一株三糖鐵反應似志賀菌屬血清學交叉的產毒型大腸埃希菌

嚴卓琳

（浙江省桐鄉市疾病預防控制中心，浙江 桐鄉 314500）

臨床標本中常見的低活性大腸埃希菌利用糖類的能力較不活潑[1]。在SS瓊脂上的形態和在TSI上的生化特征與志賀菌屬相似，且與志賀菌屬有共同抗原[2]，在血清學上常存在交叉凝集，易造成錯誤鑒定。現將一株與鮑氏志賀菌交叉凝集的大腸埃希菌的鑒定及體會報道如下。

1 材料與方法

1.1 菌株來源

桐鄉市腸道門診監測點上送的鮑氏志賀菌，從細菌性痢疾疑似病例大便中分離所得。

1.2 檢測用儀器、培養基及試劑。

1.2.1 儀器

ATB生化鑒定儀。

1.2.2 SS、TSI、MIU培養基和微量生化反應管由北京陸橋生物技術有限公司生產；ATB生化鑒定試劑條ID32E腸桿菌和其他非苛氧性革蘭陰性菌鑒定系統由法國梅里埃公司生產；志賀診斷血清（50種）由蘭州生物制品研究所生產；致病性大腸埃希菌診斷血清、產毒性大腸埃希菌診斷血清、侵襲性大腸埃希菌診斷血清和O157：H7診斷血清由寧波天潤生物藥業有限公司生產。上述試劑均在有效期內使用。

1.3 方法

菌株經普通肉湯增菌后劃SS瓊脂，置37℃培養24h，挑取可疑菌落接種于TSI瓊脂和MIU培養基，置37℃培養24h，用微量生化反應管和ATB生化儀ID32E生化鑒定條進一步生化鑒定，同時做血清凝集試驗。

2 結 果

2.1 培 養特性和細菌形態

在SS瓊脂為無色、圓形、直徑約1.5mm、光滑、濕潤、凸起的半透明菌落；在TSI瓊脂表現為底層黃色，斜面紅色，不產 H2S，不產氣；MIU培養特性為動力陽性，吲哚試驗陽性，脲酶陰性；染色鏡檢：革蘭陰性無芽胞短桿菌。

2.2 生化特征

生化反應結果為氧化酶陰性，苯丙氨酸脫氨酶微量生化反應管陰性，葡萄糖胺微量生化反應管陽性。ID32E生化鑒定結果生化譜64471553500，結果為大腸埃希菌，%id=99.9，T=0.19，見表1。

2.3 血清學試驗

生理鹽水：-，鮑氏志賀1～6型血清：+++，鮑氏Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ各型血清均不凝集，腸產毒性大腸埃希菌OK多價1：+++；O6：K15：+++，其余腸致瀉性大腸艾希菌診斷多價血清均不凝集，O157和H7血清均不凝集。

3 討 論

表1 ATB細菌鑒定儀ID32E生化鑒定結果

臨床上在檢測志賀菌時，為節約時間和成本，存在部分檢驗人員接種SS、MAC平板后挑取不發酵或遲緩發酵乳糖的菌落到TSI上，則報告檢出志賀菌。由于志賀菌屬與大腸埃希菌之間的DNA相關性很高，尤其是與腸侵襲性大腸埃希菌（EIEC）在生化特征上較難鑒別，在血清學上有交叉反應[3]，容易把此種大腸埃希菌誤判志賀菌。

除EIEC外，產毒性大腸埃希菌與志賀菌生化相似血清交叉的也有文獻報道[4]。本次分離到的ETEC也不分解乳糖，分解葡萄糖產酸不產氣，且與鮑氏志賀菌屬有交叉反應，易判斷為志賀菌。但其動力、賴氨酸脫羧酶和葡萄糖胺均陽性，可基本排除志賀菌屬[5]，結合微量生化鑒定結果和ID32E生化鑒定結果及腸致瀉性大腸埃希菌診斷血清的凝集結果，判斷為腸產毒性大腸埃希菌O6：K15型。因此SS培養基和三糖鐵反應類似志賀菌株，某些致瀉性大腸埃希菌（DDEC）仍不能排除，即使是某些血清學反應符合的菌株，也應結合生化反應結果才能做出判斷，否則會引起鑒定結果的錯誤。

[1] 高雯潔，張建平，沈志英，等.一株與福氏志賀菌1a交叉凝集的低活性大腸埃希菌[J].中國衛生檢驗雜志，2007，17(11)：2115-2116.

[2] 齊小秋.痢疾防治手冊[M].北京：人民衛生出版社，2006：47.

[3] 俞樹榮.微生物學和微生物學檢驗[M].2版.北京：人民衛生出版社，1997：174.

[4] 高亞色.檢出一株雙糖鐵反應似志賀氏菌屬血清學交叉的產毒型大腸埃希菌[J].海峽預防醫學雜志，2005，11(5)：55-56.

[5] GB/T4789.5-2003.食品衛生微生物學檢驗志賀氏菌檢測[S].2003.