尿液有形成分定量分析方法學(xué)探討

張秋菊 賈莉婷 王丹

尿液有形成分分析是尿液常規(guī)檢查中的重要組成部分，是臨床診斷疾病和病程評估的重要依據(jù)。隨著科技的發(fā)展，尿液有形成分分析的檢測水平不斷提高。在實踐中，不同的檢測方法在識別和計數(shù)各種有形成分時與標(biāo)準(zhǔn)方法的測定結(jié)果存在一定差異。筆者采用AVE-763B、UF-1000i、不離心鏡檢法3種方法對不同尿液標(biāo)本進(jìn)行檢測，比對這兩種機(jī)器性能，探討差異的原因，尋找更準(zhǔn)確方法。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選擇門診及住院患者324人份新鮮尿液標(biāo)本(經(jīng)人工顯微鏡確定挑選異常標(biāo)為主)。

1.2 方法 采用AVE-763B全自動尿有形成分分析儀、UF-1000i全自動尿沉渣分析儀、KOVA尿液定量計數(shù)板鏡檢法，分別測定尿液中有形成分(紅細(xì)胞、白細(xì)胞、管型)。患者留取晨尿，留取標(biāo)本前清洗尿道口，采集后2 h內(nèi)完成檢測。儀器法測定，嚴(yán)格按儀器說明書操作步驟進(jìn)行操作。

1.3 參考范圍依據(jù) UF-1000i參考范圍：紅細(xì)胞≤28個/μl，白細(xì)胞≤28個/μl。AVE-763B參考范圍：紅細(xì)胞≤7個/μl，白細(xì)胞≤14個/μl。不離心鏡檢法：紅細(xì)胞≤7個/μl，白細(xì)胞≤14個/μl。考慮目前尿液有形成分沒有統(tǒng)一定量參考范圍，本實驗以全國6個城市(北京、長沙、南昌、武漢、杭州、西安)的9家醫(yī)院對健康人群調(diào)查所得尿液有形成分參考范圍為依據(jù)[1]。

2 結(jié)果

通過AVE-763B全自動尿液有形成分分析儀、UF-1000i全自動尿沉渣分析儀、不離心定量計數(shù)板鏡檢法3種方法對324例尿液標(biāo)本測定，結(jié)果以不離心鏡檢法為金標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行統(tǒng)計。見表1、表2。

表1 白細(xì)胞對照結(jié)果分析表 例

表2 紅細(xì)胞對照結(jié)果分析表 例

對白細(xì)胞AVE-763B全自動尿液有形成分分析儀與不離心鏡檢法的符合率為94.75%，UF-1000i與其符合率為89.81%。對紅細(xì)胞AVE-763B全自動尿液有形成分分析儀與不離心鏡檢法的符合率為90.12%，UF-1000i與其符合率79.32%。

3 討論

尿液有形成分分析是尿液分析中不可缺少的重要內(nèi)容。尿液分析對泌尿系統(tǒng)疾病、腎臟疾病、循環(huán)系統(tǒng)疾病及感染性疾病等有重要的診斷及鑒別診斷意義，也是臨床用藥檢測、健康普查的一項重要手段。

3.1 對尿液中紅細(xì)胞的鑒別 對紅細(xì)胞AVE-763B全自動尿液有形成分分析儀與不離心鏡檢法的符合率為90.12%，UF-1000i 與其符合率為79.32%。其中不離心鏡檢為陽性而UF-1000i陰性的有27例，AVE-763B陰性10例，有10例UF-1000i測定結(jié)果與AVE-763B、不離心鏡檢法檢測結(jié)果相差顯著，筆者認(rèn)為尿液中紅細(xì)胞有多種形態(tài)，特別是腎性紅細(xì)胞，可呈環(huán)形、盔形、橢圓形、多邊形、芽胞形、小型固縮形等多種形態(tài)，增加了儀器判讀鑒別的難度。有文獻(xiàn)報道制備紅細(xì)胞懸液進(jìn)行對比分析符合率較高[2]，筆者認(rèn)為因制備紅細(xì)胞形態(tài)接近正常，易于機(jī)器辨認(rèn)。

3.2 尿液中白細(xì)胞的鑒別 對白細(xì)胞AVE-763B全自動尿液有形成分分析儀與不離心鏡檢法的符合率為94.75%，UF-1000i與其符合率為89.81%。在尿液中，白細(xì)胞形態(tài)變化受尿液滲透壓和酸堿度的影響較大，由于炎癥程度的加重發(fā)生變性而出現(xiàn)形態(tài)改變，內(nèi)部結(jié)構(gòu)崩解，體積膨脹，邊緣不清，白細(xì)胞常聚集成團(tuán)，稱濃細(xì)胞，再加上小圓上皮細(xì)胞和逆行上皮細(xì)胞體積與膨脹變性的白細(xì)胞在顯微鏡下的形態(tài)特點非常相近，故儀器容易誤判。

3.3 尿液中管型的鑒別 對分析的324例尿液標(biāo)本，AVE-763B經(jīng)“人工輔判”后檢測出管型11例，UF-1000i檢測出管型65例，不離心鏡檢法檢測出管型10例。UF-1000i對管型的測定假陽性率高，測定結(jié)果也明顯高于不離心鏡檢法，實際臨床檢驗工作中發(fā)現(xiàn)黏液絲，上皮細(xì)胞對管型檢測結(jié)果有明顯干擾[3]。而AVE-763B經(jīng)人工輔判后和不離心鏡檢法比較接近。

3.4 顯微鏡檢測技術(shù) 尿液中紅細(xì)胞、白細(xì)胞的顯微鏡檢測技術(shù)，目前國內(nèi)外尚無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，主要有離心鏡檢、不離心鏡檢及倒置顯微鏡鏡檢法。有文獻(xiàn)報道，不離心鏡檢法直接計數(shù)尿紅細(xì)胞、白細(xì)胞，能較真實地反映尿中紅細(xì)胞、白細(xì)胞濃度，接近真值[4]。

3.5 AVE-763B全自動尿液有形成分分析儀、全自動尿沉渣分析儀UF-1000i檢測原理 全自動尿沉渣分析儀UF-1000i檢測原理是對尿液標(biāo)本染色后，利用流式技術(shù)和電阻抗原理，以熒光、散射光和電阻抗的信號技術(shù)識別計數(shù)紅細(xì)胞、白細(xì)胞、上皮細(xì)胞、細(xì)菌、結(jié)晶等[5]，由于尿液有形成分復(fù)雜，有時受干擾物質(zhì)影響會產(chǎn)生假陽性或假陰性。AVE-763B全自動尿液有形成分分析儀利用“機(jī)器視覺”技術(shù)，實現(xiàn)顯微鏡檢識別全自動化。通過攝像頭自動地在低倍鏡下對大量的尿液標(biāo)本中各種有形成分進(jìn)行掃描，計算機(jī)自動準(zhǔn)確定位后，再在高倍鏡下對所采集的有形成分圖像進(jìn)行分析、處理、并與已建立的各種有形成分的模型數(shù)據(jù)庫進(jìn)行對比分析，計數(shù)紅細(xì)胞、白細(xì)胞、結(jié)晶等定量結(jié)果[6]。對分析的324例尿液標(biāo)本，UF-1000i有11例(紅細(xì)胞9例，白細(xì)胞2例)測定結(jié)果明顯高于不離心鏡檢法。鏡檢確認(rèn)由草酸鈣結(jié)晶、非晶型鹽類結(jié)晶、真菌、精子、細(xì)菌等因素引起。AVE-763B有7例因結(jié)晶、真菌、精子、黏液絲等因素影響細(xì)胞計數(shù)結(jié)果，可通過軟件“人工輔判”功能直接對圖像分析進(jìn)行審核報告，糾正不必要的錯誤信息。對細(xì)胞濃度過高的標(biāo)本，如肉眼血尿和膿血尿，AVE-763B、UF-1000i測定結(jié)果與不離心鏡檢法計數(shù)結(jié)果相差較大(儀器測定值比鏡檢法要低)，應(yīng)將標(biāo)本稀釋后再進(jìn)行檢測。

綜上所述，經(jīng)“人工輔判”AVE-763B測定白細(xì)胞、紅細(xì)胞、管型與不離心鏡檢法的檢測結(jié)果優(yōu)于其他類型儀器。還應(yīng)指出，鏡檢是形態(tài)學(xué)檢查的金標(biāo)準(zhǔn)，儀器分析細(xì)胞仍存在許多局限性。在產(chǎn)生疑問時，仍需顯微鏡檢確診，決不能不加分析作為確診依據(jù)。

[1] 叢玉隆，馬駿龍，岳秀玲，等.中國健康人群尿液顯微鏡檢測法有形成分結(jié)果調(diào)查[J].臨床檢驗雜志，2006，24(2)：81-84.

[2] 叢玉隆，馬俊龍，張時民，等.尿液細(xì)胞成分定量分析方法學(xué)研究[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2006，29(3):211-214.

[3] 郭慧，王萍等.干化學(xué)法UF-1000i尿沉渣分析儀檢測結(jié)果與手工法檢查的一致性觀察[J].實用醫(yī)技雜志，2011，18(2):168-169.

[4] 叢玉隆，馬駿龍.尿沉渣測定四種方法參考值范圍調(diào)查[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志，1997，20(4):229-231.

[5] 張時民.實用尿液有形成分分析技術(shù)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社，2008:148-151.

[6] 叢玉隆.現(xiàn)代尿液分析技術(shù)與臨床[M].北京:人民軍醫(yī)出版社，2007:162-164.