木犀草素酯化物的制備及其抗氧化活性研究*

吳 春，杜成琨

（哈爾濱商業大學 食品工程學院，黑龍江 哈爾濱 150076）

木犀草素酯化物的制備及其抗氧化活性研究*

吳 春，杜成琨

（哈爾濱商業大學 食品工程學院，黑龍江 哈爾濱 150076）

利用月桂酰氯酯化制備了脂溶性木犀草素。利用正交實驗研究了反應物配比、反應溫度及反應時間對制備木犀草素酯化物的影響。通過紅外光譜對酯化物進行結構表征，并考察木犀草素酯化物在大豆油中的溶解性和抗氧化活性。制備木犀草素酯化物的最佳反應條件是：反應物配比n(木犀草素)∶n(月桂酰氯)=1∶2、反應溫度50℃、反應時間5h，其在大豆油中的溶解度為2.02×104μg/mL，且在相同濃度下，抗氧化活性優于二丁基羥基甲苯(BHT)。結果表明：木犀草素酯化物在大豆油中的溶解度明顯提高，并具有良好的抗氧化性能。

木犀草素;酯化;抗氧化活性

Abstract:In this experiment,lipid soluble luteolin had been synthesized by esterification of lauroyl chloride.The effects of reactants ratio,reaction temperature and time on the preparation of luteolin esters were studied by using the orthogonal experiments.And the structure of the prepared product was characterized by IR spectrum.The solubility and antioxidation properties of the product in soybean oils were examined.The optimal reaction conditions were showed as follows:the molar ratio of luteolin to lauroyl chloride was 1∶2 at 50℃,reaction time was 5h and reaction temperature was 50℃.The solubility of the product in the soybean oils was 2.02×104μg/mL.Under the condition of same concentration,the antioxidation activity of the luteolin laurate was better than BHT in oils.The solubility of the product in soybean oils was improved obviously and the product had good antioxidation properties.

Key words:Luteolin;esterification;antioxidation activity

前 言

木犀草素的化學名為3’,4’,5,7-四羥基黃酮(3’,4’,5,7-Tetralydroxyflanone)，化學式為 C15H10O6[1]。木犀草素是一種廣泛存在的天然黃酮，具有很強的抗氧化性及抗炎、抗癌作用[2]。木犀草素具有良好抗脂質氧化能力，其最適添加量為0.02%左右。標準程序的化學分析研究表明，等摩爾濃度條件下的木犀草素與槲皮素及辣椒素相比，木犀草素具有最強的抗氧化活性[3]。

由于木犀草素難溶于油脂中，限制了其作為天然抗氧化劑的應用。我國許多食用色拉油很容易氧化，即使未出廠貯存在加工廠的貯罐中，一般不超過3個月其POV值都已超標[4]，研發脂溶性木犀草素以應用到食用油脂中，將大大拓展木犀草素的應用市場。將木犀草素進行酯化修飾，就是利用化學合成的方法將木犀草素分子結構的某些部位酯化，這樣可以改善其脂溶性，從而提高其在油脂體系中的抗氧化活性。但是，羥基數的減少會導致自身抗氧化活性降低。因為黃酮類化合物在抗氧化過程中，主要是通過羥基與自由基反應生成較穩定的半醌式自由基，從而終止自由基鏈式反應[5]。為探討化學修飾對木犀草素性能的影響，利用月桂酰氯對木犀草素進行酯化作用，研究制備木犀草素酯化物的條件及酯化物的抗氧化活性。

1 材料與方法

1.1 原料與試劑

木犀草素，98%，北京市奧博星生物技術有限公司；大豆油，市售；月桂酰氯，哈爾濱市東力化學試劑有限公司；吡啶、丙酮等試劑均為分析純。

1.2 儀器與設備

FA2004N電子天平（上海精密科學儀器有限公司）、PC-1000數顯式電熱恒溫水浴鍋（上海躍進醫療器械廠）、SHZ-D（Ⅲ）循環水式真空泵（鞏義市英峪予華儀器廠）、GZX-DH-30×35電熱恒溫箱（上海躍進醫療器械廠）、傅里葉變換紅外光譜儀（德國Bruker光譜儀器公司）

1.3 實驗方法

1.3.1 制備木犀草素酯化物

取木犀草素適量，置于250mL碘量瓶中，加入吡啶10mL和丙酮10mL，磁力攪拌至木犀草素完全溶解，緩慢滴加月桂酰氯，攪拌，置于指定溫度下反應。反應完畢后，將產物倒入過量蒸餾水中，析出大量固體，抽濾，冷水反復洗滌，干燥后得到黃色固體。

1.3.2 木犀草素酯化物的溶解度實驗

取兩個碘量瓶，各盛大豆油100mL，分別逐漸加入木犀草素和木犀草素酯化物。超聲處理10min，然后于37℃，150r/min恒溫水浴中機械震蕩24h，室溫下靜置，觀察木犀草素是否完全溶解。若完全溶解，再加入適量木犀草素，重復上述操作[5]。

1.3.3 木犀草素酯化物的抗氧化活性實驗

采用烘箱恒溫實驗法，取50g大豆油，放入100mL燒杯中，敞口，按一定量加入抗氧化劑，混合均勻，將油樣放入60±0.5℃恒溫培養箱中恒溫保存，每隔24h攪拌一次，并交換它們在培養箱中的位置，定期測定油樣的過氧化值，同時以不加任何抗氧化劑的油樣為空白，作對照比較。POV值的測定采用國家標準GB/T5538-2005進行。

2 結果與討論

2.1 正交實驗結果分析

在單因素的基礎上，對木犀草素酯化反應進行正交實驗，實驗水平及結果分析如下表。

表1 正交實驗因素水平表Table 1 The factors and levels of orthogonal experiment

由表2可以看出，反應物配比對木犀草素酯化物的收率影響較大，反應溫度其次，反應時間影響最小。對木犀草素酯化物收率影響的三個因素的主次關系依次是：反應物配比＞反應溫度＞反應時間。隨著反應溫度的升高，產物收率提高。但溫度越高，木犀草素酚羥基被取代程度越大，相應的抗氧化性就降低，為了保證產物的抗氧化活性，溫度不宜太高，所以取50℃。木犀草素酯化反應的最佳反應條件為：n（木犀草素）∶n（月桂酰氯）=1∶2，50℃反應5h。由方差分析表得知，反應物配比和反應溫度對木犀草素酯化物的收率影響顯著，反應時間對反應的影響不顯著。

表2 正交實驗直觀分析表Table 2 Intuitive analysis of the orthogonal experiment

表3 木犀草素酯化反應方差分析表Table 3 Variance analysis of luteolin esterification

2.2 木犀草素酯化物的結構表征

圖1 木犀草素紅外光譜圖Fig.1 IR spectra of luteolin

通過圖1和圖2可以看出，二者在3420cm-1處均有酚羥基吸收峰存在，酯化物在2900～3000cm-1處有明顯的甲基和亞甲基的特征吸收峰，說明木犀草素已引入了月桂酰氯的脂肪鏈烴。酯化物在1764cm-1處的吸收峰可充分證明木犀草素的羥基已與月桂酰氯發生了酯化反應。

圖2 木犀草素月桂酰氯酯化物紅外光譜圖Fig.2 IR spectra of luteolin laurate

2.3 木犀草素酯化物的溶解度實驗

表4 木犀草素及其酯化物在大豆油中的溶解度Table 4 Solubility of luteolin and luteolin laurate in soybean oils

由表4得出，酯化后的木犀草素在大豆油中的溶解度大大提高，是酯化前木犀草素的27倍。這是因為通過分子修飾，可以提高物質的原有特性，使其作用效果更高更好，另一方面通過引入各種功能基團而賦予其新的生理活性[7]。通過酯化修飾作用，木犀草素引入了親油性基團生成酯。從而提高了脂溶性，能讓木犀草素酯化物更好地應用于油脂當中。

2.4 木犀草素酯化物的抗氧化活性實驗

POV值越低，說明過氧化程度越低，相應的抗氧化效果越好。由表5得知，大豆油中木犀草素酯化物添加量的不同，POV值有所不同。隨著木犀草素酯化物在油中的添加量越多，其POV值越低，抗氧化活性越好。這是因為木犀草素酯化物在油脂中的溶解性增強，抗氧化性隨之提高。在最適添加量0.02%時，有很好的抗氧化活性，能抑制大豆油的氧化，并且優于等濃度的二丁基羥基甲苯（BHT）。

表5 不同添加量的木犀草素酯化物對大豆油抗氧化性的影響Table 5 Effects of various amounts of luteolin laurate on antioxidation activities of soybean oils

3 結 論

通過實驗制備了木犀草素月桂酰氯酯化物，最佳的反應條件是木犀草素與月桂酰氯的摩爾比為1∶2，反應溫度50℃、反應時間5h。木犀草素酯化物在大豆油中的溶解度為2.02×104μg/mL，是酯化前木犀草素的27倍。酯化后的木犀草素除具備了良好的脂溶性外，還保存了良好的抗氧化性能，在最適添加量0.02%時，抗氧化活性優于等濃度的人工合成抗氧化劑BHT。這為木犀草素作為天然抗氧化劑應用于油脂中提供了理論依據。

［1］張偉敏,張盛林.木犀草素的研究現狀［J］.中國食品添加劑,2005(2):11～16.

［2］LI JINGFEN,WANG LISHENG.Synthesis,characterization,and anti-inflammatory activities of rare earth metal complexes of luteolin［J］.Medicinal Chemistry Research,2011(20):88～92.

［3］白海強,劉力恒.木犀草素研究進展［J］.大眾科技,2007(9):132～133.

［4］王洪新,聶小華.油溶性茶多酚—茶多酚脂肪酸酯的研制［J］.食品科學,2004,25(12):92～96.

［5］李衛,鄭成.酯化修飾對二氫楊梅素性能的影響［J］.食品科學,2011,32(1):66～69.

［6］蔡美平,劉陽.木犀草素自乳化制劑處方研究［J］.今日藥學,2010(3):36～38.

［7］劉曉輝,江和源.兒茶素酰基化修飾研究進展［J］.茶葉科學,2009,29(1):1～8.

Synthesis of Luteolin Esters and Its AntioxidationActivity

WU Chun and DU Cheng-kun

（College of Food Engineering,Harbin University of Commerce,Harbin 150076,China）

TQ 314.249

A

1001-0017（2012）02-0016-03

2011-09-07 *基金項目：黑龍江省自然科學基金項目（編號：B201001）

吳春（1962-），女，天津市人，教授，主要研究方向：食品化學。