靜止型α-地貧篩查方法的分析及意義

賴兆新 歐麗榮

（廣州市海珠區(qū)婦幼保健院，廣東 廣州 510240）

地中海貧血（以下簡稱地貧）是由于一種或多種珠蛋白鏈合成異常所引起的遺傳血紅蛋白病。地貧有明顯地理分布特征，多見于我國南方如廣東、廣西及其他沿海地區(qū)。根據(jù)肽鏈異常可分為α和β-地貧，α-地貧根據(jù)二倍染色體基因組共有4個α基因，正常人自父母各繼承2個α珠蛋白（αα/αα）[1]，α-地貧根據(jù)基因缺失不同又分為靜止型（1個基因缺失）；標準型（2個基因缺失）；HbH病（3個基因缺失）；最嚴重HbBαrt，S病（4個基因缺失）。目前臨床上無根治的方法，但我們可通過婚檢、產(chǎn)檢早期進行地貧的篩查，指導婚配、生育，以預防重型地貧兒出生，減輕社會、家庭的經(jīng)濟負擔。目前國內(nèi)較常的檢查項目是血常規(guī)的MCV、紅細胞脆性試驗及Hb電泳[2]。在這里我主要介紹我室篩查靜止型α-地貧的主要檢查項目，包括MCV、鏡下紅細胞形態(tài)及Hb電泳。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2010年1 月至2011年8月期間在我院做產(chǎn)檢及婚檢的220例經(jīng)基因確診為靜止型的α-地貧患者。

1.2 檢查方法

①樣本采集：取靜脈血2mL，EDTΑ抗凝。②MCV測定：采用日本SystemKx-21自動血細胞分析儀及其配套的稀釋液和溶血素試劑測定，實驗前嚴格按照操作規(guī)程進行質(zhì)控。MCV正常值為82～100fL、異常值為＜82fL。③Hb電泳分析：采用美國Helenα公司的SPIfe comboHb電泳儀，使用與儀器配套的SPIFE ΑLKΑLINE（pH 8.6），Hb瓊脂凝膠板，掃描儀是EPSon公司Quick-scαn2000。HbΑ2正常值：2.5%～3.5%。④鏡下觀察紅細胞形態(tài)、Heinz小體：取0.0004mol/L美蘭液及1.25%亞硝酸葡萄糖液1∶1配制，加0.78%NaCl按1∶9配成反應液，加靜脈血一滴水浴3～6h，取出加10%龍膽紫一滴再水浴30min，濕片鏡檢。⑤α-地貧基因診斷：α-地貧試劑由亞能生物技術（深圳）有限公司提供，PCR擴增儀為美國MJPTC-200，嚴格按說明書進行操作。

2 結 果

對220例確診為靜止型α-地貧作回顧性分析，以MCV的值分成三部分截斷值來分析，結果顯示：MCV≤80fL共66例，鏡下RBC形態(tài)有66例全部異常；有56例電泳未見異常（2.5%～3.5%），只有10例HbΑ2異常（＜2.5%）。MCV：80～82fL共66例，鏡下RBC形態(tài)異常有57例，正常有9例；電泳未見異常有58例，電泳HbΑ2異常有8例。MCV＞82fL共88例，鏡下RBC形態(tài)異常有65例，正常有23例；電泳未見異常有83例，電泳HbΑ2異常有5例。

2.1 三種方法分析見表1。

表1 靜止型α-地貧篩查方法的分析

2.2 MCV與RBC形態(tài)關系見圖1。

2.3 MCV與電泳關系見圖2。

從表1及其關系圖1和2可初步分析靜止型α-地貧MCV＞80fL有154例占總數(shù)70%，MCV≤80fL有66例占總數(shù)30%，RBC形態(tài)異常占85.45%，電泳異常占10.46%，對于靜止型α-地貧單用一種篩查方法檢出率比較低。

3 討 論

地中海貧血是一組珠蛋白生成障礙性貧血，也是我國南方重點防治的遺傳性溶血性疾病。地貧患者可出現(xiàn)不同程度貧血，目前臨床上尚無根治的方法。

目前篩查地貧的方法很多，國際上并無統(tǒng)一的臨床檢驗方法[3]。我室開展MCV、鏡下觀察RBC形態(tài)及Heinz小體檢查、Hb電泳分析來分別進行分析，任何一種檢測方法出現(xiàn)陽性即判斷Hb分析篩查陽性，目的是擴大產(chǎn)檢及婚檢的篩查面，減少漏診。但是，我的分析顯示220例靜止型α-地貧的電泳結果異常只占10.46%，88例MCV＞82fL電泳結果異常只有5例，其中有2例復合HbG。由此可見，Hb電泳分析用于診斷靜止型α-地貧意義不大。

從本組資料中觀察靜止型α-地貧鏡下RBC形態(tài)異常188例占85.45%（本室鏡下觀察到RBC中央淡染區(qū)擴大；見多形性細胞；見Heinz小體為異常）。66例MCV≤80fL，RBC形態(tài)異常為100%；66例MCV：80-82fL，RBC形態(tài)異常占86.37%；88例 MCV＞82fLRBC形態(tài)異常占73.86%。雖然RBC形態(tài)異常陽性率隨著RBC的MCV升高有所降低，但這三種方法中仍以RBC形態(tài)異常陽性率最高。220例靜止型α-地貧有66例MCV≤80fL占30%；有57例 MCV＞80～82fL占30%；有88例 MCV＞82fL占40%。MCV＜80fL用于標準型地貧、HbH病、β-地貧和α、β混合型地貧的篩查價值較高，但單一用來篩查靜止型α-地貧易出現(xiàn)漏診[4]。為了提高檢出靜止型α-地貧，故應該把MCV的截斷值設為≤82 fL為異常，這樣可減少漏診。

綜上所述，綜合運用Hb電泳、MCV及鏡下RBC形態(tài)作為篩查靜止型α-地貧具有較高的實用價值。在本實驗中220例靜止型α-地貧有17例MCV＞87fL，可見有部分靜止型α-地貧患者，其血液學指標可無明顯異常，且沒有其他異常的臨床表現(xiàn)[5]，為了避免漏檢導致的重型地貧兒的出生，所以我們建議夫妻雙方做地貧篩查一方陽性經(jīng)基因確診α-地貧，建議另一方也進行α-地貧基因確診，以減輕社會、家庭的經(jīng)濟負擔。

[1]譚齊賢.臨床血液學和血液檢驗[M].3版.北京：人民衛(wèi)生出版社,2003：147.

[2]蔡稔,梁昕,潘麗珍,等.血液學指標在育齡人群地貧篩查中的診斷價值[J].中國優(yōu)生與遺傳雜志,2003,11(1)：129-132.

[3]胡志愿,郭璐娣,劉俊峰,等.紅細胞參數(shù)和紅細胞形態(tài)學聯(lián)合檢測在地中海貧學篩查中應用[J].中國煤炭工業(yè)醫(yī)學雜志,2008,12(11)：1844-1845.

[4]沈寅琛.平均紅細胞體積和血紅蛋白量在篩查地中海貧血中的價值[J].中國優(yōu)生與遺傳雜志,2011,19(1)：62-63.

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