基質(zhì)金屬蛋白酶-2在口腔鱗癌中的表達(dá)及意義

張玉新

口腔鱗癌(OSCC)患病率和死亡率較高，而浸潤和轉(zhuǎn)移是造成其不良預(yù)后的主要因素，早期診斷非常重要。有研究表明基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)的活性和表達(dá)的增加與人類多種惡性腫瘤浸潤轉(zhuǎn)移潛能及預(yù)后密切相關(guān)［1］。作者采用免疫組化方法檢測OSCC中MMP-2的表達(dá)，分析其與OSCC浸潤轉(zhuǎn)移的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 30例口腔鱗癌標(biāo)本取自作者單位2009～2011年手術(shù)切除標(biāo)本，10例正常口腔黏膜標(biāo)本取自作者單位同期非腫瘤患者手術(shù)切除標(biāo)本。30例口腔鱗癌病例術(shù)前未經(jīng)化療、放療或其他生物治療，經(jīng)病理證實(shí)，其中19例為深層浸潤(浸潤累及肌層、骨質(zhì)或深層腺體)，11例為淺層浸潤(腫瘤局限于黏膜及黏膜下層)。全部標(biāo)本經(jīng)10%甲醛固定，石蠟包埋，4 μm厚連續(xù)切片。

1.2 方法 采用免疫組化SP法(試劑均購于福州邁新生物工程有限公司)，以MMP-2即用型鼠抗人多克隆抗體標(biāo)記MMP-2，抗原修復(fù)采用檸檬酸組織抗原修復(fù)液進(jìn)行加熱抗原修復(fù)，嚴(yán)格控制實(shí)驗時間、實(shí)驗溫度和各種試劑濃度等條件，按照說明書進(jìn)行染色，以0.01 mol/LPBS液代替一抗做陰性對照，陽性對照切片由試劑公司提供

1.3 結(jié)果判定 MMP-2免疫組化陽性信號位于細(xì)胞漿內(nèi)，呈棕色或棕黃色顆粒，依照陽性細(xì)胞密度計分:0%，0分;＜25%，1分;25% ～50%，2分;＞50%，3分。＜2分者為(-)，≥2分者(+)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 14.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，采用χ2檢驗，P＜0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 MMP-2的表達(dá) MMP-2陽性信號位于OSCC細(xì)胞胞漿中，口腔鱗癌組織中，MMP-2的陽性率為76.7%(23/30)，正常口腔黏膜中，MMP-2的陽性率為10%(1/10)，兩者相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，見表1。

2.2 MMP-2的表達(dá)與口腔鱗癌浸潤深淺程度的關(guān)系 研究表明，在深層浸潤的口腔鱗癌組織中，MMP-2的陽性表達(dá)率顯著高于淺層浸潤的口腔鱗癌組織，兩者相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，見表2。

表1 MMP-2在口腔鱗癌及正常口腔黏膜中的表達(dá)

3 討論

表2 MMP-2表達(dá)與口腔鱗癌臨床病理特征的關(guān)系

浸潤轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤的重要生物學(xué)特征，浸潤主要是指癌細(xì)胞侵犯和破壞周圍正常組織，進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)的過程，同時癌細(xì)胞在繼發(fā)組織器官中定位生長也包含浸潤，浸潤的實(shí)現(xiàn)取決于腫瘤細(xì)胞對正常組織的破壞能力，腫瘤本身可產(chǎn)生多種分解酶降解細(xì)胞外基質(zhì)及基底膜，基質(zhì)蛋白酶在這一過程中起重要作用［2］。與腫瘤浸潤轉(zhuǎn)移有關(guān)的基質(zhì)金屬蛋白酶主要是MMP-2。MMP-2的主要水解底物是變性膠原及細(xì)胞外基質(zhì)(BM)的主要成分Ⅳ型膠原和Ⅴ型膠原等。大多數(shù)口腔鱗癌呈高度局部破壞性，并由于侵犯周圍組織器官而危及生命。在口腔鱗癌浸潤及轉(zhuǎn)移過程中，細(xì)胞外基質(zhì)和基底膜的降解和破壞是重要的環(huán)節(jié)。MMP-2在腫瘤細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞外基質(zhì)和基底膜降解中起關(guān)鍵作用。有研究者對高轉(zhuǎn)移和非轉(zhuǎn)移口腔癌細(xì)胞株的MMP-2表達(dá)進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)高轉(zhuǎn)移口腔癌細(xì)胞株主要表達(dá)MMP-2，且MMP-2的活性與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和對局部下頜骨浸潤顯著相關(guān)［3］。活化的MMP-2定位于細(xì)胞穿透基質(zhì)的突出部位，估計其有‘鉆頭'的作用。該組實(shí)驗免疫組化染色顯示MMP-2蛋白主要表達(dá)于口腔鱗癌的細(xì)胞漿內(nèi)，在浸潤至肌層、骨質(zhì)、深層腺體口腔鱗癌組織中的表達(dá)顯著高于位于黏膜及黏膜下的表達(dá)。提示MMP-2可能是口腔鱗癌具有高轉(zhuǎn)移高浸潤能力的分子基礎(chǔ)。

［1］Jouce ER.Matrix Metailopmteinases.Angiogenesis，and Cancer Clinical.Cancer Research，2003:549.

［2］Fan J，Shing Y，Wienderschain D，et al.Matrix met alloproteinase-2 is required for the swich to the angiogenic phenotype in a tumomodel.Proc Natl Acad Sci USA，2000，97(21):3884.

［3］張 鋒，謝志堅，宋 恩，等.口腔鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶2表達(dá)與頸淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移的關(guān)系.口腔醫(yī)學(xué)，2008，24(1):15.