療養(yǎng)對涉核人員抗氧化能力的影響研究

閆明啟 朱承超 曲丹

(濟南軍區(qū)青島第一療養(yǎng)院第一療養(yǎng)區(qū)，266071)

療養(yǎng)對涉核人員抗氧化能力的影響研究

閆明啟 朱承超 曲丹

(濟南軍區(qū)青島第一療養(yǎng)院第一療養(yǎng)區(qū)，266071)

目的 研究療養(yǎng)對涉核人員機體輻射損傷和抗氧化能力的影響。方法 選取某部涉核療養(yǎng)人員60名，隨機分為干預組和非干預組，每組30人。另選非涉核療養(yǎng)人員15人為對照組。全部實驗對象均進行常規(guī)療養(yǎng)和飲食，干預組在常規(guī)療養(yǎng)的基礎上施加營養(yǎng)補充和心理疏導等干預措施。分別在實驗前、后檢測各組人員淋巴細胞增生活性與DNA損傷水平、紅細胞溶血度、血清脂質過氧化物(MDA)含量和總抗氧化能力(T-AOC)等指標。結果 實驗后，干預組的平均MDA含量、紅細胞溶血度和DNA損傷水平均較非干預組顯著降低，而T-AOC和淋巴細胞增生活性則顯著升高，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。結論 綜合療養(yǎng)干預措施可改善涉核人員機體的氧化損傷狀況，提高抗氧化能力。

療養(yǎng)干預；輻射；損傷；抗氧化

涉核人員長期因從事核接觸作業(yè)，很容易發(fā)生不同程度的輻射損傷，導致機體白細胞減少、脂質過氧化水平升高、抗氧化能力降低等生理生化改變[1]。有研究報道，植物多酚和大豆復合物等可降低涉核人員的脂質過氧化水平[2-3]，對輻射損傷有一定防護作用。本文以來我院療養(yǎng)的某部涉核官兵為對象，探討了營養(yǎng)補充和心理疏導等綜合療養(yǎng)干預措施對涉核人員機體輻射損傷和抗氧化能力的影響。

1 材料與方法

1.1 主要實驗材料 酶標儀為美國Thermo公司產(chǎn)品，倒置顯微鏡和CO2培養(yǎng)箱為日本OLYMPUS公司產(chǎn)品，小牛血清和1640培養(yǎng)基為美國Gelman Sciences和GLBCD BRL公司產(chǎn)品，血清總抗氧化能力(T-AOC)試劑盒和丙二醛(MDA)試劑盒由南京建成生物技術公司提供。

1.2 實驗方法 選取來我院進行保健療養(yǎng)的某部涉核人員60名，均為男性，年齡25～40歲，隨機分為干預組和非干預組，每組30人。另選取同樣保健療養(yǎng)的非涉核人員15人作為對照組。全部實驗對象的臨床健康狀況、核接觸的時間、方式與劑量均基本一致，對本次實驗知情同意。

實驗期間，各組均按常規(guī)保健療養(yǎng)的方式進行休養(yǎng)、生活和飲食。干預組則在每周第1天和第4天各服用維生素C 100 mg、維生素B25 mg、維生素A膠丸1粒(10 000單位)和維生素E膠丸1粒(100 mg)，并每周安排1次心理疏導和舞會，與涉核人員心理溝通，減輕其焦慮、憂郁、恐懼心理。

實驗期為30 d。實驗對象均于來到我院療養(yǎng)的第2天和實驗結束的當天清晨各抽取空腹靜脈血6 mL，每份血樣分為不抗凝和肝素抗凝兩種處理。不抗凝血樣分離血清備檢，抗凝血樣分離淋巴細胞和紅細胞，制成密度為1×109/L的淋巴細胞懸液和1%的紅細胞懸液備檢。

1.3 檢測指標與方法

1.3.1 淋巴細胞增生活性 用四甲基偶氮噻唑藍(MTT)法檢測[4]。將淋巴細胞懸液接種于96孔板，每孔100 μL，每份血樣分為給予和不給予氧化劑兩種處理，各設4個平行孔。氧化劑為終濃度100 mmol/L的H2O2。置37℃，5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)24 h，加入濃度為5 g/L的MTT液20 μL/孔繼續(xù)培養(yǎng)4 h，取棄每孔上清液并加入DMSO 200 μL，用酶標儀測定細胞吸光度值。

1.3.2 紅細胞溶血度 每個樣本分為A、B兩個管，每管加入2 mL紅細胞懸液。A管加終濃度為100 mmol/L的H2O2，B管加等量蒸餾水，混勻。分別置于37℃水浴箱溫浴0.5 h，3 000 r/min離心5 min，取上清液，用721分光光度計在540 nm波長比色。溶血度(%)＝(A管吸光度值×B管吸光度值)×100%。

1.3.3 血清MDA和T-AOC 按照試劑盒提供方法檢測。

1.3.4 淋巴細胞DNA損傷水平 采用DNA堿性解鏈熒光分析法測定血淋巴細胞DNA損傷水平[5]，DNA含量用熒光強度(D值)表示，計算公式為D＝(P－B)/(T－B)×100%計算，式中T為總熒光強度，B為非DNA物質的熒光強度，P為除去受損傷DNA后的熒光強度。

2 結果

2.1 淋巴細胞增生活性 實驗前，干預組和非干預組淋巴細胞增生活性差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，但兩組均較對照組顯著性降低(P＜0.05)。實驗后，干預組經(jīng)給予和不給予氧化劑兩種處理后均較非干預組顯著升高(P＜0.05，表1)。

2.2 T-AOC、MDA和紅細胞溶血度 實驗后，干預組和非干預組的MDA和紅細胞溶血度均較實驗前顯著降低而T-AOC則升高，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05，表2)。

2.3 淋巴細胞DNA損傷水平 實驗前，干預組和非干預組淋巴細胞DNA含量水平差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，但兩組均較對照組顯著性降低(P＜0.05)。實驗后，兩組DNA含量均較實驗前升高，且干預組升高程度大于非干預組(P＜0.05)，DNA損傷程度降低明顯。各組DNA含量(D值)及損傷度的測定結果(表3)。

表1 各組實驗前后淋巴細胞增生活性檢測結果(±s)

表1 各組實驗前后淋巴細胞增生活性檢測結果(±s)

注：與實驗前非干預組比較，aP＞0.05；與實驗后非干預組比較，bP＜0.05；與氧化劑(＋)組比較，cP＜0.05

干預組非干預組組別 n 氧化劑(+) 氧化劑(-)實驗前 30 0.77±0.06a 0.40±0.09c實驗后 30 0.83±0.08b 0.50±0.05bc實驗前 30 0.76±0.05 0.41±0.03c實驗后 30 0.80±0.03 0.45±0.07c非涉核 對照組 15 0.96±0.07 0.59±0.08c

表2 各組實驗前后脂質過氧化指標檢測結果(±s)

表2 各組實驗前后脂質過氧化指標檢測結果(±s)

注：與實驗前干預組和非干預組比較，aP＜0.05；與實驗前非干預組比較，bP＞0.05；與實驗后非干預組比較，cP＜0.05

干預組組別 n T-AOC(U/mL) MDA(nmol/mL) 紅細胞溶血度(%)實驗前 30 14.56±1.53b 4.89±0.43b 24.24±1.02b實驗后 30 16.12±1.67c 4.49±0.37c 22.89±1.13c實驗前 30 14.91±1.09 4.94±0.35 24.78±0.89實驗后 30 15.25±1.52 4.61±0.35 23.99±1.01非涉核 對照組 15 17.80±1.55a 4.04±0.44a 20.85±0.93a非干預組

表3 各組實驗前后淋巴細胞DNA損傷檢測結果(±s)

表3 各組實驗前后淋巴細胞DNA損傷檢測結果(±s)

注：與實驗前非干預組比較，aP＞0.05；與實驗后非干預組比較，bP＜0.05

組別 n DNA含量(D值) 損傷度(%)干預組 實驗前 30 37.06±1.71a 29.80實驗后 30 42.82±1.93b 18.89非干預組 實驗前 30 37.31±2.06 29.32實驗后 30 40.33±1.62 23.60非涉核 對照組 15 52.79±1.59 0.00

3 討論

涉核人員長期接觸放射性核素，會引起機體不同程度的氧化損傷，致使抗氧化能力降低[6]。淋巴細胞具有很高的輻射敏感性，輻射損傷后抗氧化能力減弱，增生活性降低。本次實驗結果顯示，實驗前干預組和非干預組淋巴細胞增生活性均低于對照組，說明涉核人員淋巴細胞增生活性下降。實驗后干預組和非干預組增生活性均升高，且干預組升高幅度大于非干預組，說明療養(yǎng)后涉核人員淋巴細胞增生活性得到了改善；干預組較非干預組改善更為明顯。體外加入氧化劑培養(yǎng)結果也可見，雖然兩組增生活性均降低，但干預組降低的幅度小于非干預組，提示干預組抗氧化能力高于非干預組，療養(yǎng)期間實施的綜合干預措施對保護淋巴細胞增生活性有良好作用。

MDA是脂質過氧化反應的產(chǎn)物，其含量反映了脂質過氧化反應程度的強弱和機體細胞受自由基損傷的程度[7]。MDA升高，提示脂質過氧化反應增強，機體受到了氧化損傷。紅細胞溶血度與機體的抗氧化水平密切相關，發(fā)生脂質過氧化反應時，H2O2可交聯(lián)紅細胞膜上的磷脂和蛋白質，也可氧化蛋白質的巰基，損傷紅細胞，發(fā)生溶血[8]。T-AOC是衡量機體抗氧化能力的重要指標，機體受到氧化損傷時T-AOC水平降低。本次實驗結果顯示，實驗前，干預組和非干預組的MDA和紅細胞溶血度明顯高于對照組，而T-AOC降低，說明兩組人員已受到氧化損傷。實驗后MDA和紅細胞溶血度均下降，且干預組較非干預組下降更明顯，T-AOC水平提高，說明綜合療養(yǎng)干預措施能有效提高機體抗氧化能力。

DNA損傷水平可敏感反映機體氧化損傷狀況，核接觸人員可因輻射線激發(fā)體內(nèi)形成大量自由基而導致DNA損傷[9]。本次實驗結果顯示，實驗前干預組和非干預組的DNA含量均低于對照組，說明涉核人員機體受到氧化損傷。實驗后兩組的DNA含量均較實驗前增高，且干預組較非干預組增高更為明顯，DNA損傷度明顯恢復，說明綜合療養(yǎng)干預措施對改善涉核人員機體氧化損傷狀況、促進輻射損傷的康復有良好效果。

綜合本次實驗可以認為，療養(yǎng)尤其是施加了綜合療養(yǎng)干預措施，對提高涉核人員機體抗氧化能力，降低氧化損傷水平，促進輻射損傷的康復有良好作用。

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Objective To study the influence of rehabilitation on radiation damage and antioxidant capacity of nucleus-related personnel.Methods 60 nucleus-related convalescents were randomly divided into the intervention group and the non-intervention group with 30 people in each group.Another 15 non-nucleus-related convalescents formed the control group.All experimental subjects were given conventional rehabilitation and diet，while the intervention group were given extra nutritional supplements and psychological counseling.The indexes of lymphocytic proliferation activity，DNA damage level，erythrocytic hemolysis extent，MDA content，and T-AOC before and after the experiment were measured.Results After the experiment，the average MDA content，erythrocytic hemolysis extent，DNA damage level of the intervention group were clearly lower than those of the non-intervention group，while T-AOC and lymphocytic proliferation activity clearly increased.The differences were of statistical significance(P＜0.05).Conclusion Comprehensive rehabilitation intervention measures can improve the oxidative damage status of nucleus-related personnel，and enhance their antioxidant capacity.

Rehabilitation intervention；Radiation；Damage；Antioxidant

1005-619X(2012)12-1068-02

2012-11-06)