纈沙坦和依那普利聯用對高血壓大鼠一氧化氮、內皮素及心肌重塑的影響

張志強 李濟福

（河南平頂山中平能化醫療集團總醫院急診科，河南 平頂山 467000）

血管緊張素轉換酶抑制劑（ACEI）和血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑（ARB）是目前臨床常用且有效的降壓藥物，一般認為二者具有良好的降壓效果和明顯的心臟血管保護作用[1]。但聯合應用的療效是否優于單用，是近年來爭議的焦點。為此我們聯合應用纈沙坦和依那普利對原發性高血壓大鼠進行了動物對照實驗，以探討這兩種藥物聯用后對心肌重塑以及一氧化氮（NO）、內皮素（ET）的影響。

1 材料與方法

1.1 一般資料

12周齡雄性自發性高血壓大鼠（SHR）40只（上海高血壓研究所實驗動物中心提供），隨機分成4組，每組10只。SHR對照組、纈沙坦組[30mg/（kg?d）]、依那普利組[10mg/（kg?d）]、二者聯用組[纈沙坦15mg/（kg?d） +雷米普利5mg/（kg?d）]，灌胃1次/d。纈沙坦（諾華公司產品），依那普利（揚子江制藥股份有限公司產品），3個月后分別測定左心室重量指數（LVMI）、心肌膠原含量（MCC）及心肌膠原容積分數（CVF），血清NO和ET值。

1.2 血清NO和ET測定

表1 三組LVMI、MCC、CVF及血清ET和NO水平比較 (±s)

表1 三組LVMI、MCC、CVF及血清ET和NO水平比較 (±s)

注：與SHR組比較，*P＜0.05，△P＜0.01

分組 只數 LVMI(mg/g) MCC(mg) CVF(%) ET(pg/mL) 血清NO(μmol/L)SHR組 10 4.6±0.7 43.6±10.8 6.8±1.9 91.5±10.8 21.2±3.4纈沙坦組 10 3.7±0.4* 30.5±7.1* 4.4 ±0.9* 73.5±7.5* 32.2±5.6*依那普利組 10 3.5±0.4* 31.4±7.5* 4.6 ±1.1* 75.6±7.6* 31.5±5.2*聯用組 10 3.0±0.3△ 25.7±5.6△ 3.5±0.7△ 62.4±5.8△ 40.3±6.4△

3個月后抽取下腔靜脈血2mL，注入含10%乙二胺四乙酸二鈉30μl+抑肽酶40μL的試管中，搖勻后3000r/min離心10min，分離血漿后置于-80℃冰箱保存待側。集中測定前將標本置于冷水中復融，3000r/min離心5min后取上清液，按ET放免盒說明書進行操作。NO測定采用硝酸還原酶法。NO試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

1.3 心臟標本的分析

處死大鼠后開胸取出心臟，剪開心腔后用預冷的生理鹽水洗掉血液，濾紙吸干水分，再用電子天平稱取左心室實際質量，與體質量相除后得出左心室的相對質量，即左心室質量指數（LVMI）。參照Bergerman方法測定大鼠左室心肌的羥脯氨酸濃度。膠原質量分數（%）=羥脯氨酸濃度×8.5；膠原質量（mg）=膠原質量分數×左室質量[2]。

2 結 果

纈沙坦組、依那普利組和聯用組的LVMI、MCC和CVF均下降，與對照組比較差異有顯著性（P＜0.05），其中聯用組效果優于纈沙坦組和依那普利組；三組的ET均下降，NO均升高，與對照組比較差異有顯著性（P＜0.05），其中聯用組效果優于纈沙坦組和依那普利組。見表1。

3 討 論

近年來的研究表明，心肌肥厚不僅包括心肌細胞的肥大，還包括內皮細胞、血管平滑肌細胞和成纖維細胞等非肌性細胞的增殖和細胞外間質的異常沉積。有研究[3]顯示高血壓大鼠形成心肌肥厚后，隨著時間的推移，心肌重量指數增長呈現下降趨勢，而心肌膠原含量和心肌膠原容積分數呈明顯上升趨勢，因此高血壓大鼠心肌重塑表現為早期的心肌肥厚為主，和后期的膠原沉積為主，而心肌逐漸萎縮。這也可能是長期高血壓作用導致左心功能不全的主要原因[4]。ACEI類降壓藥物是通過抑制AngⅡ轉換酶達到降壓的目的，而ARB類降壓藥物則是通過競爭性的結合于AngⅡ型受體起到降壓作用，已經有研究[5]表明它們可明顯改善心肌和動脈重塑，從而降低心腦血管疾病的發病風險，但對于它們改善心肌和動脈重塑的機制研究較少。本研究結果顯示纈沙坦、依那普利組和二者聯用三組的LVMI、MCC和CVF均明顯下降，與對照組比較差異有顯著性（P＜0.05），同時發現纈沙坦、依那普利聯用組效果優于單獨應用。說明纈沙坦和依那普利均具有改善心肌重塑的作用，并且二者聯用效果會更好。

ET是一組由21個氨基酸組成的具有強烈縮血管作用的三肽家族，具有促進有絲分裂或輔助絲分裂的強有力縮血管作用。研究[6]顯示ET通過激活血管壁的氧化應激反應導致炎癥反應，進而誘導高血壓模型大鼠的血管重塑和內皮功能障礙。同時很多人體試驗也證明了ET在許許多多心血管疾病中促進了血管重塑和終末器官損害。本研究發現對照組血清ET水平顯著高于正常范圍，就提示高血壓大鼠存在明顯的內皮功能障礙。并且纈沙坦組、依那普利組和二者聯用三組的ET均明顯下降，與對照組比較差異有顯著性（P＜0.05），其中聯用組效果優于纈沙坦組和依那普利組。說明纈沙坦和依那普利均具有改善血管內皮細胞功能的作用，并且二者聯用對改善血管內皮細胞功能更加顯著。

NO是一種具有強活性的自由基氣體，是非常重要的血管舒張因子，具有擴血管、改善血流灌注和減少缺血性損傷，抑制血管平滑肌細胞增殖和抑制血小板的黏附聚集作用[7]。高血壓大鼠模型可能就因擴血管因子NO合成減少，導致血管張力調節失衡所致。一般認為內皮細胞的功能完整與否，需要依賴ET與NO等血管活性物質的動態平衡[8]。本組高血壓大鼠模型中的血清ET水平增高，而NO水平降低，提示高血壓大鼠血管內皮功能損害，血管張力調節失衡。本研究發現纈沙坦組、依那普利組和二者聯用三組的NO均明顯上升，與對照組比較差異有顯著性（P＜0.05），其中聯用組效果明顯優于纈沙坦組和依那普利組。提示纈沙坦和依那普利均具有提高NO水平，改善血管內皮細胞功能的作用，尤其二者聯用對改善血管內皮細胞功能更加顯著。

綜上所述，小劑量聯合應用纈沙坦和依那普利可以提升血清NO水平，降低ET水平，改善血管內皮細胞功能，并能夠抑制心肌肥厚，改善心肌重塑，并起到協同作用，其協同作用機制有待進一步研究。本實驗為小劑量的ACEI和ARB聯合應用治療高血壓提供了臨床應用的依據。

[1] 黨愛民,陳改玲,劉國慶.高血壓的藥物治療進展[J].中國全科醫學,2004,7(6)：691.

[2] 孫敬芳.動物實驗方法學[M].北京：人民衛生出版社,2001：564.

[3] 王雙,萬載陽,唐朝克,等.兩腎一夾型腎高血壓大鼠重塑血管對血緊張素Ⅱ反應變化及其機制[J].中國動脈硬化雜志,2003,11(6)：501-504.

[4] 袁萍,商黔惠,吳芹,等.厄貝沙坦對腎性高血壓大鼠左心室肥厚心肌腺苷三磷酸酶和鈣調神經磷酸酶的影響[J].中華高血壓雜志,2009,17(3)：238-242.

[5] 周珂,李庚山,余紹祖.氯沙坦對自發性高血壓大鼠腎素血管緊張素Ⅱ水平的影響[J].卒中與神經疾病,2000,7(3)：150-152.

[6] 張均華.血管內皮功能障礙與冠狀動脈疾病[J].中華老年心腦血管病雜志,2002,4(1)：3-5.

[7] 鄭永紅,白玉茹,胡錫衷.小劑量聯合應用纈沙坦和雷米普利對原發性高血壓大鼠體內NO水平及心肌重塑的影響[J].中國全科醫學,2007,10(3)：211-212.

[8] 胡威,商黔惠,姜黔峰.依那普利、厄貝沙坦單用和聯用對高血壓大鼠主動脈重塑與中膜鈉泵及鈣泵的影響[J].中華高血壓雜志,2010,18(6)：528-529.