可加做RBC與抗AB、抗H反應試驗，因為亞型反應特點是與抗AB、抗H反應比同型更強，對策;正定型用不同廠家，不同來源、效價高的定型試劑，通過加大抗血清反應量、延長反應時間、選擇最合適的反應溫度以及吸收放散試驗來驗證RBC上有無相應的抗原［1］。②疾病狀態;腸癌、急性白血病可導致抗原減弱。如A型急性白血病患者在疾病活動期更變為A3亞型，在疾病緩解期又恢復到原來A型的反應。③過量的血型特異性可溶性物質在患卵巢腫瘤、胃癌、胰腺癌、腸梗阻的情況時，能觀察到多的血型特異性可溶性物質，患者血清中的ABH物質可能極高，可以抑制抗A或抗B試劑的作用，對策;用生理鹽水洗RBC三遍即可。

3.2 未知的抗原反應 ①獲得性A或B抗原;曾有獲得性A報告，Tn活化的紅細胞，能證明具有獲得性A抗原，是因為Tn抗原的免疫性多糖為N-乙酰基半乳糖和A抗原相同的抗原。獲得性B抗原在腸道阻塞或其他下腸道疾患的患者，腸壁的通透性增加使大腸桿菌(血清型O86)的細菌性多糖透過腸壁進入患者血液，使A型人RBC吸附B樣多糖而與抗B抗體發生反應，這種患者在其腸道阻塞或感染受控制后，會恢復原有血型。②改變的抗原;RBC被大多數正常人類血清所凝集的反應稱多凝集反應，包括T抗原活化、Tn抗原活化、Cad多凝集。T活化一般為暫時性的，通常由細菌、病毒、酵母菌引起。Tn抗原活化并不多見，是永久性改變，與血液學方面異常有關;如溶血性貧血、白細胞減少、血小板減少癥。T抗原、Tn抗原活化的細胞有以下5個特點:a)紅細胞膜的唾液酶含量減少。b)與所有正常成人血清發生混合視野型凝集反應。c)不為臍帶血血清凝集。d)不為自身血清凝集、由于缺乏唾液酸因此不為凝集胺凝集。e)M、N表面抗原減少。對策:T抗原活化在室溫反應較強，在37℃反應較弱，一般來講，T活化紅細胞用抗A、抗B試劑作用ABO定型，并無困難，試驗可在37℃下進行。Tn抗原活化用1%的木瓜酶處理Tn活化的紅細胞，以破壞Tn接收器部位，可準確測出ABO血型。Cad多凝集紅細胞上帶大量Sda抗原不為酶的處理所破壞，可利用其與特殊植物凝集素反應而排除。③抗體附著的紅細胞;有抗體稠密的附著的紅細胞，可顯示直抗試驗陽性，可在紅細胞分型法中產生混合視野或減弱的凝集反應，這種情況通常出現自身免疫性溶血性貧血患者，服用抗高血壓藥物，輸血反應及新生兒溶血病的患者。對策;利用放散方法移去附著的抗體，然后與抗A抗B反應，即可得到正確結果。④紅細胞的混合性反應;在ABO細胞分型法中混合視野凝集，通常是指示輸了不同血型的血液，如輸O型血至A型人或A型血至O型人。若新近輸血、骨髓移植的收髓者可排除，應考慮的其他原因有;鉗合現象、A3亞型、白血病、Tn多凝集反應。

［1］ 曹瓊，周華友.改良吸收放散試驗證明異種弱血型抗原．中華現臨床醫學雜志，2006，13(4);96．

466000河南省周口市專科病醫院檢驗科

3.3 減弱的或缺少的抗體反應 ①年齡;新生兒及老年人可顯示種屬抗體的減弱或缺少，對新生兒一般不做反定型。②丙球蛋白過低血癥;丙球蛋白過低血癥的情況包括免疫抑制藥物的應用，白血病、免疫缺乏癥患者及骨髓移植后。③丙球蛋白缺乏血癥;丙球蛋白缺乏血癥可分為先天性和后天性，如常Bruton氏丙球蛋白缺乏血癥以及物理性(放射線)的作用，都可促成丙球蛋白缺乏血癥的發生。④鉗合現象(不常見);真正的鉗合現象很少發現，大半見于雙胞胎的人體，有兩種種群的紅細胞終生存在體內。對策:對減弱的抗體可采取增加反應的血清量、延長反應時間、改變反應溫度(4℃反應)來解決。

3.4 未知的抗體反應 ①緡錢狀形成;能產生緡錢狀的情況有;血清蛋白濃度異常、球蛋白濃度升高、原發性巨球蛋白血癥、纖維蛋白濃度升高、血漿擴張劑(如右旋糖酐)存在、何杰金氏淋巴瘤，新生兒臍帶內華通氏膠也可引起緡錢狀形成。對策;鏡檢，發現緡錢狀凝集，滴加生理鹽水消除。②冷型自身抗體;抗I是血清分型法最常見的自身抗體，抗I通常凝集所有獻血者紅細胞，包括患者自己的紅細胞及分型用的紅細胞。對策;抗I與同型或O型臍帶血紅細胞不凝集，可加以區分。③未知的種屬凝集素包括;A2、A2B、AX、Ael型人血清內產生的抗A1抗體、B3、BX、Bel型人血清中產生的抗B抗體。對策;熟悉ABO亞型血清學反應特點。④未知的同種抗體;抗M、抗 N、抗P1、抗 Lea抗 Leb與部分分型紅細胞反應。對策;在反定型試驗中一定要做O細胞，O細胞凝集可有助于一些鹽水抗體的發現。

3.5 ABO正反定型不一致的解決步驟 正反定型中出現任何意外結果，如在重復試驗中，甚至使用了新鮮標本后，仍出現同樣的結果，有以下步驟可參考;①意外陰性;血清或血漿用以下方法重復，加做自身對照、增加血清反應比例、延長孵育時間、改變反應溫度，鏡檢。紅細胞;洗滌紅細胞、延長孵育時間、改變反應溫度、用不同來源的抗體檢測、鏡檢。對可能的亞型或因為患者年齡、疾病或用藥造成的抗原減弱，可做吸收放散試驗。②意外陽性;血清或血漿做不規則抗體篩選，做自身對照。若出現所有紅細胞包括自身細胞陽性，則考慮自身抗體。若A1細胞陽性，A2細胞和篩選細胞陰性，自身對照陰性，則考慮含抗A1的A或AB亞型。若出現部分細胞陽性，自身細胞陰性，則考慮血清中意外抗體，用譜細胞檢查抗體類型。紅細胞;用溫鹽水洗滌，結果相符，則考慮由冷抗體或緡錢狀凝集造成。若仍不相符，用不同來源診斷試劑、查看患者診斷、輸血史、考慮獲得性B、細胞多凝集等因素。若直抗陽性，則紅細胞放散為直抗陰性再定型。