炒制東北蒼耳子Xanthium mongolicum化學(xué)成分研究

白玉華，張秀花，于 輝，韓成花，劉金成，于春月，康艷萍

哈爾濱醫(yī)科大學(xué)大慶校區(qū)，黑龍江大慶 163319

蒼耳屬Xanthium L.植物全世界有20 多種，主要分布在北美州及中國各地，我國有三種及一個(gè)變種。蒼耳屬在民間主要用于散風(fēng)除濕、通鼻竅、風(fēng)寒頭痛、鼻淵流涕、風(fēng)疹瘙癢、濕痹拘攣等癥[1]，蒼耳子為植物蒼耳的成熟帶總苞的果實(shí)，用于利尿、催吐、前列腺疾病、肝炎和癌癥[2]，收載于《中國藥典》2010年版[3]。蒼耳子的化學(xué)成分比較復(fù)雜，許多種類的化合物如蒼耳苷、羧基蒼耳苷、噻唑酮、倍半萜內(nèi)酯、蒼耳素等被報(bào)道存在于蒼耳的莖、葉及果實(shí)中[4]。蒼耳子的種子和仔苗有毒，可引起麻痹，大劑量使用蒼耳子會(huì)引起致死性的腎病及肝功能衰竭，嚴(yán)重者甚至死亡[5]，故臨床應(yīng)用時(shí)常將蒼耳子進(jìn)行炮制以減小毒性[3]。炮制過程通常會(huì)影響化學(xué)成分及其組成，因此研究炮制后蒼耳子的化學(xué)成分顯得尤為重要。

1 儀器與試藥

柱色譜用硅膠為青島海洋化工生產(chǎn)（200～300 目），制備薄層色譜板為青島海洋化工生產(chǎn) （GF254 目）；核磁共振儀（BrukerAM400 型，瑞士）；所用有機(jī)溶劑為分析純。

蒼耳子于2009年9月采摘于哈爾濱醫(yī)科大學(xué)校園內(nèi)，經(jīng)魏東華教授鑒定為東北蒼耳Xanthium mongolicum，標(biāo)本存放于中藥標(biāo)本館，批號：20091115。

2 方法與結(jié)果

2.1 方法

2.1.1 炮制方法 取藥材5 kg，置炒制用的鐵鍋中，用文火加熱并不斷翻炒至微黃色時(shí)，取出，放涼。將炒制好的藥材經(jīng)中藥粉碎機(jī)粉碎成粗粉后待用。

2.1.2 提取方法 藥材粗粉用40 L甲醇進(jìn)行超聲提取3次，每次1 h，過濾，合并濾液，經(jīng)減壓濃縮得黏稠的膏狀物450 g，用少量水懸浮，依次用正己烷（450 ml×3 次）、氯仿（450 ml×3次）和甲醇（400 ml×3次）萃取，經(jīng)濃縮分別得到正己烷提取物280.7 g、氯仿提取物78.9 g和甲醇提取物18.9 g。

2.1.3 分離方法 將氯仿提取物反復(fù)用開放柱色譜進(jìn)行分離，用正己烷-氯仿、氯仿-甲醇溶劑系統(tǒng)梯度洗分別得到化合Ⅰ～Ⅳ。

2.2 結(jié)果

從炒制后東北蒼耳子的氯仿提取物中共分離得到4個(gè)化合物，其結(jié)構(gòu)鑒定數(shù)據(jù)如下：

化合物1：白色針狀結(jié)晶，mp.137.8～138.3℃，Libermann-Burchard 反應(yīng)陽性。 氫譜中顯示 δ：5.36（1H，H-6），3.53（1H，m，H-3），其余氫譜數(shù)據(jù)及碳譜數(shù)據(jù)均與文獻(xiàn)[6]報(bào)道的一致；與β-谷甾醇對照品共薄層展開，不同溶劑系統(tǒng)下Rf值完全一致，故可確定該化合物為β-谷甾醇。結(jié)構(gòu)見圖1。

化合物2：白色針狀結(jié)晶，mp.150～151℃，Libermann-Burchard 反應(yīng)陽性。 氫譜 δ：5.36（1H，H-6），3.53（1H，m，H-3），碳譜數(shù)據(jù) δ：138.3（C-22），129.3（C-23），均與文獻(xiàn)[7]報(bào)道的一致；與豆甾醇對照品共薄層展開，不同溶劑系統(tǒng)下Rf值完全一致，故可確定該化合物為豆甾醇。結(jié)構(gòu)見圖2。

圖2 豆甾醇

化合物 3： 白色針狀結(jié)晶，mp.302～304℃，Libermann-Burchard 反應(yīng)陽性。1HNMR（CD3OD）δ：5.25（1H，br，s，H-12），3.60 （1H，dd，J=2.5，415 Hz，H-3），0.83～2.06（24H，m），1.18（3H，s，CH3），1.02 （3H，s，CH3），1.00 （3H，s，CH3），0.94 （3H，s，CH3），0.91 （3H，s，CH3），0.83 （3H，s，CH3），0.80（3H，s，CH3）共有 7 個(gè)甲基信號；13C NMR（CD3OD）δ：40.4（C-1），28.8（C-2），84.5（C-3），40.4（C-4），69.5（C-5），19.7（C-6），33.9（C-7），40.6（C-8），56.8（C-9），39.2（C-10），24.7（C-11），123.5（C-12），145.4 （C-13），43.0 （C-14），29.3 （C-15），24.0 （C-16），49.8（C-17），42.7（C-18），48.0（C-19），31.7（C-20），34.8（C-21），33.9（C-22），29.3（C-23），17.5（C-24），17.1（C-25），17.7（C-26），26.2（C-27），181.8（C-28），33.7（C-29），23.9（C-30），均與文獻(xiàn)[8]報(bào)道的一致；與齊墩果酸對照品共薄層展開，不同溶劑系統(tǒng)下Rf值完全一致，故可確定該化合物為齊墩果酸。結(jié)構(gòu)見圖3。

圖3 齊墩果酸

化合物 4：淡黃色粉末，1HNMR（CDCl3）：δ2.10（2H，S，H-2），2.34（1H，m），6.24（1H，DD，J=9.0，3.0 Hz，H-5），2.20（1H，ddd，J=14.0，3.0，3.0，H-6），2，70 （1H，d，J=8.0 Hz，H-7），4.40（1H，m，H-8），1.70 （1H，m，H-9），2.20 （1H，m，H-10），3.00（1H，m，H-11），1.23（3H，d，J=7.5Hz，H-13），1.06（3H，d，J=7.5 Hz，H-14），2.29（3H，s，H-15）。13NMR （CDCl3）144.5（C-1），147.2（C-2），124.4（C-3），197.7（C-4），139.1（C-5），25.7（C-6），45.8（C-7），84.7（C-8），36.7（C-8），28.9（C-10），39.8（C-11），177.9（C-12），14.1（C-13），19.3（C-14），29.3（C-15），氫譜、碳譜數(shù)據(jù)均與文獻(xiàn)[9]報(bào)道的一致；鑒定該化合物為11-α，13-二氫蒼耳亭。結(jié)構(gòu)見圖4。

圖4 11-α，13-二氫蒼耳亭

3 討論

分離過程中谷甾醇與豆甾醇一起析出結(jié)晶，因?yàn)檫@兩個(gè)化合物的結(jié)構(gòu)只差一個(gè)雙鍵，所以性質(zhì)有些相似，從氫譜和碳譜的譜圖中可以看出谷甾醇里混有沒有雙鍵的豆甾醇，故需要通過重結(jié)晶的方法將二者分離開。

另外從分離得到化合物來看，這四種物質(zhì)均為首次從炮制后的東北蒼耳子氯仿提取物中分離得到，β-谷甾醇、豆甾醇、齊墩果酸和11α-，13-二氫蒼耳亭均存在未經(jīng)炮制的蒼耳屬植物中，至于其他生物活性物質(zhì)、毒性物質(zhì)的組成還有待于進(jìn)一步研究確定。

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