軍曹魚磷需求量的研究

劉興旺 譚北平 艾慶輝

（1.廣東恒興飼料實業股份有限公司，廣東湛江524094；2.廣東海洋大學水產學院水生經濟動物營養與飼料研究室，廣東湛江524088；3.中國海洋大學教育部海水養殖重點實驗室，山東青島266003）

磷是魚類維持正常生理功能必需的礦物元素，是魚類骨骼、鱗片、核酸及細胞膜的重要構成元素之一[1]。由于天然水體中磷含量較低，飼料磷成為滿足魚類磷需求的主要來源[2]。飼料中可利用磷不足會導致缺乏癥，主要包括生長受阻及骨骼礦化異常等[3]。魚類磷需求量研究的報道不同，可利用磷的需求量在0.3%～0.9%之間[4]。當前，大多數商業飼料中的磷含量能夠滿足水生動物的磷需求。但是飼料中磷過量會導致魚類磷排泄增加，影響水環境生態系統的平衡。因此，人們迫切希望盡量降低飼料中的磷含量，使飼料中的磷既能滿足魚類的最大生長需要又能減少魚類的磷排泄，從而達到保護水環境的目的。軍曹魚（Rachycentron canadum）是我國南方地區重要的海水網箱養殖品種。近年來，關于軍曹魚營養生理的研究已多有報道[5]。周萌等以初始體重22.1 g的軍曹魚為研究對象進行了30 d的攝食生長試驗，得到軍曹魚幼魚飼料中總磷的適宜需要量為0.88%左右[6]。然而，軍曹魚對可利用磷的需求量還不清楚。本研究以軍曹魚為研究對象，通過梯度試驗法確定其飼料中可利用磷的適宜水平，以期為軍曹魚專用配合飼料的開發提供更多理論依據。

1 材料與方法

1.1 試驗飼料

以魚粉、豆粕、酪蛋白為蛋白源配制基礎飼料，分別在每千克基礎飼料中添加0、0.75%、1.51%、2.26%和3.02%的Ca(H2PO4)2，配制成5種等氮、等能的飼料，使飼料中的可利用磷的含量分別為0.62%(日糧1)、0.98%(日糧 2)、1.1%(日糧 3)、1.33%(日糧 4)和 1.71%(日糧5)（見表1）。所有原料粉碎粒度均過320 μm篩網，用F(Ⅱ)-26雙螺桿制粒機加工制成硬顆粒飼料(2.5 mm×3.0 mm)，60℃烘干后保存于-20℃冰柜中備用。另外，日糧1和日糧2中分別添加0.01%的Y2O3，用來測定磷的消化率。

表1 試驗飼料配方及營養成分（%干物質）

1.2 飼養管理

養殖試驗在廣東恒興飼料實業股份有限公司863國家海水養殖種子工程實驗基地進行，海水為常流水，每桶(300 L)進水量為1.0 L/min。養殖期間水溫為(31.0±0.5)°C，鹽度為32.5‰～34.6‰，溶氧維持在7 mg/l左右。選擇大小均勻[(1.80±0.30)g]、體格健壯的軍曹魚幼魚，隨機分配于15個養殖桶中(每個處理組設3個重復),每桶20尾試驗魚。每天早晚投餌2次(9：00、16：00),表觀飽食投喂。飼養試驗共進行8周。試驗過程中，用日糧1和日糧2分別投喂另外2桶魚[40尾/桶、平均體重為（6.2±0.51）g]以測定基礎飼料和磷酸二氫鈣中磷的利用率。投喂15 d后，參照Austreng[7]的方法在投喂3 h后收集糞便。糞便樣品冷凍后在-20℃冰箱內儲存。

1.3 樣品收集及化學分析

養殖試驗結束后，停止喂食24 h，分別稱量每桶魚體總重并記錄魚體個數，計算每桶軍曹魚的平均體重。每桶取5尾魚用于體常規分析。魚體和飼料常規成分分析均采用AOAC[8]的方法。其中，水分的測定為105℃烘干恒重法(24 h)；粗蛋白的測定為凱氏定氮法，采用瑞典TECATOR公司1030型蛋白質自動分析儀；粗脂肪的測定為索氏抽提法；粗灰分的測定為箱式電阻爐550℃灼燒法(16 h)。飼料、糞便中的YO及飼料、糞便和魚體組織中磷的含量采用電感耦合等離子體發射光譜儀（ICP-OES;VISTA-MPX,VARIAN,USA）測定。

1.4 計算與統計分析

試驗飼料磷的表觀消化率（D）參照以下公式計算：

D(%)=[1-(YD×PF)/(YF×PD)]×100。

式中：YD——飼料中Y2O3的濃度；

PF——糞便中磷的濃度；

YF——糞便中Y2O3濃度；

PD——飼料中磷的濃度。

磷酸二氫鈣的表觀消化率（Di）參照以下公式計算：

Di(%)=100×(P2×D2-P1×D1)/I。

式中：P2——含磷酸二氫鈣飼料中磷的濃度；

D2——含磷酸二氫鈣飼料中磷的表觀消化率；

P1——基礎飼料中磷的濃度；

D1——基礎飼料中磷的表觀消化率；

I——含磷酸二氫鈣飼料中無機磷的濃度。

采用單因素方差分析(ANOVA)，當不同處理之間差異顯著(P＜0.05)時，用Tukey’s檢驗進行多重比較分析。所有統計分析均在SPSS 11.0軟件中進行。

2 結果

2.1 磷的表觀消化率

基礎飼料(日糧1)和含有0.75%磷酸二氫鈣的飼料(日糧2)中磷的表觀消化率分別為62.68%和71.87%，由此計算出磷酸二氫鈣的表觀消化率為95.7%。通過計算，各處理組可利用磷的水平分別為0.62%(日糧1)、0.98%(日糧2)、1.1%(日糧3)、1.33%(日糧4)和1.71%(日糧 5)。

2.2 軍曹魚的體增重、特定生長率和飼料系數(見表2)

表2 軍曹魚的體增重、特定生長率和飼料系數

由表2可見，不同處理組試驗魚的成活率在95%～100%，各組之間沒有出現顯著差異。軍曹魚的特定生長率在飼料總可利用磷水平高于0.62%(日糧1)后沒有顯著升高，但是當飼料中可利用磷水平達到1.71%(日糧5)時，軍曹魚的特定生長率顯著低于日糧1組（P＜0.05）。同時發現，飼料中較高的磷水平降低了軍曹魚的飼料利用率，可利用磷為1.33%(日糧4)和1.71%(日糧5)的處理組飼料系數顯著高于低磷處理組（日糧1組）（P＜0.05）。

2.3 魚體組成（見表3）

表3 試驗魚魚體組成

由表3可知，魚體蛋白質含量在14.84%到15.70%之間，水分在76.54%到77.70%之間，各處理組均未出現顯著差異；魚體的粗脂肪含量隨著磷水平的升高而降低，含量在4.32%到5.12%之間；相應的，與脂肪含量負相關，各處理組魚體灰分隨著磷水平的升高而升高。經過56 d的飼養試驗后，軍曹魚魚體組織中磷的含量未出現顯著差異，雖然0.62%磷水平(日糧1)處理組相對較低。

3 討論

本試驗結果顯示，可利用磷水平從0.62%到1.33%之間各處理組軍曹魚特定生長率無顯著差異，表明飼料中0.62%的可利用磷（總磷0.99%）可滿足軍曹魚生長的需要，該結果與周萌等[6]得到的結果非常相近。此外，在鏡鯉(0.67%)[9]、黑線鱈(0.72%)[10]和翹嘴紅鲌(0.88%)[2]等魚類的研究中也得到相似的研究結果。飼料中磷需求量的差異主要受魚種、磷的形式、養殖系統、水溫及魚的生長速度等因素的影響[11]。在本研究中，當飼料中可利用磷水平為1.71%時，軍曹魚的特定生長率與低磷處理組(日糧1組、日糧2組)相比顯著下降（P＜0.05）。在其他研究中也有相似的發現[12]，這可能是因為飼料中過高的磷水平或不適宜的鈣磷比影響了其他礦物元素的利用所導致的，其具體生理機制還有待于進一步的研究。

魚體灰分和磷水平經常被用來作為評定魚類磷營養需求的指標[1]。在本研究中，飼料磷水平影響了魚體的灰分含量。隨著飼料磷水平的升高，魚體灰分呈逐漸升高的趨勢，且1.71%可利用磷處理組魚體灰分顯著高于0.62%組（P＜0.05）。魚體磷含量也有相同的趨勢，雖然在統計上差異不顯著。這說明，以魚體灰分及磷水平為指標時，軍曹魚飼料中適宜的可利用磷水平可能比0.62%要高。在太陽鱸[13]等魚類的研究中也得到相似的結果。這些研究顯示，骨骼及其他魚體組織具有儲存磷的能力，在磷攝入及磷沉積過程中調節磷含量變化來滿足最大生長的需要。

本研究結果顯示，隨著飼料中磷水平的升高，軍曹魚體脂肪呈逐漸降低的趨勢。在斑點叉尾鮰[14]、虹鱒[1]及花[15]等的研究中也都發現相似的現象。一般認為這是因為磷缺乏導致氧化磷酸化損傷，因為磷缺乏限制了TCA循環而使乙酰輔酶A積累的結果。

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